金标类检测试剂注册技术审查指导原则

附件四金标类检验试剂注册技术审查指导原则一、前言本指导原则主要对金标类检测试剂的主要原材料、生产工艺和反应系统、产品质量控制等环节提出指导性技术要求。本指南是金标类检测试剂的一般要求，申请人应根据产品特性决定其具体内容是否适用，如不适用，应详细阐述其原因和相应的科学依据。本准则为申请人和审核人的指导性文件，但不包括与注册审核相关的行政事项，也不作为法规实施，只要有符合相关法规要求的其他方法可以采用，需要提供详细的研究资料和验证资料。 本准则应按照相关法规使用。本指南是在现行法规、标准体系和当前认知水平上制定的，随着法规和标准的不断完善，科技的不断发展，其相关内容也将及时调整。二、适用范围本指南适用于第三类体外诊断试剂中金标类试剂的注册技术审查，其他类金标试剂可供参考。三、基本要求(一)基本原则；1、诊断试剂的开发、生产用的各种原料、辅料应制定相应的质量指标，满足有关法规的要求。2、诊断试剂生产企业应具备相应的专业技术人员、仪器设备及适当的生产环境，获得医疗器械生产许可证。 同时，生产企业必须按照体外诊断试剂生产实施细则（试行）的要求建立相应的质量管理体系，形成文件和记录，实施并维持有效运行的生产企业必须通过体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准（试行）的审核。3、诊断试剂的研制应按照科学、规范原则组织，各反应条件的选择和确定应符合基本科学原理。4 .开发生产过程中使用的材料和技术，必须充分考虑可能涉及的安全性。5 .生产和质量控制总体目标：保证试剂安全、质量稳定、过程控制、检测有效。(二)原材料质量控制；1 .主要生物原料与产品质量最密切相关的生物原料是各种天然抗原、重组抗原、单克隆抗体、多克隆抗体和多肽类生物原科。 这种原料可以用于胶体金标记、包复硝酸纤维的膜以及用于质控线制造的抗原和抗体等。 使用前，应当按工艺要求对这种生物原料进行质量检测，保证其符合规定的质量标准。 如果主要的生物原料是企业自身的生产，那么其技术必须比较稳定购买的，其供应商的要求是相对固定的，不能随意变更供应商。 主要原料(包括流程)或其供应商有变更的，按照国家有关法规的要求提出变更申请。主要生物原料常规检验项目一般如下：(1)外观用肉眼观察，大多数生物原料是清澈均匀的液体、不含异物、混浊、不分散的沉淀或粒子的白色粉末，不含其他颜色的杂质； 特殊的生物原料必须具备相应的外观标准。(2)纯度和分子量主要在经过SDS-PAGE电泳后，用电泳扫描仪进行分析，也可以利用其他适当的方法，例如高效液相法等。 根据标本原料的分子量选择合适的聚丙烯酰胺凝胶浓度进行电泳。 每个普通的电泳道的样品量为5g的电泳后的凝胶可以用cource bright蓝染色或银染色法染色。 染色凝胶应用电泳扫描仪分析原料纯度和分子量，纯度应符合相应的质量标准，分子量大小应在正确的带位置。(3)蛋白质浓度蛋白浓度可以用Lowry法、280nm光吸收法、缩二脲法等测定。(四)有效价格效价的测定一般根据蛋白含量的测定结果，采用倍比稀释法进行。 有效价格应符合规定的要求。(5)功能性实验功能性实验是指，生物原料在试剂盒的实际生产中使用的情况下，通常调查使用该原料的试剂的灵敏度、特异性、稳定性等，比较其与前批原料的关联性。 用于制造质量管理线的抗原或抗体可以以其他适当的方式进行功能性实验。2 .生物辅助材料生物辅助材料是一般在生产过程中作为蛋白保护剂使用的生物原料，主要包括牛血清白蛋白等。 这些生物原料的质量标准满足中国生物制品主要原辅材料质控标准（2000年版）规定的质量标准要求，检测合格，达到相应的质量标准才能用于生产。牛血清白蛋白建议进行以下检查外观：淡黄色、黄色、乳白色冻干粉，无吸湿，无结块，无肉眼可见的其他杂质颗粒。溶解性：牛血清白蛋白配合到10%溶液中，溶解时间为1826，15分钟以下，pH为6.57.1。总蛋白含量：用缩二脲法测定，其标准在95%以上。总蛋白中牛血清白蛋白(BSA )含量：采用硝酸纤维素膜电泳法，其标准为95%。BSA净含量：总蛋白含量乘以总蛋白中BSA含量，其标准为90%。生物辅助材料的供应商也要求相对固定，不得随意更改供应商。3 .化学原材料化学原材料质量标准参照中国生物制品主要原辅材料质控标准（2000年版）分析的纯水平进行检测。 主要检测指标为外观、一般盐类检测、溶液pH值、溶解状况、干燥减量、灼热残渣等。主要化学原材料供应商要求相对固定，不得随意更改。 购买化学原材料时，原材料厂家必须提供其批量化学原材料的质量保证材料和质量检验报告。 其质量标准必须达到生产所需的质量标准。4 .其他物料硝酸纤维素膜、玻璃纤维和聚酯纤维膜以及滤纸、玻璃纤维膜等在购买时，其生产厂家应当提供该批材料的质量保证材料和质量检测报告，其质量标准应当满足生产所需的质量标准。(1)硝酸纤维素膜硝酸纤维素膜具有厚度、孔径等要求，毛细管移动速度、韧性(切断时膜破损引起的不良率)、均匀性(厚度偏差范围、毛细管移动速度偏差范围)应满足规定的要求。(2)玻璃纤维或聚酯纤维薄膜及滤纸玻璃纤维或聚酯纤维的膜或滤纸具有厚度、毛细管移动速度、重量等要求，均匀性(厚度偏差范围、毛细管移动速度偏差范围、重量偏差范围)应符合规定的要求。(3)玻璃纤维膜全血检测所用的金标试剂具有过滤红细胞的玻璃纤维膜和其他材料不吸附蛋白质的特点，具有厚度、孔径等要求。(4)塑料衬里塑料衬里必须具有厚度、硬度(切割时不可一次切割的百分比)、尺寸(符合标记)、粘性(切割时玻璃纤维和塑料衬里分离的百分比)等要求。(五)其他事项粘胶纸、铝箔袋、说明书、包装外箱、瓶和干燥剂等，应参照国家食品药品监督管理局公布的体外诊断试剂说明书编写指导原则和医疗器械说明书、标签和包装标识管理规定建立相应的质量控制标准。(3)配件的制备此类试剂的生产包括胶体金和胶体金标记抗原或抗体的制备、胶体金标记包复、检测线和质量控制线的制备、胶体金标记物、包复抗原或抗体等浓度决定、各种工作溶液的配置等工序，通过产品的半成品检测和产品检测两个质量控制过程保证质量满足规定。1 .胶体金标识物的制备用柠檬酸三钠还原法或其他方法制备胶体金时，胶体金粒子的大小符合规定，胶体金标记物在510560nm的波长下需要最大吸收值，应在28保存，在规定的保存期内使用。 用适当的方法确定胶体金标记物，确定复盖抗原或抗体的活动浓度，使活动浓度的胶体金标记物吸附在玻璃纤维或聚酯纤维膜上。2 .检测线及质量控制线的制备取已确定使用浓度的相关抗原或抗体，在硝酸纤维素膜上制作检测线，用同样的方法制作质量控制线，按生产工艺在规定的温度、湿度条件下干燥，在规定的湿度(用验证方法确定相对湿度要求)条件下保管。 检测线和质量控制线应有分离距离的要求，对所用金标玻璃纤维和硝酸纤维素薄膜等进行质量检测，记录尺寸、外观、包装和吸附性能等，记录批号、数量、标识，不得混合批号不同的玻璃纤维和硝酸纤维素薄膜。3 .贴上、剪下或装袋贴膜、切断、装袋必须在相应湿度(通过验证方法确定相对湿度的要求)的条件下操作，要求切断的膜的宽度。(四)质量管理半成品和成品的质量管理所使用的质量管理品包括灵敏度、特异性、精度等指标，例如具有国家标准品(参考品)的产品必须使用国家标准品(参考品)或国家标准品(参考品)标准化的企业参考品进行检查。 某些试剂没有国家标准品(参考品)的，企业参考品、企业参考品的制造应用规范的质量控制程序，保证产品的安全性、有效性和质量控制，其质量不得低于国家食品药品监督管理局认可的同类产品的质量。1 .半成品的质量控制(1)半成品样品检查员按批号抽取规定数量的半成品，编号等待检查。(2)半成品检查对取样的半成品，应进行阴/阳性参考品的适合率、灵敏度、特异性、精度等试件性能方面的检测，以满足质量标准。企业应对各批试剂半成品进行稳定性研究，制定相应的质量标准。 稳定性试验可在特定温度或特定条件下进行。2 .成品质量控制每批金标类检测试剂的试验产量应满足技术研究、分析性能验证、稳定性研究、临床试验、自测及注册检测等各个阶段所需样品量的要求。一般使用国家标准品(参考品)检验成品，满足相应的质量要求。 该诊断试剂没有国家标准品(参考品)的，在企业参考品、企业参考品的制造中使用规范的质量控制程序，保证产品的安全性、有效性和质量控制，其质量不得低于国家食品药品监督管理局认可的同类产品的质量。(1)物理检查应进行外观平整、材料粘附牢固、液体迁移速度、薄膜宽度等物理检测，符合质量标准。(2)性能方面的检查阴/阳性参考品应满足率、灵敏度、特异性、精度等试剂盒性能方面的检测，满足质量标