实验二 FeCl3中微量铁的测定.ppt

实验二FeCl3中微量铁的测定，以把握使用分光光度计为目的。 采用标准曲线法进行定量分析，掌握分光光度法测定药物和水中铁含量的方法和原理。 原理上，铁是药物和水中常见的杂质，含量多容易产生特殊气味的显色剂的基本原则- -亚铁离子和邻重氮菲能生成稳定的橙色配合物。 Fe2，应用该反应可以测定铁，当铁作为Fe3离子存在于溶液中时，用还原剂(盐酸羟胺或氢醌等)可以还原成Fe2离子的酸度过低，二价铁离子容易水解。 最大吸收波长为508nm，=11100 .机器和试剂，(1)722型分光光度计(2)容量瓶(10ml，7个)。 (3)吸液管(2，2，1 ml ) (4)洗耳球(5)擦拭镜纸(6)标准铁溶液(20g/ml)(7)o-重氮菲0.1%水溶液(8)盐酸羟胺1%水溶液(使用时调制) (9)HCA-NaAc缓冲溶液(10)FeCl3测定液，4 .操作顺序，1 .标准曲线的制作标准溶液的浓度为横轴具体步骤为，在6只10ml容量瓶中，用移液管分别加入0.0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml的铁标准溶液(每ml硫酸铁铵含有fe3的20g )，盐酸羟胺0.2ml、o-重氮0.4ml、HAC-naac 用水稀释至刻度后摇动，用5min.1cm比色盘放置铁的含量绘制横轴、吸光度a绘制纵轴、标准曲线，如2.FeCl3那样进行测定，将FeCl3作为样品，准确地采集样品1.00ml (或适量)， (1)通过在相同条件下测定样品溶液的吸光度，能够从标准曲线检测样品溶液中的被测定成分的浓度， (2)线性回归一系列标准溶液的浓度及其相应的吸光度，将样品溶液的吸光度导入回归方程，计算样品溶液中被测成分的浓度。 线性回归法制作的标准曲线比手绘法客观，因此现在的文献报告中多采用该法。 标准曲线的调制例是将对照品1.110mg用甲醇溶解后固定在10ml中，用移液管将0.4ml、0.8ml、1.2ml、1.6ml、2.0ml、2.4ml分别固定在10ml的容量瓶中作为对照溶液，用268nm测定其吸收度， 测定结果如表2所示的table2linearrelationshipofstandardmaterialno.contentofstandardamateral (mg/l ) 14.44000.095228.88000.187313.3200.277417.7600.365522.2000.458626.6400.553，将对照品的吸收度和浓度进行线性回归，得到回归公式： a=0. 02063 c0. 0010010014=0. 99 以对照品溶液的浓度为横轴、吸收度为纵轴，制作标准曲线，如Fig3所示。 以对照品的浓度绘制吸收度，得到直线，根据Fig3、fig5normanlcurveofstandardmateral、思考问题、显色反应操作中添加的各标准溶液与样品液的酸含量不同，对显色有影响或制作标准曲线测定的数据， 本次实验判断浓度与吸光度之间的线性差，分析其原因，注意事项、测定溶液的量应超过比色盘的2/3，但不太满足。 实验过程中，请注意不要把溶液洒在飞机上。 如果发生这样的事情，请马上把它弄干净。 比色盘用后，清洗后，用95%乙醇浸泡，不要长时间使用。 擦干净后请收拾好。 附属： 722型分光光度计的使用方法，接通电源后，需要预热20分钟。 波长设定必须从短波向长波的方向调整。 调零必须在透射率模式下将比色盘托架