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文档简介

.,血糖的测定,实验四,.,血糖及血糖水平的概念：,血糖：指血液中的单糖：葡萄糖,血糖水平：血浆中葡萄糖浓度,血糖总维持在恒定水平：3.96.7mmol/L,.,调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。血糖水平异常：高血糖及糖尿病；低血糖,.,临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些药物的研究中，也涉及血糖的测定。,测定血糖的意义,.,测定方法,无机化学法：Folin-Wu法,有机化学法：邻甲苯胺法,酶法：葡萄糖氧化酶法,血糖测定的常用方法,.,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理,（1）葡萄糖O2H2O,（2）H2O24-氨基安替吡啉苯酚,葡萄糖酸H2O2,葡萄糖氧化酶（GOD）,H2O红色醌式物质,过氧化物酶（POD）,Trinder反应,505nm,光吸收法测定,相对血糖浓度,.,分光光度计的工作原理,.,朗伯-比尔定律,朗伯定律：A=k1L比尔定律：A=k2C朗伯-比尔定律：如同时考虑液层厚度和溶液浓度对吸光度的影响，则吸光度与溶质的浓度和溶液的厚度的乘积成正比。A=KLC,.,朗伯-比尔定律应用,A标=KC标LA样=KC样L,标准品法测定未知样品含量,.,1.接通电源，调整波长。2.比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度计中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的2/3。3.调模式为“透射比”，对空白对照进行调“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。4.调模式为“吸光度”，将空白对照调“0”，测定待测样品的吸光度值。,分光光度计的使用,.,.,.,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测激素对血糖浓度的影响,方法,.,（1）取4支试管，按下表加入试剂:,实验步骤：,充分混匀，37水浴中保温20min；,冷却至室温后，505nm处比色,比色方法：以空白管调零，读取标准管及测定管光密度值。,.,（2）计算：依据朗伯-比尔定律：A=KLC标准管葡萄糖浓度：5mmol/L,.,正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液应占比色皿的2/3。血糖测定应在取血后2小时内完成，放置太久，血糖易分解，故使含量降低。酶酚混合液一般现用现配。,注意事项,.,小结,1、葡萄
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