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文档简介
第七章体液蛋白检测、人白蛋白分子和第二章本章内容概述:第二节体液蛋白检测、第一节概述、第三节掌握血浆蛋白的组成、功能和分类;单个血浆蛋白(前白蛋白、白蛋白)的来源和生理功能;血清总蛋白和白蛋白的测定方法和原则。2、熟悉急性期反应蛋白的概念和类型;血清球蛋白和纤维蛋白原的测定方法。3.了解其他蛋白质的来源和生理功能;尿蛋白和脑脊液蛋白的检测。(1)血浆蛋白的分类和功能,(2)血浆蛋白的组成,(3)组织蛋白的营养和修复。血浆胶体渗透压的维持:主要是白蛋白;(3)作为酸碱度缓冲系统的一部分:酸性或碱性蛋白质;(4)运输:作为激素、维生素、脂类、代谢物、离子、药物等的载体。体液免疫防御系统:如免疫球蛋白和补体等免疫分子;催化:酶的本质;代谢调节;作为底物,酶或中间产物抑制或激活组织蛋白酶;参与凝血和纤溶;因子除外。血浆蛋白的功能,7,血浆蛋白的分类,7,分离法,盐析法:白蛋白/球蛋白(pH7.0的半饱和硫酸铵溶液),电泳法:醋酸纤维素薄膜电泳:6,琼脂糖凝胶电泳:13,聚丙烯酰胺凝胶电泳:30,SDS聚丙烯酰胺凝胶等电二维电泳:300,分辨率提高,纤维蛋白原,醋酸纤维素膜,8,醋酸纤维素膜电泳或琼脂糖电泳:5组分当分辨率1和22或2聚丙烯酰胺凝胶电泳可分为7个组分:可分离30多种蛋白质,醋酸纤维素膜电泳或琼脂糖电泳:5个组分,白蛋白1球蛋白2球蛋白球蛋白球蛋白,2个组分。 电泳分类是临床实验室常用的血浆蛋白电泳方法,可有1和22等7种成分,也可有2种聚丙烯酰胺凝胶电泳,可分离30多种蛋白质。9,3。功能分类,(1)载体样血浆脂蛋白:包括胆固醇、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等前白蛋白和白蛋白、甲状腺素结合球蛋白、皮质素结合球蛋白、类固醇激素结合球蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、结合珠蛋白、血红蛋白结合蛋白、铜蓝蛋白。(2)蛋白酶抑制剂:包括6种以上1-抗胰蛋白酶、1-抗胰蛋白酶、2-巨球蛋白等。(3)血清酶:LCAT等组织细胞少量释放的细胞内酶。在分解并进入血液循环的血浆中,(4)蛋白质激素:胰岛素、胰高血糖素、生长激素等。(5)凝血蛋白(6)免疫球蛋白(7)补体蛋白、(2)蛋白酶抑制剂:包括6种以上的血清酶(3)如1-抗胰蛋白酶、1-抗胰蛋白酶、2-巨球蛋白等。(3)LCAT等组织细胞少量释放的胞内酶。血浆固有酶,如细胞内酶,如细胞分解酶,和细胞内酶(4)蛋白质激素,如胰岛素、胰高血糖素、生长激素等。(5)凝血蛋白(6)免疫球蛋白(7)补体蛋白,仍有许多种类的蛋白尚未被识别,仍有许多种类的蛋白尚未被识别,2。功能分类。1.作为载体蛋白2。组织蛋白酶抑制剂3。在血浆中起催化作用的酶。参与代谢调节的蛋白质和肽激素。参与凝血和纤溶6。构成体液免疫防御系统(Ig和补体)。所有血浆蛋白都能维持血浆胶体渗透压,形成血液酸碱度缓冲系统。血浆蛋白的功能,生物化学, 12,急性肾反应(APR):血浆蛋白对急性炎症和组织损伤的非特异性反应。此时,许多蛋白质,如1-抗胰蛋白酶、1-酸性糖蛋白、触珠蛋白、铜蓝蛋白、C4、C3、纤维蛋白原和C-反应蛋白的浓度显著增加或升高,而一些蛋白质,如前白蛋白、白蛋白和转铁蛋白,则相应降低。急性胰腺炎反应蛋白:血浆蛋白,对急性炎症和组织损伤有非特异性反应,因此浓度发生变化。增加的蛋白被称为阳性蛋白,减少的蛋白被称为阴性蛋白。1.急性期反应,(3)影响血浆蛋白浓度的因素,13岁。身体的哪些状况会有急性期反应?急性细菌感染的机制,如急性肺炎、链球菌感染性肾炎、急性非特异性炎症,如急性心肌梗死、恶性肿瘤手术、外伤等。14、APR,如风湿性关节炎、类风湿性关节炎、风湿性心脏病,以及炎症损伤部位释放的细胞因子,包括白细胞介素、肿瘤坏死因子和、干扰素、血小板活化因子等。引起肝细胞中上述蛋白质合成的变化。积极的APP是身体防御机制的一部分。例如,增加的蛋白酶抑制剂控制组织中的酶活性,触珠蛋白保护受损红细胞释放的HbC反应蛋白,等等。它可以激活补体阴性的APP作为营养蛋白。此时,合成减少,从而为合成阳性APP提供了更多的氨基酸原料。相,C-反应蛋白,15,APR:首先,增加1-酸性糖蛋白:在12小时内也增加1-抗胰蛋白酶,结合珠蛋白,C4和纤维蛋白原,然后增加C3和铜蓝蛋白;最后,在2-5天内将这些APPs增加到最高值,16,测量APP的临床意义,帮助监测炎症的发生和变化并观察治疗反应,特别是那些增加最早和最多的蛋白质,17,30,2,血清蛋白电泳成分的临床分析,以及血浆蛋白和血清蛋白之间的区别是什么?血浆:生理状态血清:普通标本,血浆蛋白和血清蛋白有什么区别?血浆:生理状态血清:普通试样。18、31、1)血清蛋白电泳正常组分及含量,白蛋白:57% 68% 1球蛋白:1.0% 5.7% 2球蛋白:4.9% 11.2% 球蛋白:7% 13% 球蛋白:9.8% 18.2%,醋酸纤维素膜电泳白蛋白正常百分含量为57% 68% 1球蛋白:1.0% 5.7% 2球蛋白:4.9% 11.2% 球蛋白:7% 13% 球蛋白:7%.20,21,1 .肾病综合征,2 .肝硬化,正常图谱,典型-桥,非典型-桥,IgG型,IgA型,3 .多发性骨髓瘤,2,典型异常电泳图谱及其扫描曲线。22,(4)球蛋白和m蛋白增加,Ig多克隆特性增加:在反复或慢性感染、自身免疫性疾病、肝细胞疾病或寄生虫感染中可以看到区的弥漫性增加。免疫球蛋白单克隆增加-M蛋白:当窄带浆细胞瘤,特别是恶性浆细胞瘤,在区局部深度感染时,异常浆细胞瘤单克隆增殖产生大量单克隆免疫球蛋白或轻链或重链片段,单结构M蛋白可出现在患者血清或尿液中,免疫球蛋白多克隆增加:在反复或慢性感染、自身免疫性疾病、肝细胞疾病或寄生虫感染中可见到区弥漫性增加。免疫球蛋白单克隆增加-M蛋白:当窄带浆细胞瘤,特别是恶性浆细胞瘤,在区局部深染时,异常浆细胞瘤单克隆增殖产生大量单克隆免疫球蛋白或轻链或重链片段,并且在患者的血清或尿中可能出现单一结构的M蛋白、23,2,血浆蛋白,(一)前白蛋白(二)白蛋白(三)1-酸性糖蛋白(AAG)(四)甲胎蛋白(五)结合珠蛋白(六)2.24,结构:分子量=54000,四个相同亚基的四聚体。理化性质:等电点=4.7,肝细胞合成,半衰期12小时。测定方法:免疫比浊/免疫扩散技术。功能:营养指数、载体功能(甲状腺素/维生素A)。临床意义:1。作为营养不良的早期指标;2.作为肝功能异常的指标,它比白蛋白更敏感。3.在急性时相反应蛋白阴性、急性炎症、恶性肿瘤、肝硬化和肾炎的情况下,PA迅速降低。参考值:0.18 0.45克/升。26、急性期反应蛋白、27、28,29,结构:585个氨基酸残基的单链多肽,分子量=66458,含有17个二硫键。理化性质:PI=4-5.8,肝细胞合成但不储存,半衰期为15-19天,占总蛋白的40%-60%,pH 7.4带负电荷。测定方法:色素结合法:溴甲酚绿(BCG)、溴甲酚紫(BCP)、盐析法等。(2)白蛋白(ALB)急性期反应蛋白,30,功能:营养,载体功能(高亲和力),维持血浆渗透压和正常的酸碱度。临床意义:合成受食物影响,敏感性低。营养不良、肝功能障碍、急慢性肝病减少:增加33,360是罕见的和假增加。参考值:35-50克/升。如糜蛋白酶和弹性蛋白酶,但其抑制作用明显依赖于ph值。临床意义:降低:血浆AAT仅见于胎儿呼吸窘迫综合征。升高:炎症,手术后,激素治疗后。参考值:0.83-1.99克/升. 32,结构:由181个氨基酸残基组成的单链多肽,分子量=40,000,含糖45%,唾液酸占11%-12%。理化性质:pI值2.7-3.5,肝脏合成,粒细胞和单核细胞以及一些肿瘤组织也可在脓毒症时合成。位于1-球蛋白区。测定方法:免疫化学法(扩散法、浊度法)、化学法(间接法)、酶联免疫法等。(3) 1-酸性糖蛋白(AAG)急性期反应蛋白,33,功能:与免疫防御功能有关,机制不明;抑制血小板聚集和影响胶原纤维形成;参与脂质运输。临床意义:升高:急性炎症、组织损伤、风湿、肿瘤、急性心肌梗塞、溃烂;减少:减少营养不良、严重肝损伤和雌激素效应。参考值:0.25-2.0g/l。嘿。34,结构:590个氨基酸残基的单链多肽,分子量=65,000 70,000,含糖4%。理化性质:pI值为4.7-4.8,介于白蛋白和1-球蛋白之间。成人胎儿肝脏/卵黄囊的合成很少,这种增加是由于肿瘤细胞的合成。测定方法:免疫化学法(扩散、火箭电泳)、酶联免疫吸附法等。(4)甲胎蛋白。35,功能:胎儿血浆中的主要蛋白,调节肝细胞生长和脑细胞发育;抑制细胞和体液免疫反应;保持正常妊娠并防止母婴排斥。临床意义:胎儿产前监测(羊水或母血)增加:原发性肝癌患者的诊断和鉴别(原发性升高的80%),其他癌症也增加。参考值:20-100微克/升(成人)5微克/升(新生儿)。结构:两对肽链形成具有变体的四聚体。理化性质:肝脏合成,pI值4.1,电泳位置a2-球蛋白带测定方法:电泳,免疫化学方法(扩散,混浊),化学方法等。(5)结合珠蛋白(Hp)急性时相反应蛋白,37,功能:与红细胞释放的游离Hb结合,防止Hb从尿中失去储存的铁,在急性溶血后一周再生和恢复。高效过氧化物酶。含铁细菌的天然抑菌剂。临床意义:升高:急性期反应;减少:当血管发生溶血时;雌激素作用。参考值:0.5-2.2g/L。38,结构:Mw=62-800,000,分子量最大,由四个相同的亚基组成,糖含量约8%。理化性质:在肝细胞和单核吞噬细胞系统中合成,半衰期为5天。测定方法:免疫化学等。(6)不属于急性期反应蛋白的2-巨球蛋白。功能:与各种分子和离子结合,影响蛋白水解酶活性(主要蛋白酶抑制剂具有选择性保护某些酶的功能)。临床意义:婴幼儿高于成人;升高:雌激素和低蛋白血症,尤其是肾病综合征,可显著升高以维持血浆胶体渗透压;减少:胰腺炎和p参考值:1.31-2.93克/升,40,结构:Mw=120-160,000,单链多肽由1046个氨基酸残基组成,每分子铜蓝蛋白含有约10%的糖和6-8个铜原子。理化性质:肝脏合成,少量巨噬细胞和淋巴细胞合成;PI值为4.4,具有遗传多态性。测定方法:免疫化学(扩散或比浊法)等。(7)铜蓝蛋白(CER/CP)急性时相反应蛋白,41,功能:氧化酶活性和抗氧化功能,铜的无毒代谢库的临床意义:增加-感染、创伤、肿瘤;减少-营养不良、严重肝病和肾病综合征;为了帮助诊断肝豆状核变性,参考值为:0.21-0.53克/升。42,结构:Mw=77,000,单链糖蛋白,含有约6%的糖。理化性质:肝细胞合成,pI值为5.5-5.9,半衰期为7天,可逆结合铁、铜、锌、钴等多价离子。一个分子TRF可以结合两个三价铁。测定方法:免疫扩散法、放射免疫分析法和免疫比浊法等。(8)转铁蛋白(TRF/Tf)急性期反应蛋白,43,功能:转运铁。临床意义:血TRF浓度受铁供应调节,缺铁性TRF增加,铁治疗后恢复。它可用于诊断贫血(TRF是缺铁性低色素性贫血增加,而TRF是正常或再生障碍性贫血减少)和监测治疗。减少:急性时相反应、慢性肝病、营养不良和蛋白质损失;升高:怀孕或雌激素会降低它;缺铁性低色素贫血。参考值:2.5-4.3克/升(成人)1.30-2.75克/升(新生儿)。44,结构:分子量=11800,由100个氨基酸残基组成的单链多肽,分子中含有一对二硫键,不含糖。理化性质:pI值为5.7,淋巴细胞合成并存在于细胞表面,尤其是淋巴细胞和肿瘤细胞。释放到血液循环中。半衰期107分钟,几乎由肾小管恢复。测定方法:放射免疫化学等。(9)2-微球蛋白(BMG)。功能:小分子量,自由通过肾小球滤过膜,在肾小管中几乎完全重吸收,监测肾小管功能;它是人类白细胞抗原链的轻链部分。临床意义:增加:肾衰竭、炎症和肿瘤。参考值:1.0-2.5毫克/升(血浆)。46,自然:因出现在急性炎症患者血清中并能结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质而命名。结构:兆瓦115,000-140,000。该分子包含5个相同的亚单位。亚单元通过非共价键连接形成盘状聚合物。理化性质:肝脏合成,pI值6.2,在区电泳。测定方法:半定量沉淀法(早期)和免疫化学法。急性时相反应蛋白,47,功能:结合多糖、磷脂和核酸;激活补体和抗凝。临床意义:首次鉴定的急性时相反应蛋白是急性时相反应的敏感指标,其含量在急性心肌梗塞、创伤、感染、手术和肿瘤侵袭期间迅速增加,达到正常水平的2000倍。CRP是一个非特异性指标,应结合临床病史。参考值:8.0毫克
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