淋巴瘤基因克隆性重排检测ppt课件

淋巴瘤基因克隆性重排和IGHV体细胞超突变检查，辅助诊断，预后分析，指导药，MRD检查，血液肿瘤(通常肿瘤)检查方案mimi综合分子检查(旁准方案)，Moffitt， a.b.ands.s.Dave (2017 ).jclin oncol 35 (9) :955-962 .分子检查-淋巴瘤，最丰富的阳性对照，5，BIOMED-2唯一认可的商品化试剂，1，各种TB细胞重排类型全面可疑淋巴组织增殖性疾病克隆性分析的“金标准”在超过400例临床样品中被验证，反应系统稳定，结果可靠，3，2，4，淋巴细胞克隆性基因重排检测产品的特征是，B-细胞复制(bcr )/immunoglobulins (ig )、t -细胞复制(TCR )、淋巴细胞克隆性基因重排检测的目标分子ig和TCR-单一基因重排，即恶性淋巴细胞、IGH、TRB TRB IGL andTRG:VandJregions，正常淋巴细胞成熟过程/良性病变，多克隆性，多种基因重排，恶性淋巴瘤的发生过程，单克隆性，强调单一基因重排，多样性和克隆性， 鉴别诊断：淋巴组织反应性或淋巴细胞恶性增殖辅助诊断：少见类型淋巴瘤，如肝脾t细胞淋巴瘤亚类分析：明确b淋巴恶性增殖还是t细胞恶性增殖，包括监测复发和继发淋巴瘤微小残留病灶，为评价疗效和复发风险的细胞免疫治疗监测回输t细胞增殖情况和淋巴组织来源肿瘤细胞去除效果监测(NGS )，5%15%的病例复杂，即使进行大量免疫标记也很难鉴别其良恶性，需要进一步区分手段。 利用分子生物学手段分析Ig和TCR基因的克隆性重排被认为是WHO对该病诊断手段的重要补充。 淋巴细胞克隆性基因重排检测的临床意义基于PCR检测技术，简便、快速、低成本，所需DNA量少，对DNA质量要求不高。 灵敏度在10%以上，需要调制胶水，安全清洁性差。 基于PCR-毛细管电泳检测技术，灵敏度高、检测周期长，结果是目前市场上最直观可靠的检测方法。 灵敏度不能满足MRD的要求，难以定量地得到序列。 新兴技术，更高灵敏度(10-6 )，更高分辨率，更高通量，更广泛的应用。 但是成本高，设备高，操作复杂，时间长。 IGH、IGK、(IGL)(TRB、TRD、(TRG)BIOMED-2方案，唯一认可) IGHv (根据Eric准则)、igh、IGK、TRB、TRGIGHV、Invivoscribe公司的IdentiCloneTM系列是BIOMED-2唯一认可的商品化试剂，通过了CE认证，以其高度灵敏度和特异性成为可疑淋巴组织增殖性疾病克隆性分析的“金标准”。 IdentiCloneTM系列产品具有精心优化的标准化试剂组成，具有最丰富的阳性对照，复盖各种TB细胞的转位类型，经过400多例临床样品的验证，按临床产品标准进行质量检测和质量控制，反应系统稳定从Biomed-2到Invivoscribe-的唯一认可，Biomed-2的研究项目，Biomed-2的研究项目(以IGH为例)，vanDongen，J.J.M .et al.(2003 ).leukemia 17:2257 . Biomed-2的研究项目(以IGH为例) vanDongen，J.J.M .et al.(2003 ).leukemia.结果分析，(单)克隆性：扩增产物电泳在预期大小的范围内的一个或两个频带(峰显示组织中存在单克隆性增殖的细胞群。 多克隆性：在扩增产物电泳为分散涂片状(smear )或阶梯状(高斯分布)的转运组织中，淋巴细胞抗原受体基因的重排方式是多样性的。 显示组织中不存在单克隆性增殖的细胞群。 无扩增产物： PCR扩增后的电泳未见输送到检查组织的细胞，抗原受体基因重排(NK，非淋巴细胞)和DNA的质量差。淋巴瘤是一种用转基因检查进行辅助/鉴别诊断的方案，克隆性重排并不一定发生恶性病变的良性增殖，也呈现克隆性重排，如CD8 T细胞的淋巴增殖性病变、良性单克隆性球蛋白病、皮肤淋巴在免疫缺陷患者未检测出严重的EB病毒感染等克隆性重排，无法排除有恶性病变的明确恶性病变的免疫缺陷患者中，很少检测出克隆性重排，NK/T细胞淋巴瘤的IG和TCR基因呈胚系结构，也没有克隆性重排。 IG或TCR基因的重排并不一定是谱系的标记，特别是在许多前体淋巴细胞性肿瘤中存在谱系交叉，如血管免疫母细胞学淋巴瘤(AITL )。 单一发生反映谱系，同时阳性仅显示克隆性增殖，不能判断谱系的起源。 假阳性和假阴性技术、引物、反应条件分子克隆性结果的分析，可结合临床、形态学和免疫表型特征，最终诊断和分类淋巴瘤。 注意事项，为下一种疾病提供重要的预后信息：慢性淋巴细胞白血病(CLL )的前提： IGH克隆性重排与单克隆例外： V3-21重排区的表达与预后不良有关，与IGHV突变状态无关。 PS判定标准：PS区PS状态检查被推荐为新诊断CLL患者预后分析的生物标志物。 基于PFS :无进展生存时间(progressionfreesurvival )操作系统：总生存时间(Overallsurvival )、中国CLL/SLL的诊断和治疗指南(2018版)、IGHV区体细胞超突变检测的临床意义、PCR检测技术，简便、快速灵敏度在10%以上，需要调制胶水，安全清洁性差。 基于PCR-毛细管电泳检测技术，灵敏度高、检测周期长，结果是目前市场上最直观可靠的检测方法。 灵敏度不能满足MRD的要求，难以定量地得到序列。 新兴技术，更高灵敏度(10-6 )，更高分辨率，更高通量，更广泛的应用。 但是成本高，设备高，操作复杂，时间长。 IGH、IGK、IGL、TRB、TRD、TRG(BIOMED-2方案，唯一授权) IGHv (根据Eric方针)、igh、IGK、TRB、TRGIGHV，目前，欧洲慢性淋巴细胞白血病研究机构(europeanresearchicartitionon