第8章 芳胺类药物的分析-专.ppt

第七章胺类药物的分析TheAnalysisofAromaticaminesandAromaticalkylamines,芳胺类药物：氨基直接与苯环相连。,如:对氨基苯甲酸酯类、酰胺类等,芳烃胺类药物:氨基在烃基侧链上。如:苯乙胺类,分类：,一、对氨基苯甲酸酯类,具有对氨基苯甲酸酯的基本结构。,1结构特点：,第一节芳胺类药物的分析,（代表药物）：,盐酸普鲁卡因,苯佐卡因,盐酸丁卡因,2、化学性质（1）具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量；可与芳醛发生缩合生成Schiff碱；易氧化变色。（2）酯键易水解（3）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。,（4）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。,3、鉴别反应(1)、重氮化-偶合反应具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等，在酸性溶液中与NaNO2TS发生重氮化反应，再与碱性-萘酚TS偶合产生猩红色偶氮化合物。,直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠、苯佐卡因,苯佐卡因、盐酸普鲁卡因ChP（2005）鉴别（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀，可与具有芳伯氨基的同类药物区别。,(2)、水解产物的反应A苯佐卡因的鉴别试验取本品0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮沸，即有乙醇生成，加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。,B.盐酸普鲁卡因ChP（2005）,鉴别取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于过量的盐酸。,2-二乙氨基乙醇,过量,硫氰酸盐衍生物,盐酸丁卡因ChP（2005）鉴别取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80干燥，依法测定（附录C），熔点约为131。,（3）制备衍生物测熔点,典型UV参数lminlmaxlsAlmaxE1cm1%,(4)UV,盐酸布比卡因ChP（2005）鉴别取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录A）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.530.58与0.430.48。,（5）IR,盐酸布比卡因ChP（2005）鉴别本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。,盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查杂质来源制剂制备或贮藏过程中水解产生检查方法TLC杂质对照品法,4、杂质检查,精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液各10l，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14114）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。,5、含量测定(1)亚硝酸钠滴定法原理具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算出含量。,具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解；芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。,.操作中的主要条件重氮化反应属于分子反应反应速度受多种因素影响滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定,（1）加入适量KBr加速反应KBr为催化剂在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：,NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O,第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快,所以整个反应速度取决于第一步.,A1.当苯环上特别是氨基邻位或对位上有吸电基时,如,吸电基通过诱导效应使氨基上电子云密度降低，从而碱性降低，游离芳伯胺浓度增大，所以反应速度就快。,等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速度加快。,A2.当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如等。,供电基能使氨基碱性增强，这样氨基成盐的机会就增大，游离芳伯胺的浓度就减小，所以反应速度就慢。,（1）K1,（2）K2,K1300K2加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度,（2）加入过量的盐酸：加过量盐酸的目的：重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性溶液中稳定；防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果,盐酸1:2.56,（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处，一次将大部分滴定液放下，近终点时方改为慢速滴定,（3）室温条件下滴定1030,（5）.指示终点的方法A.永停滴定法ChP（2005）、BP（2005）,原理：在被测溶液中插入两个相同铂电极，在两个电极间加约50mV电压，并且在回路中串联一个灵敏的检流计（10A9/格）。当用NaNO2滴定时，在终点前，溶液中无亚硝酸，线路中没有电流，电流计指针指零。当到达滴定终点时，由于溶液中有微过量的HNO2，使得在两个电极上发生氧化还原反应,阳极：,导致在两电极间有电子流动，从而线路中有电流产生，使得电流计指针发生偏转并且不再返回零点。,阴极：,B外指示剂法淀粉-KI糊剂或试纸,原理：当达到滴定终点时，溶液中稍过量的NaNO2在酸性条件下氧化KI析出I2，I2遇淀粉显蓝色。,使用方法：滴定时，把淀粉-KI糊剂在白磁板上铺为薄层或制成淀粉-KI试纸，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液划过，如果立即出现蓝色即已到滴定终点。,外指示剂法的缺点：由于被滴定的溶液是强酸性，在没有达到终点时，KI在酸性条件下遇光能被空气氧化析出碘，就有可能呈现蓝色，而造成误判。由于经常蘸取溶液进行试验，可造成供试品的损失而带来误差。方法难掌握。,（3）电位法USP（24）（4）内指示剂法中性红不可逆指示剂,(2)非水滴定法（盐酸丁卡因、盐酸利多卡因）原理侧链烃胺的叔胺氮具有弱碱性,可采用非水溶液滴定法测定含量.非水碱量法溶剂：冰醋酸（醋酐）滴定液：高氯酸指示剂：结晶紫醋酸汞的作用,1.结构特点：,苯胺的酰基衍生物，其共性是具有芳酰氨基酰胺基邻位或对位有取代基。,第二节、酰胺类药物的分析,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,醋氨苯砜,代表药物：,盐酸利多卡因,盐酸布比卡因,2性质：水解后显芳伯胺特性共性具有芳酰胺结构，水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应。利多卡因、布比卡因，酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位阻，水解较为困难。所以其盐的水溶液比较稳定（利多卡因在80%的硫酸溶液中加热才能水解）,水解产物易酯化对乙酰氨基酚和醋氨苯砜,水解后产生醋酸,可在硫酸介质中与乙醇反应,发出醋酸乙酯的香味.酚羟基的特性(与FeCl3反应)具有酚羟基或水解后能产生酚羟基（对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用呈色。碱性利多卡因、布比卡因侧链中具有叔氨N原子，显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀试剂反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。,与重金属离子反应,a与铜离子的反应,b与钴盐反应,3.鉴别（1）重氮化-偶合反应具有潜在的芳伯氨基，水解或还原后，可发生重氮化-偶合反应。例如：对乙酰氨基酚,对乙酰氨基酚ChP（2005）鉴别取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。,（2）三氯化铁反应对乙酰氨基酚,对乙酰氨基酚结构中具有酚羟基，可直接与三氯化铁试液反应显蓝紫色,(3)与重金属离子反应A.分子结构中具有芳酰胺的盐酸利多卡因，在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝紫色的配位化合物，此有色物转溶入氯仿中显黄色。,B.盐酸利多卡因，在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。,三硝基苯酚衍生物,盐酸利多卡因ChP（2005）鉴别取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录C），熔点为228232，熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP（2005）,（4）制备衍生物测熔点,(6)UV(7)IR,(1)乙醇溶液的澄清度与颜色生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。,中间体对氨基酚的有色氧化物在乙醇中显橙红色或棕色,4、杂质检查对乙酰氨基酚的杂质检查,（2）有关物质杂质来源中间体、副产物及分解产物检查方法TLC对氯乙酰苯胺杂质对照品法,TLC法供试品溶液,对照品溶液对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml）,分离系统硅胶GF254氯仿-丙酮-甲苯（1352）,限量:,点样量样品液：200l点于硅胶GF254薄层板上对照液：40l,判断在254nm波长紫外灯下观察，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较,不得超过其大小与颜色。,(3)对氨基酚制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水解都能引入对氨基酚检查原理：对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较判断对氨基酚的限量。,检查方法对照法,取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005）。,5含量测定：（1）非水溶液滴定法（2）分光光度法,第二节苯乙胺类药物的分析,苯乙胺类药物的基本结构,*,具有脂烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。多数在苯环上有12个羟基取代基。,常见的苯乙胺类药物,盐酸克仑特罗,硫酸沙丁胺醇,二性质：1.易被氧化邻苯二酚或苯酚结构，易被氧化呈色，在碱性溶液中更易变色，可与重金属离子络合呈色。,3.具有旋光性具有手性碳原子,具有光学活性，可利用此性质进行质量分析。,2.显碱性具有烃胺侧链，其氮为仲胺氮，显弱碱性，能与酸成盐。,4.溶解性游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水5.取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。6.UV7.IR,三鉴别试验1.氧化反应,中性或酸性,偏酸性,pH=6.5的条件下,这三种药物均被碘氧化产生红色,无法区别,2.三氯化铁反应：3.甲醛硫酸反应（Marquis)醌式结构呈色4.亚硝基铁氰化钠反应（Rimini)脂肪族伯氨的专属反应重酒石酸间羟胺,加水溶解后,加亚硝基铁氰化钠试液、丙酮数滴与碳酸氢钠少量,加热后,即显红紫色.,四、杂质检查（一）酮体的检查,杂质来源原料残存检查方法UV检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。,肾上腺素中肾上腺酮的检查,规定：A310nm0.05,方法,3.限量计算肾上腺酮的,五、含量测定（一）非水溶液滴定法原料药脂烃胺基侧链，显弱碱性,以冰醋酸为溶剂,加入醋酸汞试液以消除氢卤酸的干扰,结晶紫为指示剂,用高氯酸滴定液进行滴定.,（二）溴量法盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺,（三）HPLC法,重酒石酸去甲肾上腺素注射液离子对反相高效液相色谱法外标法定量调节溶液pH为3.00.1，加入离子对试剂庚烷磺酸钠,例1.能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为A.浓硫酸B.甲醛试液C.氨试液D.甲醛硫酸试液E.茚三酮试液,例2.盐酸异丙肾上腺素的检查项目是A.有关物质B.二苯酮C.盐酸D.醛E.酮体,盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有A.重氮化偶合反应B.氧化反应C.磺化反应D.碘化反应,采用亚硝酸钠法测定含量的药物有A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C.苯佐卡因D.醋氨苯砜E.盐酸去氧肾上腺素,下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因,亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法,盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（1030）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点,对乙酰氨基酚中对氨基酚检查的原理是什么？盐酸普鲁卡因注射液为什么会变黄？亚硝酸钠滴定法常采用的指示终点的方法有哪些？中国药典采用的是哪种？,对乙酰氨基酚中对氨基酚检查：取对乙酰氨基酚4.0g，加甲醇100ml溶解后，取此溶液25ml，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml，摇匀，放置30分钟，如显色与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50g，用同一方法制成的对照液比较，不得更深，计算对氨基酚的限量？,0.005%,对乙酰氨基酚的含量测定：取本品40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4