人教-选修一21微生物的实验室培养课件第一课时2.ppt

主题1微生物的实验室培养1课，主题23360微生物的培养和应用，至今已有数十个诺贝尔生理学和医学奖，化学奖是微生物学、微生物学、微生物学、微生物学、5种：病毒细菌放线菌原生动物、原核生物、原核生物、细菌系、病毒系、微生物的基础。一般只有在光学显微镜或电子显微镜下才能看到，有些甚至没有细胞结构，有些一般不含叶绿素。不能光合作用。细菌的形状和大小，细菌：单细胞不分枝的原核微生物。细菌细胞小而透明，通常用适当的染料染色，然后用显微镜观察。图1-1中常见的三种细菌的典型形态a .球菌b .细菌c .弧菌，细菌细胞从外向鞭毛，细菌(纤维)毛，囊，细胞壁，细胞膜，细胞质，细胞质中有液泡，储存的颗粒，细胞核，细菌的结构，图1-3细菌的结构，*细胞壁，结构特征：韧性和弹性细胞壁的功能是什么？固定细胞形状；保护细胞免受外力的损伤。大分子物质对人细胞的阻断；使细胞具有致病性和噬菌体的敏感性。伤寒细胞壁含有毒素、孢子，有些细菌在特定条件下形成称为孢子的椭圆形休眠体。孢子的壁对厚、干旱、低温、高温等恶劣环境具有很强的抵抗力。例如，某些细菌的孢子在煮沸3小时后才会死亡。孢子又小又轻，可以随风飘散。如果环境合适(如温度、水分合适)，孢子可以发芽形成一种细菌。殖民地：单个或少数细菌在固体培养基中大量繁殖，形成肉眼可见、具有特定形态结构的子细胞群体，这称为殖民地。殖民地是识别菌株的重要基础。菌落，细菌的菌落特性因物种而异，为放线菌，1，结构：单细胞原核生物分体菌丝(机内菌丝，寄生菌丝体)，链霉素，土霉素，氯霉素，红霉素，庆大霉素其中2/3是放线菌产的，应用了：病毒的结构，病毒，SARS病毒，禽流感病毒，朊病毒(蛋白质病毒)。2，病毒增殖：真菌，图画酵母电子显微镜形态结构，酵母和真菌，青霉菌，生殖，直立菌丝营养菌丝，腐败生活，孢子繁殖，细菌的营养类型，根据细菌使用的能量和碳源，分为两种主要营养类型。自养菌从属营养细菌(heterotroph)腐败细菌寄生虫的大部分病原体，5种微生物是病毒细菌放线菌原生动物，特性：结构非常简单，个体大部分很小。一般用光学显微镜或电子显微镜看，甚至没有细胞结构，体内没有叶绿素，不能进行光合作用。了解原核生物界、原生物界、菌界、病毒界、1、培养基的基本知识，掌握培养基的制造、装扮方法。2、掌握一般消毒灭菌方法，灭菌技术操作，一、教育目标，无菌技术操作。第二，主题焦点和困难：第一，基础：(a)培养基，培养基(培养液)是用微生物生长和繁殖的混合营养溶液人工制造的。任何培养基中一般都包含水、碳源、氮源、无机盐类等营养素，还应满足：生长因子(即细菌生长所必需且不能自行合成的维生素、特定氨基酸、嘌呤、嘧啶等)和氧、二氧化碳、渗透压等微生物生长的pH、特殊营养素，(a)。培养基：微生物生存的环境和营养，1。基本成分：想：微生物“吃”什么？水，无机盐，碳源，氮源，碳源，无机碳源：有机碳源：CO2，CO32-，HCO3-，牛肉奶油，蛋白胨等，自养微生物，异养微生物，异养微生物徽章：1。基本成分：水，无机盐，碳源，氮源，2。特殊营养：维生素，碱等，(包括牛肉奶油，酵母奶油，蛋白胨)，3.pH，氧气的要求：4。种类：固体培养基，液体培养基，无凝固剂琼脂，分离鉴定，工业生产，化学成分：物理特性：天然培养基合成培养基，选择，青霉素添加培养基：分离酵母，霉菌等真菌添加高浓度盐的培养基：分离葡萄球菌硫嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基3:提供构成细胞结构的元素和化合物的基本元素碳源：CO2，碳水化合物，脂肪酸等有机物，构成微生物的结构质和分泌物，以及能量。 氮源：N2、岩盐、硝酸盐、牛肉奶油、蛋白胨等，主要用于合成蛋白质、核酸和含氮代谢产物。1，从细胞的化学元素组成来看，为什么培养基中含有所有这些营养素？课堂调查，牛肉奶油蛋白胨培养基是应用最广泛的最常见的细菌基础培养基。分析营养成分吗？(b)无菌技术、无菌技术的概念、无菌工作通常是指在培养微生物的工作中防止杂细菌污染的所有方法。获得纯培养物的关键是防止细菌入侵，无菌技术是防止细菌污染的操作技术。消毒，1，灭菌技术的种类，灭菌，使用比较温和的物理和化学方法(酒精、紫外线)杀死一些对人体有害的微生物(孢子和孢子除外)。利用更强的理化因子杀死个体内外的所有微生物(包括孢子和孢子)。使所有细菌的生殖体、孢子、真菌、病毒等所有微生物通过化学物质或物理方法完全无菌的过程。实验工作空间、操作人员服装和手清洁消毒；灭菌培养基，接种机构及培养基等。接种过程应在主灯火焰附近进行。灭菌处理的材料机构避免与周围物品接触，1，沸腾消毒法3336100 到5-6分2，低温杀菌法：70-75 到30分钟或80 到15分9(牛奶)3，化学药品消毒法：到75%酒精，尼日尔氯消毒水源(酒精擦手4，紫外线消毒： (工作台，接种室) (能变质蛋白质，破坏DNA的结构)(1)消毒方法，3。一般消毒及灭菌方法，(1)，燃烧灭菌：在接种机构和接种期间，将试管口或瓶口放入主灯火焰的足够燃烧层，进行燃烧灭菌。试管或瓶口等容易污染的部位，3，通常采用消毒灭菌方式，(2)，干热灭菌：将玻璃器皿、金属器具等能够耐高温、保持干燥的物品放入干热灭菌罐内，在160 170 oc下加热1 2小时即可。(3)，高压蒸汽灭菌：在装有水的高压蒸汽灭菌锅里放入灭菌物品煮沸，冷却后，在密闭的情况下将锅内的压力加热到100kPa，温度保持在121 oc 15 30分钟即可。1，燃烧灭菌2，干燥热灭菌：在160-170 下加热1-2h。3，蒸压：100kPa，121 时15-30分钟。(2)灭菌方法：1。灭菌技术除了用于防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？2 .请判断以下材料或器械是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择相应的方法。(1)培养用培养基和培养皿(2)玻璃棒、试管、烧瓶、吸管(3)实验者的双手和灭菌技术，能有效防止实验者自己感染微生物。(1)，(2)需要杀菌。需要消毒。P15-16侧栏事故，4 .无菌技术除了用来防止实验室培养被其他外部微生物污染外，还有什么目的？灭菌技术还可以有效地防止操作员自身感染微生物。课堂探索，扩展，单个或少数细菌，2。特征：大小、外观、光泽、颜色、透明度等。3 .功能：1 .定义：3 .菌落，菌种的重要标准，固体培养基培养基，大量繁殖，子细胞组，微生物实验室培养的基本操作程序，1，器械灭菌2，培养基的准备3，培养基的杀菌4，倒置平板5，微生物接种6，温度调节器培养7，菌种的保存，3，实验工作牛肉奶油蛋白胨培养基(用于细菌培养)、培养基的制备原则、目的：根据培养微生物种类、培养目的等，确定培养基的种类和配方数量。营养要调配：培养基中各种营养素的浓度和比例要适当。pH应适当：细菌培养基为pH中性或碱性，真菌培养基为酸性。(a)牛肉软膏蛋白胨固体培养基的制备，1 .计算： (根据微生物生长时营养成分的要求)，2。测量正确的重量，注意事项：牛肉奶油放在计量纸上测量重量，牛肉奶油，蛋白胨都容易吸收水分。要动作快，及时盖上瓶盖。第三，实验操作，思考：这个徽章在物理性质上是什么样的？为什么？含有几种营养素？牛肉奶油提供什么成分？3 .融化：首先将牛肉奶油和计量纸一起放入烧杯，加入少量水，融化牛肉软膏，将其与计量纸分离，然后用玻璃棒清除计量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌，然后加入琼脂，继续用玻璃棒搅拌。原因是为了防止琼脂膏的底部打破烧杯。溶解后将自来水溶解为100毫升。(溶解后灭菌前必须调节ph)，4 .灭菌：将制造的培养基放在锥形瓶(瓶口、棉塞、牛皮纸包)中，与培养皿(3-5套，用报纸包好几层)一起放在高压蒸汽灭菌锅里杀菌。5 .背板：当培养基冷却到约50OC时，倒入板。融化的时候，牛肉奶油和计量纸一起加热的原因是什么？添加琼脂的目的是什么？附着在计量纸上的牛肉奶油也溶于水，减少错误，认为是絮凝剂，4，灭菌前用牛皮纸，旧报纸包徽章的锥形瓶的目的是什么？培养皿可以用高压蒸汽灭菌吗？杀菌时可以避免水蒸气凝结时弄湿棉塞。除去培养培养基锥虫病也能起到防止空气中杂菌污染的作用。培养皿保持干燥，所以干燥，干燥，干燥，热灭菌，背板技术，背板工作的讨论，1 .灭菌培养基后冷却到50OC时，要浇背板。用什么方法估算徽章的温度？用手摸锥子瓶，温度下降，手不浮的时候就可以开始倒水。2 .为什么要让锥形瓶的瓶盖通过火焰？通过燃烧灭菌防止瓶口的微生物污染培养基。3 .平板凝结后，为什么板颠倒？如果平板凝结，则碟子盖上的水滴凝结，凝固的培养基表面湿度高，如果将平板反向翻转，培养基表面的水分会更好地挥发，碟子盖上的水滴可能会落到培养基上，受到污染。4 .在倒盘子的过程中，如果不小心在盘子盖和盘子底之间炸了徽章，还可以用这个盘子培养微生物吗？怎么了？空气中的微生物可以在盘子盖上和盘子底部之间的培养基中繁殖，所以最好不要用这个盘子培养微生物。1 .计算，计量2。融化3。ph: ph 7.64。过滤：这个步骤可以保存。5.化妆中：在化妆过程中，注意不要把徽章埋在脚或瓶口，可能会被棉签污染。三角烧瓶的数量最好不要超过三角烧瓶容量的一半。6.插头7 .绷带，操作步骤，8。灭菌：将50毫升培养基用球棒移动到三角锥瓶，插入棉花塞，包裹牛皮纸，放入高压蒸汽灭菌锅，压力为100kPa，温度为121，杀菌15 30分钟。用旧报纸包裹培养皿，放入干燥、热的灭菌箱，在160 170下杀菌2h。9.颠倒的平板：在培养基冷却到约50 时，在酒灯附近倒入板。观察2，2，2，2面后，只有没有细菌污染，才能接种。10。无菌检查：将灭菌培养基放在37 的温室里培养24-48小时。确认灭菌是否彻底。练习：右表是微生物培养基成分，(1)右表培养基中可培