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文档简介
实验三细菌的分离培养和移植,刘书超预防兽医教室,细菌的分离纯化技术,分离纯化:分离微生物共生组,得到纯培养物的过程称为微生物的纯分离技术。 得到的纯培养物被称为纯种。 纯种:一种或一株微生物培养物中的所有细胞来源于同一细胞的后代。 分离纯化技术是细菌学实验中最基本的技术之一,临床检测样品和混合样品分离被杂菌污染的菌种细菌的纯培养物,试验内容:1 .好氧菌的分离移植和增菌平板线分离营养(普通)斜面接种营养(普通)肉汁增菌2 .厌氧菌的分离培养方法(这次试验筷子生物学方法、化学方法、物理方法、实验要求:掌握:掌握细菌分离培养的基本要领和方法掌握无菌操作程序,掌握细菌在培养基上的生长特征:菌落形态、无菌操作工具、接种工具、分离纯化法:(细菌分离纯化),1、平板划线法2、稀释涂布平板法3、稀释混合(注入)平板法4、妈妈将装有混合细菌的接种环在平板表面多方向连续划线,使混合微生物细胞分散在平板表面,使浓度变薄,培养得到单一细胞繁殖的菌落,从而进行精制。 1 .平板划线:平板划线的原则和目的:图1平板划线法a、b、c分别是1、2、3次划线,a、b、c、手势1 .培养皿和酒精灯的距离2 .用左手打开培养皿的动作3 .用右手握接种棒的姿势4 .右手面罩每个地区的划线接触前一地区的接种线的23次,必须逐渐减少菌量,形成单一的菌落。 连续划线(曲线划线):分离细菌含量少的培养物,右手拿接种环,用火焰灭菌,冷却后,选择一点标本和培养物,1 .平板划线:1,4,3,2,细菌在固体培养基上的生长状况:单菌落(s型),菌苔,菌落(可以作为细菌的鉴别特征之一。 细菌在固体培养基中生长: 1,大小(毫米表示)。 1mm以内的露滴状; 1-2毫米的小蚁群。 2-4mm中等大小的蚁群4-6mm以上,被称为大蚁群或巨大蚁群) 2、形状(圆形、不规则形) 3、边缘(整齐、锯齿状) 4、表面性状(光滑、粗糙) 5、隆起度(扁平、隆起、中凸) 6、颜色和透明度(黄色手持、塑料棒,试管底部露出斜面,试验管口距火焰1cm,小指夹棉,培养后生长的斜面菌种,液体培养基接种法:用于增菌和纯培养细菌的生长特征观察,如表面生长、沉淀生长、均匀混浊生长等。 细菌在液体培养基上生长的三种不同现象是混浊的:细菌均匀扩散,在一定程度上混浊。 沉淀:细菌沉降。 肉眼可见沉淀物(颗粒棉状)菌膜:好氧菌容易在液面生长,形成可见菌膜、菌环。 操作步骤:接种环灭菌,取出细菌接种棉栓,接种环灭菌标记进行培养。 在划线分离时,为什么接种环上多馀的菌体会被焚烧?为什么划线时不能重叠? 2 .在恒温槽中培养微生物的时候,为什么必须把培养皿倒过来呢? 3、如何进行蚁群形状的检查? 检查时应该观察菌落的哪个性状?4、分离培养的目的是什么?一
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