实验5 除草剂与杀菌剂毒力测定.ppt

杀菌剂和除草剂的毒性测定，吴顺凡农药科学部农药毒理学和害虫抗性监测组，电子邮件：WUF ；办公室：科学楼B828，2014年5月16日，实验5。陈念春的“农药生物测定技术”，这是一种利用有害生物(目标生物如昆虫、螨虫、细菌、线虫、杂草等)的反应来评价化合物生物活性的基本方法。)到活性物质，现已发展成为一门综合了昆虫学、植物病理学、微生物学、植物学、杂草科学、化学、生物技术、统计学等学科的综合性技术，是农药科技创新工程中不可或缺的关键技术。农药生物测定技术的内涵，生物测定已成为研究作用物质、目标生物与反应强度的关系、杀菌剂的毒性测定、杀菌剂的生物测定过程和药剂的毒性测定的特殊技术；定性和定量分析；控制效果的确定；杀菌剂室内生物测定的主要方法，孢子萌发测定法：观察被测细菌的孢子是否萌发，以确定杀菌剂的毒性；生长率法：将不同浓度的药液与溶解的培养基混合，制成有毒培养基平面，在平面上接种致病菌，根据生长率判断药物的毒性。将不同浓度的药液与热培养基混合，在这种含药培养基中培养病原菌。这种药物的毒性由病原菌的生长速度决定。生长率法原理、生长率法示意图、注意事项：培养基(1:9)前应加入药液；对于一些容易受热分解的化学物质，应该在培养基冷却到50度左右时加入。优点：操作相对简单；(2)适用范围广，适用于乳油、水剂、可湿性粉剂等。(3)重复性好，只要操作认真，就能获得可靠的结果。生长率法的优缺点如下：(1)对供试菌株要求严格，细菌易于培养，生长快，边缘整齐，产孢慢，是农业生产中的重要病原菌；(2)对测试试剂的要求是耐热的，并且在受热时难以分解。测定了多菌灵对禾谷镰刀菌的毒力。供试菌株为：禾谷镰刀菌敏感菌株2021和抗性菌株JT04。目的：掌握生长速率法测定杀菌剂的毒性。检测试剂：98%多菌灵，江苏龙腾化工有限公司提供，多菌灵与0.1%盐酸分别混合于10000g/mL和100g/mL母液中。剂量设定：1。确定敏感菌株2021，取一定量的100g/mL多菌灵母液，加入50毫升，每次处理3次。2.多菌灵抗性菌株JT04的测定：杀菌剂的浓度为：0(对照)、1.25、2.5、5、10、20、40g/mL。将400 L的10000g/mL母液加入到100毫升的溶液中，得到40g/mL，然后进行梯度稀释，每次处理重复3次。(1)含药培养基的制备：将一定量的药液准确加入到热培养基中，混合均匀，倒入无菌培养皿中，浓缩，得到含药培养基；(2)菌饼的制备：使用无菌打孔机将菌饼放置在受试菌的边缘(在无菌条件下)；(3)菌饼移植：将菌饼(菌丝侧朝上)用接种针移植到含药培养基平板的中心，一个培养皿与另一个菌饼连接；(4)菌落直径的测定：25培养3天，取出培养皿测量菌落直径。每个菌落的直径交叉测试两次，取平均值。运算步骤，数据处理，将抑制率转换成概率值Y；该药物的剂量值被转换成用作x的对数值，并且被线性回归以获得毒性回归方程y=abx，并且计算EC50。注：饼的直径为5毫米，抑制率的概率为80 . 15 . 845255 . 95 . 148453 . 75 . 092938 . 74 . 712930 . 14 . 478519 . 44 . 1367，剂量的对数为2.62.32501.7251.412.51.1，实验报告要求多菌灵对小麦赤霉病有抑制作用除草剂的毒性测定，几个概念，抑制介质浓度：指当抑制为测定指标的50%时除草剂的浓度，需要用毒性回归方程的方法计算；最高非影响测量：不影响作物生长发育的最高剂量是除草剂是否影响作物的剂量分界线。相对毒性指数：除草剂甲的相对毒性指数=标准