药理学实验基本知识

发表了胡建平先生药理学实验的基本知识，第一章药理学实验须知第二章药理学实验常用器械和技术第三章实验数据的简单统计学，本课内容的安排，第一章药理学实验体会，药理学实验的重要药理学实验是药理学教育的重要部分。 它被用于验证药理学理论的一部分。 二药理学实验课程的目的是选择几种经典实用的实验，使学生熟悉药理学实验的基本操作方法和技能。 了解新药评价和临床前药效学和毒理学的基本技能。 培养学生独立思考、操作、分析和解决问题的能力。第一章药理学实验体会，三药理学实验课前、课中、课后要求(一)在实验前仔细阅读实验指导，了解实验的目的、要求、步骤和操作步骤。 结合实验内容复习关系理论，使之充分理解。 预测在实验中应该得到的结果。 写预习实验报告(如果自己随意写，有助于自己的实验)，实验时实验器具整齐地放着，清洁有序。 按照实验程序，不得以认真的态度依次操作，进行与实验无关的活动。 保护实验动物(不影响实验结果)，爱护实验器材，节约药品。 仔细观察实验过程中出现的现象，随时记录实验数据，结合理论来思考，为什么呢？ (请参见。) (3)实验后整理并准备实验器具。 如果有破损不足的话，必须向教师报告。 整理实验数据，认真写实验报告，按时提交审查。四实验报告的制作、药理学实验报告的名称：班：小组：日期：实验主题：实验目的：实验对象：实验步骤：实验结果：分析和讨论：结论：对实验结果的说明文追求简洁，用图表表示比较好。 填写实验结果时，要坚持真实性和科学性。 分析讨论可以结合理论部分进行分析，分析讨论实验中得到的有规律的东西，提出见解，避免抄写。 结论部分是这次实验得到的最基本的规律性内容。 文字必须简洁简洁，不能想象加入本实验未证实的内容。 五实验室规则1遵守学习规律，准时下课。 实验期间不得擅自外出或早退，特殊情况下需要休假。 2必须认真进行实验操作，观察实验结果。 实验期间要保持安静，不要做与实验无关的活动。 3实验数据和实验记录，必须经过教师的审查。 不然的话，实验就不能结束了。 4各组机器用品请本组使用，不要和其他组交换混乱。 机器损坏或丢失时，必须委托教师处理。 5要注意珍惜公共财产，节约各种实验用品。 实验动物按小组分发，需要补充使用的，必须经教师同意后再补充。 6保持实验室清洁，随时清除污垢。 实验结束后，把实验器材、工具打扫干净，数一下数量，回到原来的地方。 经过老师的检查才能离开实验室。一分光光度计二离心作用三动物的捕获四动物的给药方法五动物的采血方法六动物的死刑方法，第二章介绍了药理学实验常用的器械和技术，一分光光度计，一器械在分光光度计上有几个部件。 其中包括光源、提供所选波长的单色器、可变狭缝、样品架子、光电检测器和仪表。 每个光谱区域必须使用不同的光源。 在可见光区域(400nm700nm )和紫外区域(200nm400nm )分别使用了钨丝灯和重氢灯。 这些区域中的光的波长由分光光度计中的单色器选择，单色器由棱镜和衍射光栅构成，在可见光区域和紫外区域中提供窄带波长的光，光从可以控制光强度的可变狭缝进入样品，检测通过光电管透射的光，用电流计测定。 下图为分光光度计零件图：2紫外和可见光谱的应用紫外和可见光谱最主要的应用是测定溶液中物质的浓度。其基本原理是光吸收值与光吸收物质的浓度成比例。双离心作用离心作用在装有固体粒子悬浊液的容器迅速旋转的过程中，显着增加的重力场使粒子沉降，离心力和引力乘以距旋转中心的径向距离r(cm )成比例，角速度用每分钟的转速(rpm )表示，离心力由下式表示： f=(1. 根据(2)(r )上式，对于径向距离为7cm的转子，如果角速度为10000rpm，则离心力为8000g。 成功的离心作用取决于两个因素(1)离心时间和(2)发挥的g值。 表1是在离心场沉淀生物粒子所需的重力和时间的比较，因此，可以采用不同的g力、不同的离心t的差速离心法分离细胞成分。三动物的抬起(限制老鼠和兔子)，一老鼠的抬起(两种方法)双手的抬起法用右手抬起鼠尾，放在鼠笼(或其他粗糙的面)上，将鼠尾向后轻轻拉，鼠标就固定在鼠笼上，左手的拇指和食指将鼠的单手手持法只是左手，首先用食指和大拇指抓住老鼠的尾巴，然后用手的平尺侧和小指夹住尾巴根部，左手大拇指和食指抓住脖子皮肤的兔子的把手抓住兔子脖子背后的皮肤，轻轻抬起兔子，另一只手支撑臀部，蹲下了兔子不要用手拿着耳朵抬起兔子。1胃的方法2皮下注射方法3肌内注射方法5静脉注射方法、4动物的给药方法(限制小鼠和兔子)、动物的给药方法-胃的给药方法、小鼠的胃的放入方法左手拿着小鼠，腹部朝向操作者，右手放入胃，经由口角插入口腔，使放胃的管和食道成为一条直线沿着上口盖壁慢慢地插入到食道的2cm3cm处，放胃管的前端到达横膈膜部时，操作者有抵抗感，动物安静的操作是软的，请不要伤害食道。 如果有抵抗的话，应该拔掉胃管重新插入，如果把药液误注入气管，动物就会死亡。 放兔胃的方法是放兔胃需要两个人的协助，一个人坐着，把兔子的身体夹在两腿之间，用左手抓住两只耳朵，固定其头部，用左手抓住两只前脚，把兔子的头稍微向后倒，另一个人把开口器放在兔子的嘴里，慢慢地打开开口器。 将8号导管通过开口器的中央孔沿着口盖壁缓慢插入食道15cm18cm。 为了不误入气管，把输尿管的外口端放入清水中，注入药液以防止气泡流出，用少量的清水冲洗管内残留的药液。 灌溉结束后，慢慢拔掉导管，取出开口器。 小鼠皮下注射方法一般需要两人的合作，一人用左手抓住小鼠头部的皮肤，右手抓住小鼠的尾巴固定小鼠另一人用左手抬起背部的皮肤，右手拿注射器将针扎入皮下，稍微摆动针，表示针尖在皮下，此时药物拔针时，用右手捏住针的部分，防止药液脱落。 一个人操作，把鼠放在粗糙的平面上，用左手拖着鼠尾，鼠向前爬时，也可以用右手拿着注射器把针扎进鼠背部的皮下，注射药液。 家兔皮下注射方法通常选择背颈部皮下注射。 操作者用左手大拇指、食指和中指抬起背部脖子的皮肤，折叠成三角体，拿右手注射器从皱纹下方刺入皮下，放松皮肤注入药液。 动物给药方式二-皮下注射方法、小鼠肌肉内注射方法需要两人合作，一人用左手抓住小鼠头部皮肤，右手抓住小鼠尾巴固定小鼠另一人用左手固定注射侧后肢，右手拿注射器，针扎入外侧大腿部肌内。 小鼠肌肉少，不怎么使用肌肉内注射。 兔肌内注射法的注射部位是臀部和大腿肌。动物给药方式三-肌内注射方法，小鼠腹腔注射方法为用左手捕捉小鼠，腹部朝上，头部向下倾斜，右手拿注射器在下腹左侧或右侧(避开膀胱)穿刺头部，针和皮肤呈30，刺入腹腔注入(有脱离感)药液。 小心不要扎得太深，不要扎到肝脏。 兔腹腔注射方法与小鼠几乎相同。 动物给药方式的四-腹腔注射方法、小鼠静脉注射(多尾静脉注射)，为了使小鼠的尾巴露出到外面，固定在铁条笼或特制筒上。 用75%乙醇溶液擦拭尾巴，或用45左右的温水浸泡30s，使尾静脉充血。 注射时，用左手大拇指和食指抓住小鼠的尾巴，右手拿注射器，选择尾巴两侧静脉，使针和小鼠的尾巴35 (大致平行)进行静脉穿刺。 注射药液无抵抗，局部皮肤变白表示针没有扎入血管，要注意拔针重新穿刺，静脉穿刺从远端(近尾尖)开始，不仅容易穿刺，近端也能多次穿刺。 注射结束后，用棉球压住穿刺口止血。 家兔静脉注射(耳缘静脉多)注射部位拔毛，用酒精棉球涂抹。 用左手大拇指和中指捏住兔子耳尖，用食指放在耳下，用右手拿着注射器，从静脉远端把针扎入血管，压入药液。 注射时有抵抗，局部肿胀时，显示针不在血管内，应立即拔针重新穿刺。 注射必须用棉球压迫针眼止血几分钟。 动物给药方式为五-静脉注射方法，切小鼠尾巴采血，将小鼠固定在铁条笼或特殊筒上，使小鼠尾巴露出外面。 把老鼠的尾巴切下1mm2mm，用大拇指和食指从尾巴尖按压，血液从尾巴尖流出，老鼠每次都可以采血0.1ml。 注意：只切尾巴尖，切很多组织，相反出血少。 下次采血时，只需切下尾部的血痂就行了。 用兔子的心脏采血固定兔子的被部，切除相当于左侧胸部心脏部的被毛，用碘酒和酒精消毒皮肤，选择心脏跳动最显着的地方。 一般从胸骨左缘外3mm刺入兔子的第三肋间隙。 穿刺时，最好用左手触诊心脏进行合作。 当针靠近心脏时，感觉到心脏的跳动。 这可以把针穿在内侧，进入心室。 由于心脏搏动，血液自然地进入注射器。 即使认为针已经进入心脏，如果血液不能排出的话，也要拉一点针或放一点针。 一般来说，心脏采血可以在67天后重复进行。 采血量约为20ml30ml。 五动物的采血方法(限定小鼠和兔子)，兔耳缘静脉采血拔去耳缘毛，用灯泡加热耳朵或用75%酒精擦拭局部，扩张静脉，用石蜡油擦拭耳缘，防止血液凝固。 耳朵受热后，用小血管夹住耳朵根部，用粗针的逆静脉回流方向刺入静脉，或者用刀片切开静脉，血液就会自动流出，一般可以采血2ml3ml。 采血的棉球压迫止血了。 将兔耳中央动脉采血兔放入兔固定箱，用酒精棉球摩擦兔耳，使其充血。 兔子耳朵中央纵行，粗，红的中央动脉。 左手固定兔子耳朵，右手拿着注射器(一般不能用6号注射器细)，在中央动脉的末端平行地向心方向扎动脉，缓慢地回到注射器中，动脉血马上进入注射器，一次取血15ml。 由于耳中央动脉容易发生痉挛收缩(容易不能采血)，所以要使兔耳充分充血，痉挛前迅速完成采血，采血后棉球要压迫止血。 五动物采血方法(限制小鼠和兔子)，六动物死刑方法(限制小鼠和兔子)，小鼠死刑(经常采用颈椎脱位法)用左手拇指和食指用力按压其头部，用右手抓住小鼠的尾巴，用力向后方上方拉，就导致颈椎脱位，小鼠家兔的处决(通常采用空气栓塞法)，用50ml100ml的注射器，向家兔的边缘静脉内注射20ml40ml的空气量，使其栓塞而死亡。、平均二标准偏差(SD )三标准误差和t检定，第三章实验数据的简单统计学，实验数据的统计意义，药理学实验得到的数据一般需要经过统计学处理，分析样品，估计整体，通过偶然找到规则。 统计处理数据系统知识丰富，这里只需要处理药理学实验结果，就实验结果的平均数、标准偏差、标准错误及计量数据的显着性测定作一简单介绍，让学生能正确判断实验结果。平均()、平均为算术平均，在统计学上。 平均数是分析测量数据的最基本的指标。 这表示变量值集的集中倾向(平均水平)，不仅给人以简洁概括的印象，还能用于事物间的比较。 平均计算公式如下。 其中，是合计。x1、x2、xn等是各次的测量值(变量)，n是变量的个数，即作为样本容量的各变量的合计。二标准偏差(SD )、平均数是集中倾向的指标，不能反映一组数据和平均数的偏差程度。 特别是数据不符合正态分布时，更是如此。 标准偏差最常用，是最完全反映变量值偏差程度的统计指标，一般用SD表示。 计算SD的公式，公式中的x是每个变量值.平均n是变量的个数.例1基于某年级12名女学生的收缩期血压的数据(参照下表)，求出平均数和标准偏差吗？ 表112名女学生的收缩数据、表112名女学生的收缩数据、表112名女学生的收缩数据、解：将关系数据代入式(1)求出平均数，在式(2)中求出标准偏差而得到：从上述例子中，标准偏差也反映了从各变量的平均数开始的分布。 平均数与单位相同的情况下，标准偏差越大，各变量远离平均数，各变量的偏差的程度也越高，相反，标准偏差越小，标准偏差越接近平均数，偏差越低、偏差越小，精度越高。三标准错误(SE )和t检验、标准错误和标准偏差不同，表示多次测定的平均数和整体平均数的偏差，即整体各样品的平均数的标准偏差。 计算公式如下。 其中SE是标准误差，SD是标准偏差，n是样本数。 值得注意的是，SE的目的主要用于两个平均值差异的显着性检查。t检定的定义：在抽样研究中，经常在两个样品的平均数上有差异。 关于两个平均数的差异，不能只看表面的数值的差异，急于推论其本质的差异。 必须考虑引起这种差异的可能性： (1)差异只是对误差进行采样，它们之间没有本质误差(2)差超出了采样误差引起的范围，两者之间有本质差异。 除了t值，在获得组间差异的概率之前，需要知道自由度，上述例子的自由度是根据t值和自由度f值从t-分布表中发现组间差异的概率p (两者之差较大，接受采样