药物分析习题解答-第六章 小结

第六章胺类药物分析第五章胺类药物分析学习目标知识目标了解对氨基苯甲酸酯类药物，酰胺类药物，苯乙胺类药物的结构特征理解盐酸普鲁卡因、对乙酰氨基酚、肾上腺素的构性关系与质量分析方法的联系掌握盐酸普鲁卡因、对乙酰氨基酚、肾上腺素的鉴别试验、杂质检查方法和含量测定方法能力目标根据胺类药物的化学结构，能够选择相应的鉴别、杂质检查及含量测定方法依据药典，能够正确分析胺类药物质量知识目标了解对氨基苯甲酸酯类药物，酰胺类药物，苯乙胺类药物的结构特征理解盐酸普鲁卡因、对乙酰氨基酚、肾上腺素的构性关系与质量分析方法的联系掌握盐酸普鲁卡因、对乙酰氨基酚、肾上腺素的鉴别试验、杂质检查方法和含量测定方法能力目标根据胺类药物的化学结构，能够选择相应的鉴别、杂质检查及含量测定方法依据药典，能够正确分析胺类药物质量胺类药物涉及面广，国内外药典收载品种较多。依据化学结构，胺类药物包括芳胺类、芳烃胺类、脂肪胺类、磺酰胺等。本章重点讨论其中的对氨基苯甲酸酯类药物、酰胺类药物以及芳烃胺类药物中的苯乙胺类药物。这三类药物的化学结构中均具有苯环和氨基，有些药物还含酚羟基、芳伯氨基等官能团，这些官能团是选择药物质量控制方法的重要依据。胺类药物涉及面广，国内外药典收载品种较多。本章重点讨论对氨基苯甲酸酯类药物、酰胺类药物以及芳烃胺类药物中的苯乙胺类药物。第一节对氨基苯甲酸酯类药物的分析对氨基苯甲酸酯类药物具有对氨基苯甲酸酯母核，基本结构如下CR1HNOOR2一、对氨基苯甲酸酯类药物结构与性质、分析方法的关系（重点，掌握）1弱碱性多具有脂烃胺侧链且为叔胺氮原子，显弱碱性，能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可用非水碱量法测定含量。2芳伯氨基特性多具有芳伯氨基，可发生重氮化偶合反应，可与芳醛缩合反应。3水解特性具有酯键或酰胺键，易水解，影响药品质量。4紫外吸收特性二、鉴别试验（重点）（一）重氮化偶合反应/芳香第一胺反应（掌握）分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，可在酸性条件下与亚硝酸钠试液作用，发生重氮化反应，生成的重氮盐再与碱性萘酚偶合生成橙红色偶氮化合物，此即为芳香第一胺反应，属于“一般鉴别试验”。中国药典（2010年版）收载盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因注射液、注射用盐酸普鲁卡因、苯佐卡因均可采用此法鉴别。盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因注射液、注射用盐酸普鲁卡因、苯佐卡因均可采用此法鉴别。盐酸丁卡因不具有芳伯氨基，无重氮化偶合反应，但其结构中的芳香仲胺在酸性溶液中也可与亚硝酸钠发生反应，生成乳白色的N亚硝基化合物沉淀，可与含有芳伯氨基的同类药物区别。（二）水解产物的反应（掌握）具有酯结构的本类药物，可在碱性条件下水解，利用其水解产物进行鉴别。盐酸普鲁卡因即采用此法鉴别。盐酸普鲁卡因在碱性溶液中可水解生成普鲁卡因白色沉淀，沉淀加热变为油状物；继续加热，普鲁卡因的酯键水解，产生的二乙氨基乙醇碱性气体能使湿润的红色石蕊试纸变蓝；加热至油状物消失后，生成可溶于水的对氨基苯甲酸钠，溶液放冷，加盐酸酸化，即析出对氨基苯甲酸白色沉淀，此沉淀能溶于过量的盐酸。（三）氯化物反应（熟悉）盐酸普鲁卡因与盐酸丁卡因的水溶液显氯化物的鉴别反应，氯化物鉴别反应作为一般鉴别试验收载于药典附录。（四）碘仿反应（熟悉）苯佐卡因在氢氧化钠试液中加热，水解后生成的乙醇与碘发生碘仿反应，发生碘仿臭气，同时有黄色沉淀析出。（五）硫氰酸盐反应（了解）盐酸丁卡因溶于醋酸钠溶液后与硫氰酸铵反应，产生熔点为131的白色结晶。（六）红外吸收光谱法（了解）三、杂质检查（次重点）（一）盐酸普鲁卡因的酸度检查（了解）检查原因控制生成过程中可能引入的酸性杂质及贮存过程中可能水解产生的游离酸。检查方法加甲基红指示液1滴，如显红色，加002MOL/L氢氧化钠滴定液020ML，应变为橙色。（二）盐酸普鲁卡因注射液的PH值检查（了解）检查原因盐酸普鲁卡因水溶液在PH3545条件下较稳定。（三）盐酸普鲁卡因注射液中的对氨基苯甲酸检查（掌握）检查原因控制制备过程中由于发生水解反应生成的对氨基苯甲酸，其最终产物会使注射液变黄，导致药物疗效下降，甚至会增加毒性。检查方法高效液相色谱法薄层色谱法，限度不得超过12。四、含量测定（重点）（一）亚硝酸钠滴定法（掌握）1原理芳伯氨基药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮化合物。某些药物含潜在芳伯氨基，须先经水解或还原得到芳伯氨基，再进行测定。2反应条件（1）温度。室温（1030）滴定。（2）酸度。加入盐酸的量一般为芳胺类药物与酸的摩尔比约等于12560。（3）滴定速度与方式。先将滴定管尖端插入液面下约2/3处，一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入，在近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端后，缓缓滴定至终点。近终点时，注意充分搅匀再观察。（4）溴化钾。加入适量溴化钾（2G）以加快重氮化反应速度。（5）芳伯氨基的碱性。芳伯氨基的碱性较弱，重氮化反应速度就快；反之亦然。3指示终点的方法（1）永停滴定法。中国药典规定用永停法指示亚硝酸钠滴定法的终点。（2）电位滴定法。美国药典采用此法。（3）外指示剂法。常用碘化钾淀粉糊剂、指示液或试纸，终点时显蓝色。（二）非水滴定法（熟悉）盐酸丁卡因的含量测定采用非水滴定法。将供试品溶解在冰醋酸中，以结晶紫为指示剂，以高氯酸液滴定至蓝色为终点。第二节酰胺类药物的分析酰胺类药物均系苯胺的酰基衍生物，基本结构如下R1HNR3R4CR2O一、酰胺类药物结构与性质、分析方法的关系（重点，掌握）1弱碱性利多卡因和布比卡因具有脂烃胺侧链且为叔胺氮原子，显弱碱性，可与生物碱沉淀剂发生反应，其中与三硝基苯酚试液反应生成的沉淀具有固定熔点。2水解特性本类药物共有的芳酰氨基易水解，在酸性溶液中水解后具有芳伯氨基，可发生重氮化偶合反应。对乙酰氨基酚和醋氨苯砜的水解产物为醋酸，可在硫酸介质中与乙醇反应，发出醋酸乙酯的香味。3酚羟基特性对乙酰氨基酚具有酚羟基，可与FECL3发生呈色反应。4与重金属离子发生沉淀反应盐酸利多卡因和盐酸布比卡因酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子、钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。5紫外吸收特性二、鉴别试验（重点）（一）重氮化偶合反应/芳香第一胺反应（掌握）对乙酰氨基酚和醋氨苯砜具有潜在芳伯胺基，在酸性条件（盐酸或硫酸）下加热水解，再加亚硝酸钠试液，可发生重氮化偶合反应。（二）三氯化铁反应（掌握）对乙酰氨基酚具有酚羟基，可与FECL3试液发生三氯化铁反应，显蓝紫色。（三）重金属离子反应1与铜离子反应（掌握）盐酸利多卡因在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，溶于氯仿显黄色。2与钴离子反应（熟悉）盐酸利多卡因在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色钴盐沉淀。3与汞离子反应（熟悉）盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸汞试液煮沸，显黄色。（四）测定衍生物熔点（熟悉）盐酸利多卡因、盐酸布比卡因皆可与三硝基苯酚反应，生成有固定熔点的衍生物。（五）氯化物反应（了解）盐酸利多卡因的水溶液显氯化物的鉴别反应，（六）紫外吸收光谱（了解）（七）红外吸收光谱法（了解）三、杂质检查对乙酰氨基酚（次重点）（一）酸度检查（了解）检查原因控制生成过程中可能引入的酸性杂质及贮存过程中可能水解产生的醋酸。检查方法依PH值测定法测定，PH值应为5565。（二）乙醇溶液的澄清度与颜色（熟悉）检查原因检查乙醇溶液的澄清度以控制生产工艺中使用的还原剂铁粉。检查乙醇溶液的颜色以控制中间体对氨基酚的有色氧化产物。检查方法加乙醇溶解后，溶液应澄清，无色。（三）对氨基酚及有关物质有关物质（掌握了解）检查原因对乙酰氨基酚在合成过程中，由于乙酰化不完全或贮存不当发生水解，会引入对氨基酚，从而使本品产生色泽并对人体具有毒性，应严格控制其限量控制各生产工艺路线引入的各种不同杂质。检查方法高效液相色谱法薄层色谱法。（四）对氯苯乙酰胺对氨基酚（熟悉掌握）检查原因对乙酰氨基酚的生产工艺路线较多，不同生产工艺路线会引入不同的杂质，这些杂质多为反应中间体、副产物及分解产物，主要包括对氨基酚、对氯苯乙酰胺、O乙酰基对乙酰氨基酚等控制对乙酰氨基酚在合成过程中，由于乙酰化不完全或贮存不当发生水解引入的对氨基酚，对氨基酚会使本品产生色泽并对人体具有毒性。检查原理方法中国药典以对氯乙酰苯胺为对照品，采用高效液相色谱法进行限度检查，限量不得超过0005。对氨基酚在碱性条件下能与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物，而对乙酰氨基酚无此反应。检查方法比色法，限量不得超过0005。四、含量测定（一）非水滴定法（熟悉）盐酸利多卡因结构中含有脂烃氨基，盐酸布比卡因侧链哌啶环上的叔胺氮，均具有弱碱性，可以采用非水溶液滴定法测定含量。（二）紫外分光光度法（了解）对乙酰氨基酚在稀碱性溶液中，在257NM波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征可用于原料药及部分制剂的含量测定。第三节苯乙胺类药物的分析苯乙胺类药物为拟肾上腺素类药物，具有苯乙胺的基本结构R1CHOHCHNHR2R3一、苯乙胺类药物结构与性质、分析方法的关系（重点，掌握）1弱碱性分子结构中具有脂烃氨基侧链，其氮为仲胺氮，显弱碱性。2酚羟基特性分子结构中多具有邻苯二酚或苯酚结构，可以发生FECL3反应，可与重金属离子络合呈色，易氧化变色。3芳伯氨基特性盐酸克仑特罗具有芳伯氨基，可发生芳伯氨基特征性反应。4光学活性分子结构中多数具有手性碳原子（多为2个），具有旋光性。5紫外吸收特性二、鉴别试验（一）三氯化铁反应（熟悉）肾上腺素等本类药物的分子结构中具有酚羟基，可与FE3离子络合显色，若又加入碱性试液，则可进一步被高铁离子氧化而显紫色或紫红色。肾上腺素，盐酸去氧肾上腺素，重酒石酸去甲肾上腺素，盐酸多巴胺，硫酸沙丁胺醇均可采用此法鉴别。（二）氧化反应（熟悉）本类药物分子结构中多数具有酚羟基，易被过氧化氢、碘、高锰酸钾等氧化剂氧化而呈现不同的颜色。肾上腺素，盐酸去氧肾上腺素，重酒石酸去甲肾上腺素，盐酸克伦特罗，硫酸沙丁胺醇均可采用此法鉴别。（三）硫酸铜配位反应（熟悉）某些苯乙胺类药物如盐酸去氧肾上腺素具有氨基醇结构，其水溶液在碱性条件下与硫酸铜溶液反应，生成溶于水而不溶于乙醚的紫色配位化合物。（四）亚硝基铁氰化钠反应（熟悉）重酒石酸间羟胺结构中具有脂肪伯氨基，加水溶解后，加亚硝基铁氰化钠试液、丙酮与碳酸氢钠，60的水浴中加热，即显红紫色。这是脂肪族伯胺的专属反应。（五）紫外吸收光谱（了解）（六）红外吸收光谱法（了解）三、杂质检查（一）酮体（掌握）检查原因控制生成过程中可能由于氢化不完全引进的酮体杂质。检查原理酮体在310NM处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收。检查方法分光光度法。（二）有关物质（了解）检查原因控制生产过程中可能引入的酮体等杂质。检查方法高效液相色谱法薄层色谱法。四、含量测定（重点）（一）非水滴定法（掌握）苯乙胺类药物多具有弱碱性，其原料药多采用非水溶液滴定法测定含量。以冰醋酸为溶剂，以高氯酸滴定液滴定，加入醋酸汞试液以消除氢卤酸的干扰，以结晶紫指示液指示终点。测定过程中，如碱性较弱，终点不明显，加入醋酐，增大滴定突跃。1重酒石酸去甲肾上腺素的测定重酒石酸在冰醋酸溶液中酸性较弱，不干扰高氯酸的滴定及结晶紫指示剂终点颜色的变化，可以直接滴定。2盐酸克仑特罗盐酸在冰醋酸溶液中酸性较强，必须加入醋酸汞试液以消除其干扰。克仑特罗碱性较弱，终点突跃不明显，采用指示剂法判断终点时现象不明显，所以采用电位法指示终点。3硫酸沙丁胺醇的测定硫酸在冰醋酸中呈一元酸，故高氯酸只能滴定药物分子中的一个碱基。应在放冷的条件下加醋酐，以防止氨基被乙酰化。（二）溴量法（熟悉）重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素分子结构中含有苯酚结构，在酸性条件下，酚羟基的邻、对位活泼氢能与过量溴发生定量的溴代反应，均采用溴量法进行含量测定。（三）高效液相色谱法（了解）高效液相色谱法主要用于本类药物制剂的含量测定。同步测试答案一、单项选择题1A2D3C4A5A6A7B8D9C10C11B12D13BC14C15A二、多项选择题1AD2AB3BCD4CD5ABCD6ABC7BC8ABCD9AD10AC三、计算题1解0110252/5106GMLLWCVL答对乙酰氨基酚中氯化钠限量是001。2解0521/2045310/21MLGMLGEALC答肾上腺素中酮体的限量是0055。3解答629102587396010WA31稀释倍数对乙酰氨基酚含量CME对乙酰氨基酚的含量是9962。4解盐酸去氧肾上腺素的百分含量100WFTV101098923521509856合格答该盐酸去氧肾上腺素供试品含量是9856，属于9851020，合格。四、分析题1选用适当的化学方法，区别盐酸普鲁卡因、盐酸利多卡因、盐酸丁卡因三种药物。答分别取供试品，加稀盐酸使溶解，加01MOL/L亚硝酸钠试液数滴，滴加碱性萘酚试液数滴，产生猩红色沉淀者为盐酸普鲁卡因；另取其他两分供试品，分别加入纯化水溶解后，加硫酸铜试液与碳酸钠试液，显蓝紫色者为盐酸利多卡因，无颜色变化者为盐酸丁卡因。关键字稀盐酸，亚硝酸钠试液，碱性萘酚试液，猩红色沉淀，硫酸铜试液，碳酸钠试液，蓝紫色2请根据盐酸普鲁卡因的化学结构推断其可用的鉴别及含量测定方法有哪些，可能存在的特殊杂质是什么如何检查1）鉴别可采用