肺组织塑料包埋半薄切片法

肺组织塑料包埋半薄切片法第19卷第1期湖南医科大学1994年2月BULLETINOFHUNANMEDICALUNIVERSYVO119NO1FEB1994S,肺组织塑料包埋半薄切片法病理学教研室F乏F,关键词组堡皇求塑包埋堕染剂和墨垦法塑料包埋技术是一种介于传统的石蜡包埋法和电镜树脂包埋法之间新开展的技术方法前者较简便,但切片较厚,组织结构显示欠清晰后者操作复杂,且对环境温度,湿度要求较高塑料包埋克服上述缺陷,其半薄切片可广泛用于免疫组织化学及酶组织化学目前此方法国内尚来普及,有待进一步试用,推广我们将塑料包埋技术用于正常及嗜热放线菌感染大鼠的肺组织,并用其半薄切片作了HE,特殊染色及免疫组化染色,效果满意,现报道如下1材料与方法取纯种WISTAR大鼠新鲜肺组织约LCM05CM03CM大小,用含025MOL庶糖的缓冲福尔马林液PH744C冷固定1272H取JB一4包埋剂POLYSCIENCESLNCUSA,古A液,B液和催化荆CA液100ML加催化剂C09G,置磁力搅拌器上充分搅匀配制成组织浸润液固定后的组织无需脱水,用PBS液漂洗3次,每次5LOMIN,置浸润液中于室温下用微型振蔼器振动浸透14H然后4C下浸透12H,直至组织呈半透明且沉于窖器底部取1体积的B液加20体积的浸润液,充分搅匀作为包埋液将浸润后的组织用撼纸吸干后放入古包埋液的框内,抟后用与塑料框相适应的特制金唇块紧紧压盖,周围用石蜡密封,放入干燥器内聚合12H左右包埋块在普通带半薄装置的切片机上用钢刀切成052M厚的切片切片放入42恒温水浴糖内自动展帅组织塑料包埋半薄切片橱晓静等平,水浴中加浓氨水12滴有助于展片捞片置洁净的载玻片上亦可涂蛋白甘油,放入37温箱内干燥干燥后的切片直接染色,无需脱去包埋剂各种染色步骤与石蜡切片的染色相同2结果与讨论本法制作的半薄切片经HE和银染色,镜下可见组织细胞层次分明,清晰度较高图1,2作者认为,塑料包埋有以下优点1JB一4为水溶性包埋剂,渗透性好组织切片不需经过酒精,二甲苯等有机溶剂,避免了组织的收缩和某些化学成分的丢失,对酶及抗体的保存较石蜡切片好,免疫荧光染色较好地显示丁过敏性肺泡炎中的IGG2石蜡包埋不仅难于切制肺组织等薄于2下的切片,且表面缺损较多,不完整塑料包埋块可制作0S2M的半薄切片,且切片完整3由于组织结构保存良好,塑料切片比传统的石蜡切片薄,故组织结构显示清晰4浸润和聚合时间文献报道23H,奉文采用12H,效果较前者好但是,操作过程中应注意以下几点1包埋液应新鲜配翻切勿使用用过的古催化剂的A溶液因放置时间过长,催化荆分解,影响聚合2温度对包埋有一定的影响,温度过高包埋剂易过早地聚合,一般为20C左右气温高于25C时,必须采用冰浴包埋,然后放入干燥器内聚合3聚合时应避免与空气接触,密封后放入干燥器内,否则将延迟聚合,甚至完全不聚合89囤2感袅嗜抖蕺钱的大鼠肺组织半薄片囤1HE330国2GORDONSWEET锻染色825FIGI1,2THESECFIONCUTFROMPLASTICEMBEDDINGOFRATLUNGTISSUEAFTEREXPOSEDTOTHERMOAETINOMYEESVULGARISFIG1HE330FIG2GORDON_SWEETGGTAIN8Z51鲫L一1O07收穑湖南省人体犬复孔绦虫病及虫体形态观察关键词复孔绦虫南害学教研L一T塞塾堡皇垦南倒报告兰犬复孔绦虫DIPYLTIDIUMCANJNUM的人体感染,国外报告较多,但我国报告者不逾7倒作者于1983年在湖南省望城县首次从一小孩的粪便中检查出该虫虫卵,并进行了驱虫治疗10年后作了随访追踪现将该倒病史及虫体的形态特征报道如下1病例患者石,男,2岁零8十月原住望城县天顶乡望兴村家中养有一只长毛矮胖犬患几喜玩犬近一年来患儿常有腹痛腹胀,腹泻每日24次大便带粘赦,每次发作时持续35天食欲不撮进食后有时呕吐消瘦,精神不撮烦躁易哭于1983年3月21日来我室检查体格检查发育尚可营养不良,面黄消瘦,颈淋巴结不大,腹软肝脾未扪及,晒F周围有压痛,无肿块,心肺无异常发现化验血常规检查HB98G/LWBC42L0/LN4O,L53E7大便涂片发现犬复孔绦虫虫卵及蛔虫卵治疗空腹服生南瓜子粉50G,加水拌和后服,陌1H后服花槟榔煎剂槟榔509,陌1H再服5O硫酸镁50ML服药后患儿无特殊不适服药后收集24H全粪,淘洗出完整虫体3条服药后2十月复诊,腹痛腹胀,腹泻消失,食欲增加精神好转FLBLLOG/L,WBC6410/LN60,1,36E4粪便经饱和G0盐水漂浮及沉淀法检查,均未发现犬复孔绦虫虫卵1993年4月随访患儿家庭,其父称,自1983年驱虫后家中未再养狗,1985年迁入城区居住,小儿一切正常体查一般情况良好面色红润,身高149M,体重48KG粪便常规检查未发现寄生虫虫卵2虫体形态现襄将所驱得的3条虫体用生理盐水洗净置于生理盐水中待其自然死亡然后以70酒精固定在体枧显散镜下逐条测量并经苏木素染色后观察内部结构虫体长85CM158CM,节片数78118十图1头节小横径028ROMEO40RAM呈菱形有4十轩状吸盘及伸出的顶突顶突有34圈小钩,小钩基部略圃,柄弯曲远端尖锐图2成节与孕节长度均大于宽度,每节具有两套雌雄生殖器官,每衡各有一生殖孔睾丸118132十,子宫呈网状,卵巢位于纵横排泄管附近无