GB 5009.265-2016 食品安全国家标准 食品中多环芳烃的测定

0161    食品安全国家标准食品中多环芳烃的测定1 范围本标准规定了食品中多环芳烃(萘、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并a蒽、苯并b荧蒽、苯并k荧蒽、苯并a芘、茚并1,2,3-c,d芘、二苯并a,h蒽和苯并g,h,i苝的液相色谱测定方法和食品中多环芳烃(萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并a蒽、苯并b荧蒽、苯并k荧蒽、苯并a芘、茚并1,2,3-c,d芘、二苯并a,h蒽和苯并g,h,i苝的气相色谱标准适用于食品中多环芳烃含量的测定。第一法 高效液相色谱法2 原理试样中的多环芳烃用有机溶剂提取,提取液浓缩至近干,溶剂溶解,用浓缩定容后,通过高效液相色谱分离,测定各种多环芳烃在不同激发波长和发射波长处的荧光强度,外标法定量。3 试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为6682规定的一级水。腈(色谱纯。己烷(色谱纯。氯甲烷(色谱纯。藻土:色谱纯。酸镁(优级纯。粒径40m。尾径40m63m。罗里硅土固相萃取柱:500 有机相型微孔滤膜:己烷+1):量取500入二氯甲烷500匀。腈饱和的正己烷:量取800入200摇混匀后,静置分层,上层正己烷层即为乙腈饱和的正己烷。0162    准品多环芳烃(萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并a蒽、苯并b荧蒽、苯并k荧蒽、苯并a芘、茚并1,2,3-c,d芘、二苯并a,h蒽和苯并g,h,i苝有证标准溶液(200g/于保存。警告多环芳烃是已知的致癌、致畸、致突变的物质,并且致癌性随着苯环数的增加而增加,测定时应特别注意安全防护。测定应在通风柜中进行并戴手套,尽量减少暴露。环芳烃标准中间液(1000ng/乙腈定容至100保存。环芳烃标准系列工作液:乙腈定容至100到质量浓度为1ng/ng/0ng/0ng/0ng/00ng/ 效液相色谱仪,带荧光检测器。子天平:冻离心机:转速4500r/旋振荡器。声波振荡器。碎机。质器。吹仪。转蒸发仪。5 样:取样品约500g,经粉碎机粉碎、混匀,分装于洁净盛样袋中,密封标识后于冻保存。样:取样品约500g,将其可食部分先切碎,经均质器充分搅碎均匀,分装于洁净盛样袋中,密封标识后于冻保存。谷或水分少的食品称取2g5g(样于50以下步骤处理:a) 加入10旋振荡30入40水浴超声304500r/取上清液于玻璃离心管心管取液合并于离心管吹(温度控制在35以下)除去溶剂,吹至近干。b) 在离心管入4旋混合30s,再加入9000163    旋混合30s,以4500r/上清液于10心管并提取液于离心管吹蒸发溶剂至近1乙腈定容至1匀后,得试样待测液。产品、肉类和蔬菜等食品称取2g5g(样于501g5玻棒搅匀,b)步骤处理,制得试样待测液。油脂高的食品或动植物油脂称取1g4g(样于50以下步骤处理:a) 加入20旋振荡30入40水浴超声30匀后,以4500r/4)离心5取下层乙腈层于100心管取液合并于鸡心瓶中,35减压旋转蒸发至近干。加入5旋振荡30b) 依次用5a)获得的5用58集所有流出物于20吹(温度控制在35以下)除去溶剂,吹至近干,续氮吹至除尽正己烷乙腈定容至1匀后,得试样待测液。相色谱参考条件a) 色谱柱:长250径5m,或同等性能的色谱柱。b) 检测器:荧光检测器。c) 流动相:乙腈和水;梯度洗脱程序见表1,溶剂剂1 反相剂B%0505055050201000281000325050d) 流速:e) 检测波长:激发和发射波长见表2。0164    表2 多环芳烃的激发波长、abk荧蒽苯并a芘二苯并a,h蒽苯并g,h,i,2,3-c,d柱温:30。g) 进样量:20L。准曲线的制作将标准系列工作液分别注入液相色谱仪中,测得相应的峰面积,以标准工作液的质量浓度为横坐标、以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。样溶液的测定将试样待测液注入液相色谱仪中,以保留时间定性,测得相应的峰面积,根据标准曲线得到试样待测液中多环芳烃的质量浓度。如果试样待测液中被测物质的响应值超出仪器检测的线性范围,可适当稀释后测定。白试验空白试验除不加试样外,采用与试样完全相同的分析步骤。6 分析结果的表述试样中多环芳烃的含量)计算:iV1000m1000(1)式中:试样中多环芳烃的含量,单位为微克每千克(g/0165    i依据标准曲线计算得到的试样待测液中多环芳烃位为纳克每毫升(ng/V试样待测液最终定容体积,单位为毫升(1000单位转换;m试样质量,单位为克(g)。含量大于等于10g/留三位有效数字;含量小于10g/留两位有效数字。注:计算结果应扣除空白值。7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。8 其他当试样取4g,定容体积为1方法的检出限和定量限见表3。表3 液相色谱法的多环芳烃检出限和定量限单位为微克每千克化合物蒽、苯并a蒽、茚并1,2,3-c,d芘、苯并b荧蒽、苯并k荧蒽、苯并a芘、二苯并a,h蒽、苯并g,h,i苝菲萘荧蒽苊、芴、相色谱理试样中的多环芳烃用有机溶剂提取,提取液浓缩至近干,用浓缩定容后,用气相色谱标法定量。10 试剂和材料同第3章。11 相色谱0166    12 白试验空白试验除不加试样外,采用与试验完全相同的分析步骤。相色谱色谱柱:长30m,同等性能的色谱柱。b) 柱温度程序:初始温度90,以20/再以5/保持2c) 进样口温度:250;d) 色谱80;e) 离子源温度:230;f) 载气:氦气,纯度g) 电离方式:EI;h) 电离能量:70eV;i) 质量扫描范围:5050j) 测定方式:选择离子监测方式;k) 进样方式:不分流进样,l) 进样量:m) 溶剂延迟:3准曲线的制作将标准系列工作液分别注入气相色谱得相应的峰面积,以标准工作液的质量浓度为横坐标、以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。样溶液的测定将试样待测液注入气相色谱得相应的峰面积,根据标准曲线得到试样待测液中多环芳烃的质量浓度。如果试样待测液中被测物质的响应值超出仪器检测的线性范围,可适当稀释后测定。性如果试样待测液中检出的色谱峰保留时间与标准工作溶液相一致,且选择离子的相对丰度与标准工作溶液的相对丰度两者之差不大于允许相对偏差(相对丰度50%,允许10%偏差;50%>相对丰度>20%,允许15%偏差;10%<相对丰度<20%,允许20%偏差;相对丰度10%,允许50%偏差),则可判断试样中存在对应的被测物。在上述色谱条件下,考保留时间和特征离子见表4。0167    表4 02100661005610094210092521009521001000100130010016249苯并a261001226100103611苯并b50100151612苯并k50100162013苯并a50100162214茚苯1,2,3-c,d77100192215二苯并a,h76100123016苯并g,h,i77100242313 分析结果的表述试样中多环芳烃的含量)计算:iV1000m1000(2)式中:试样中多环芳烃的含量,单位为微克每千克(g/i依据标准曲线计算得到的试样待测液中多环芳烃位为纳克每毫升(ng/V试样待测液最终定容体积,单位为毫升(1000单位转换;m试样质量,单位为克(g)。含量大于等于10g/留三位有效数字;含量小于10g/留两位有效数字。注:计算结果应扣除空白值。14 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。0168    15 其他当试样取4g,定容体积为1方法的检出限和定量限见表5。表5 气相色谱烯、蒽、荧蒽、苯并b荧蒽、苯并k荧蒽苯并a蒽、苯并a芘、苯并g,h,i苝菲、芘萘芴、茚并1,2,3-c,d芘、二苯并a,h0169    附 录 明:1萘;        2苊;         3芴;       4菲;5蒽;6荧蒽;7芘;8苯并a蒽;9;10苯并b荧蒽;11苯并k荧蒽;12苯并a芘;13二苯并a,h蒽;14苯并g,h,i苝;15茚并1,2,3-c,d芘;16波长改变。01610   附 录 明:1萘;       2苊烯;     &