xx人民医院检验科生化室作业指导书-iso15189质量管理体系范本文件（第五册）

生化室作业指导书文件编号ABCD3SF0161第A版编制审核批准生效日期2006年8月8日XX人民医院检验科目录序号主题内容代号页号1血清总胆红素测定ABCD3SF0162血清直接胆红素测定ABCD3SF02103血清总蛋白液体双缩脲法测定ABCD3SF03134血清白蛋白溴甲酚绿法测定ABCD3SF04165血清丙氨酸氨基测定ABCD3SF05196血清天门冬氨酸氨基测定ABCD3SF06237血清碱性磷酸酶测定ABCD3SF07278血清淀粉酶测定ABCD3SF08319血清葡萄糖己糖激酶法测定ABCD3SF093510血清尿素氮谷氨酸测定ABCD3SF103911血清肌酐苦味酸法测定ABCD3SF114312血清尿酸TBHBA法测定ABCD3SF124613血清总胆固醇酶试剂法测定ABCD3SF135014血清甘油三酯酶试剂法测定ABCD3SF145415血清镁二甲苯胺蓝法测定ABCD3SF155816血清无机磷磷钼酸法测定ABCD3SF166117血清钙偶氮胂法测定ABCD3SF176518血清载脂蛋白A1测定ABCD3SF186819血清载脂蛋白B测定ABCD3SF197220血清高密度脂蛋白胆固醇测定ABCD3SF207621血清低密度脂蛋白胆固醇测定ABCD3SF218022血清肌酸激酶CK法测定ABCD3SF228423血清肌酸激酶MB同工酶测定ABCD3SF238824血清乳酸脱氢酶DGKC法测定ABCD3SF249225血清乳酸脱氢酶测定ABCD3SF259626血清A羟丁酸脱氢酶测定ABCD3SF269927血清总胆汁酸循环酶法测定ABCD3SF2710328OLYMPUS钠、钾、氯离子测定ABCD3SF2810629血清二氧化碳酶试剂法测定ABCD3SF2911230血清糖化蛋白四氮唑蓝法测定ABCD3SF3011531尿液或脑脊液总蛋白测定ABCD3SF3111832血清G谷氨酰转移酶测定ABCD3SF3212133钾的电极电位法测定ABCD3SF3312434钠离子电极电位法测定ABCD3SF3412735氯的电极电位法测定ABCD3SF3513236钙的比色法测定ABCD3SF3613737血、尿、脑脊液葡萄糖测定ABCD3SF3714238血、尿液尿素氮（BUN）测定ABCD3SF3814739血、尿液肌酐（CR）测定ABCD3SF3915240血清天门冬氨酸测定ABCD3SF4015741动脉血气电极法测定ABCD3SF4116342血清乳酸脱氢酶速率法测定ABCD3SF4216843血、尿液淀粉酶两点法测定ABCD3SF4317344血清蛋白电泳法检查ABCD3SF4417845高铁血红蛋白还原试验比色法ABCD3SF4518146血清二氧化碳酶反应终点法测定ABCD3SF4618347正常值、病理值复合控制品ABCD3SF4718848载脂蛋白A1、B复合控制品ABCD3SF4819049复合校准品ABCD3SF4919250载脂蛋白A1、载脂蛋白B校准品ABCD3SF5019451高、低密度脂蛋白胆固醇校准品ABCD3SF5119652722分光光度计维护规程ABCD3SF5219853血气分析仪操作维护规程ABCD3SF5320154MEDICAL低温冰箱操作维护规程ABCD3SF5420355MEDICA90纯水机操作维护规程ABCD3SF5520556AU1000ISE分析仪操作维护规程ABCD3SF5620757AU1000生化分析仪操作维护规程ABCD3SF5720958电泳仪操作维护规程ABCD3SF5821459干化学分析仪操作维护规程ABCD3SF5921760离心机操作维护规程ABCD3SF60222修订页序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021血清总胆红素TBIL测定1实验原理血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883年EHRLICH提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。申能总胆红素试剂是改良的重氮法。使用一种稳定的重氮盐，2,4二氯苯胺重氮盐（DCA），与胆红素反应，形成红色偶氮化合物，它在540NM吸光度最大。在540/600NM时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。胆红素DCA红色偶氮化合物表面活性剂2标本21病人准备无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。22类型血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。3标本存放1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融。4标本运输常温条件下避光保存运输。5标本拒收标准标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6实验材料61试剂申能总胆红素试剂盒剂1试剂2）611试剂组成试剂1664ML磷酸缓冲液40MMOL/L氯化钠9G/L表面活性剂,稳定剂适量试剂2616ML2,4二氯苯胺重氮盐1MMOL/L盐酸30MMOL/L表面活性剂适量612试剂准备试剂为即用式。613试剂稳定性与贮存试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。614变质指示当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。615注意事项此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告腐蚀剂不要入口；避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。62校准品使用DIASYS公司提供的TRUCALU校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品SOP文件63质控品参见生化检验校准品和质控品SOP文件7仪器奥林巴斯AU1000生化分析仪8操作步骤81项目基本参数参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数SOP文件。82仪器操作步骤参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程SOP文件。9检验结果的判断与分析10质量控制在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程SOP文件。11计算方法以TRUCALU复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以MOL/L报告。手工测定计算方法为AU总胆红素MOL/L校准液浓度AS12参考值范围婴儿出生24小时内150MOL/L出生第2天22193MOL/L出生第3天12217MOL/L出生第46天17216MOL/L儿童一个月3417MOL/L成年人1721MOL/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13临床意义胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为GILBERT综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14操作性能141线性范围12513MOL/L142精密度精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU1000批内精密度小于3或SD007，总精密度小于5或SD010。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度N20XMOL/LSMOL/LCV批间精密度N20XMOL/LSMOL/LCV样品115220464305样品114880408274样品217440405232样品219660686349样品382600785095样品379522274286143方法学比较本公司的试剂盒Y与某商品化试剂盒X，同时对247个样品进行TBIL检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下Y100X000MOL/L；R1000。144灵敏度本试剂的检测限为12MOL/L。145病人结果可报告范围12513MOL/L15超出范围结果处理本法线性上限为513MOL/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作11稀释，重新测定，结果乘以2。16病危报警值的处理当新生儿血清标本测定结果总胆红素340MOL/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17方法局限性171本法线性上限为513MOL/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作11稀释，重新测定，结果乘以2。172干扰物质当样品中抗坏血酸浓度1704MOL/L，血红蛋白浓度500G/L，甘油三酯浓度226MMOL/L时没有观察到干扰。18补救措施当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19参考文献1THOMASLEDCLINICALLABORATORYDIAGNOSTICS1STEDFRANKFURTTHBOOKSVERLAGSGESELLSCHAFT1998P1922022TOLMANKG,REJRLIVERFUNCTIONINBURTISCA,ASHWOODEREDITORSTIETZTEXTBOOKOFCLINICALCHEMISTRY3RDEDPHILADELPHIAWBSAUNDERSCOMPANY1999P1125773RANDRN,DIPASQUAAANEWDIAZOMETHODFORTHEDETERMINATIONOFBILIRUBINCLINCHEM19626570820其他仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清直接胆红素（DBIL）测定1实验原理直接胆红素与2,4二氯苯胺重氮盐形成重氮化合物，在酸性条件下呈红色。2标本21病人准备无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。22类型血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。3标本存放1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融。4标本运输常温条件下避光保存运输。5标本拒收标准标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6实验材料61试剂申能总胆红素试剂剂试剂2611试剂组成试剂11664MLEDTANA2007MMOL/L氯化钠66G/L氨基磺酸70MMOL/L试剂2616ML2,4二氯苯胺重氮盐009MMOL/L盐酸130MMOL/LEDTANA2002MMOL/L612试剂准备试剂为即用式。613试剂稳定性与贮存试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。614变质指示当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。615注意事项此试剂为体外诊断用。警告腐蚀剂不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。62校准品使用DIASYS公司提供的TRUCALU校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品SOP文件63质控品参见生化检验校准品和质控品SOP文件7仪器奥林巴斯AU1000生化分析仪8操作步骤81项目基本参数参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数SOP文件82仪器操作步骤参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程SOP文件检验结果的判断与分析10质量控制在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程SOP文件。11计算方法以TRUCALU复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以MOL/L报告。手工测定计算方法为AU直接胆红素MOL/L校准液浓度AS12参考值范围68MOL/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13临床意义胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为GILBERT综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14操作性能141线性范围17171MOL/L142精密度精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU1000批内精密度小于4或SD004，总精密度小于5或SD007。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度N20XMOL/LSMOL/LCV批间精密度N20XMOL/LSMOL/LCV样品160020334样品162019312样品2128012100样品2130019146样品3364026071样品3354046130143方法学比较本公司的试剂盒Y与某商品化试剂盒X，同时对85个样品进行DBIL检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下Y095X068MOL/L；R0995。144灵敏度17MOL/L。145病人结果可报告范围17171MOL/L15超出范围结果处理本法线性上限为171MOL/L。样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作11稀释，重新测定，结果乘以2。16病危报警值的处理无。17方法局限性171本法线性上限为171MOL/L。样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作11稀释，重新测定，结果乘以2。172干扰物质当样品中抗坏血酸浓度1704MOL/L，甘油三酯浓度226MMOL/L时没有观察到干扰。血红蛋白浓度050G/L将产生干扰。18补救措施当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19参考文献TIETZ,NWED,FUNDAMENTALSOFCLINICALCHEMISTRY,3RDEDITION,WBSAUNDERS,1987VANDENBERGH,AANDMUELLER,P,BIOCHEMZ,7790,1916NCCLS,INTERFERENCETESTINGINCLINICALCHEMISTRY,EP7P,1986YOUNG,DS,EFFECTSOFDRUGSONCLINICALLABORATORYTESTS,4THEDITION,AACCPRESS,1995NCCLS,EVALUATIONPROTOCOLEP5T2,1992RAND,RN,DIPASQUE,A,CLINCHEM19628570HENRY,J,CANNON,DC,WINKELMANN,JV,CLINICALCHEMISTRY,PRINCIPLESANDTECHNICS,HARPER1998P64472JOHNSONAM,ROHLFSEM,SILVERMANLMPROTEINSINBURTISCA,ASHWOODEREDITORSTIETZTEXTBOOKOFCLINICALCHEMISTRY3RDEDPHILADELPHIAWBSAUNDERSCOMPANY1999P47754020其他仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清白蛋白（ALB）溴甲酚绿（BCG）法测定1实验原理在PH值42时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630NM处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。PH42白蛋白溴甲酚绿绿色化合物2标本采集21病人准备无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。22类型血清、肝素或EDTA血浆。3标本存放留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下（1525）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（28）稳定一个月，20保存至少可以稳定3个月。4标本运输室温条件下运输5标本拒收标准细菌污染的不能做测定。6实验材料61上海申能白蛋白测定试剂盒（货号11202271701，870ML）611试剂组成柠檬酸盐缓冲液PH4230MMOL/L溴甲酚绿BCG026MMOL/L表面活性剂适量612试剂准备试剂为即用式。613试剂稳定性与贮存试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。614变质指示当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。615注意事项避免试剂与皮肤及粘膜接触。62校准品参见生化检验校准品和质控品SOP文件63质控品参见生化检验校准品和质控品SOP文件7仪器奥林巴斯AU1000生化分析仪8操作步骤81项目基本参数参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数SOP文件82仪器操作步骤参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程SOP文件9检验结果的判断与分析10质量控制在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程SOP文件。11计算方法以TRUCALU复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为AU白蛋白G/L校准液浓度AS12参考值范围成人3552G/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13临床意义白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并是维持血浆渗透压的主要组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白蛋白降低多见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外，白蛋白量反映了个体的健康与营养状况，因此可用于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。14操作性能141线性范围260G/L142精密度重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内重复性小于3，总不精密度小于3。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度N20XG/LSG/LCV天间精密度N20XG/LSG/LCV样品135203091样品133505158样品245005112样品243206144样品368912179样品367311160143方法学比较本公司的试剂盒Y与某商品化试剂盒X，同时对59个样品进行ALB检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下Y100X11G/L；R0998144灵敏度2G/L。145病人结果可报告范围260G/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作11稀释，重新测定，结果乘以2。15超出范围结果处理本法线性上限为60G/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作11稀释，重新测定，结果乘以2。16病危报警值的处理17方法局限性171本法线性上限为60G/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作11稀释，重新测定，结果乘以2。172干扰物质当样品中抗坏血酸浓度1704MOL/L，胆红素浓度684MOL/L，血红蛋白浓度400G/L，甘油三酯浓度563MMOL/L时没有观察到干扰。18补救措施当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19参考文献1DOUMAS,B,WATSON,WA,BIGGS,HG,CLINCHIMACTA19713187962WEBSTER,D,CLINCHIMACTA1974531091153TIETZ,NWTEXTBOOKOFCLINICALCHEMISTRY,2NDEDITION,WBSAUNDERSCOMPANY,PHILADELPHIA,19947034AACCPRESSFRIENDMAN,RB,ANDYOUNG,DS,EFFECTSOFDISEASEONCLINICALLABORATORYTESTS,2NDEDITION,19895RODKEY,FL,CLINCHEM,247819656DOUMAS,BT,WATSON,WAANDBIGGS,HG,CLINCHEMACTA318796,19717TIETZ,NW,CLINICALGUIDETOLABORATORYTESTS,2NDEDITION,WBSAUNDERS,19908NCCLS,INTERFERENCETESTINGINCLINICALCHEMISTRY,EP7P,19869YOUNG,DS,EFFECTSOFDRUGSONCLINICALLABORATORYTESTS,4THEDITION,AACCPRESS,199510NCCLS,GUIDELINEEP5T2,199220其他仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定1实验原理国际临床化学学会IFCC推荐的紫外连续监测法。ALTL丙氨酸酮戊二酸丙酮酸L谷氨酸丙酮酸NADHHL乳酸NADH2O加入磷酸吡哆醛（P5P）是为了稳定ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果12标本21病人准备12小时禁食。22类型血清，肝素或EDTA血浆。3标本存放3天内的活性损失28保存1和严重肝病有关，常见慢性肝病。14操作性能141线性范围4800U/L142精密度精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精密度小于3，总精密度小于3。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。不含磷酸吡哆醛批内精密度N20XU/LSU/LCV天间精密度N20XU/LSU/LCV样品1228070308样品1222138622样品2426068160样品2448117262样品3993092092样品3101102100含磷酸吡哆醛批内精密度N20XU/LSU/LCV批间精密度N20XU/LSU/LCV样品1333099296样品1338125371样品2721136188样品2720204283样品3133176132样品3128277216143方法学比较不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒Y与某商品化试剂盒X，同时对78个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下Y100X000U/L；R0999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒Y与某商品化试剂盒X，同时对80个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下Y100X000U/L；R0994。144灵敏度本试剂的检测限为4U/L。145病人结果可报告范围4U/L800U/L15超出范围结果处理本法对ALT活力检测的最大A/MIN在340、334NM为016,在365NM为008。当样品测定值超过上限时，应将样品用9G/L氯化钠溶液作19稀释，重新测定，结果乘以10。16病危报警值的处理17方法局限性171本法对ALT活力检测的最大A/MIN在340、334NM为016,在365NM为008。当样品测定值超过上限时，应将样品用9G/L氯化钠溶液作19稀释，重新测定，结果乘以10。172干扰物质当样品中抗坏血酸浓度1704MOL/L，胆红素浓度684MOL/L，血红蛋白浓度400G/L，甘油三酯浓度226MMOL/L时没有观察到干扰。18补救措施当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19参考文献1THOMASLALANINEAMINOTRANSFERASEALT,ASPARTATEAMINOTRANSFERASEASTINTHOMASL,EDITORCLINICALLABORATORYDIAGNOSTICS1STEDFRANKFURTTHBOOKSVERLAGSGESELLSCHAFT1998P55652MOSSDW,HENDERSONARCLINICALENZYMOLOGYINBURTISCA,ASHWOODEREDITORSTIETZTEXTBOOKOFCLINICALCHEMISTRY3RDEDPHILADELPHIAWBSAUNDERSCOMPANY1999P6177213BERGMEYERHU,HORDERM,REJRINTERNATIONALFEDERATIONOFCLINICALCHEMISTRYIFCCSCIENTIFICCOMMITTEE,ANALYTICALSECTIONAPPROVEDRECOMMENDATION1985ONIFCCMETHODSFORTHEMEASUREMENTOFCATALYTICCONCENTRATIONOFENZYMESPART3IFCCMETHODFORALANINEAMINOTRANSFERASELALANINE2OXOGLUTARATEAMINOTRANSFERASE,EC2612JCLINCHEMCLINBIOCHEM198624481954LORENTZK,ROHLEG,SIEKMANNLEINFUHRUNGDERNEUENSTANDARDMETHODEN1994ZURBESTIMMUNGDERKATALYTISCHENENZYMKONZENTRATIONENBEI37DGKLINISCHECHEMIEMITTEILUNGEN199526190220其他仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定1实验原理国际临床化学学会IFCC推荐的紫外连续监测法。L天门冬氨酸酮戊二酸AST草酰乙酸L谷氨酸草酰乙酸NADHHMDH苹果酸脱氢酶L苹果酸NADH2O2标本21病人准备12小时禁食。22类型血清，肝素或EDTA血浆。3标本存放3天内的活性损失28保存1和严重肝病有关，常见慢性肝病。14操作性能141线性范围2800U/L。142精密度精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精密度小于3，总精密度小于3。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。不含磷酸吡哆醛批内精密度N20XU/LSU/LCV天间精密度N20XU/LSU/LCV样品1251082325样品1257113440样品2513157306样品2486067138样品3116090077样品3115080069含磷酸吡哆醛批内精密度N20XU/LSU/LCV天间精密度N20XU/LSU/LCV样品1436110251样品1440159361样品2745179241样品2770305397样品3174318183样品3187337180143方法学比较不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒Y与某商品化试剂盒X，同时对78个样品进行AST活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下Y098X051U/L；R0999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒Y与某商品化试剂盒X，同时对80个样品进行AST活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下Y097X079U/L；R0995。144灵敏度本试剂的检测限为2U/L。145病人结果可报告范围2800U/L。15超出范围结果处理本法对AST活力检测的最大A/MIN在340、334NM为016，在365NM为008。当样品测定值超过上限时，应将样品用9G/L氯化钠溶液作19稀释，重新测定，结果乘以10。16病危报警值的处理无。17方法局限性171本法对AST活力检测的最大A/MIN在340、334NM为016,在365NM为008。当样品测定值超过上限时，应将样品用9G/L氯化钠溶液作19稀释，重新测定，结果乘以10。172干扰物质当样品中抗坏血酸浓度1704MOL/L，胆红素浓度684MOL/L，甘油三酯浓度226MMOL/L时没有观察到干扰。红细胞内富含AST，因此溶血血清检测结果明显偏高。18补救措施当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19参考文献1THOMASLALANINEAMINOTRANSFERASEALT,ASPARTATEAMINOTRANSFERASEASTINTHOMASL,EDITORCLINICALLABORATORYDIAGNOSTICS1STEDFRANKFURTTHBOOKSVERLAGSGESELLSCHAFT1998P55652MOSSDW,HENDERSONARCLINICALENZYMOLOGYINBURTISCA,ASHWOODEREDITORSTIETZTEXTBOOKOFCLINICALCHEMISTRY3RDEDPHILADELPHIAWBSAUNDERSCOMPANY1999P6177213BERGMEYERHU,HORDERM,REJRINTERNATIONALFEDERATIONOFCLINICALCHEMISTRYIFCCSCIENTIFICCOMMITTEE,ANALYTICALSECTIONAPPROVEDRECOMMENDATION1985ONIFCCMETHODSFORTHEMEASUREMENTOFCATALYTICCONCENTRATIONOFENZYMESPART3IFCCMETHODFORALANINEAMINOTRANSFERASELALANINE2OXOGLUTARATEAMINOTRANSFERASE,EC2612JCLINCHEMCLINBIOCHEM198624481954LORENTZK,ROHLEG,SIEKMANNLEINFUHRUNGDERNEUENSTANDARDMETHODEN1994ZURBESTIMMUNGDERKATALYTISCHENENZYMKONZENTRATIONENBEI37DGKLINISCHECHEMIEMITTEILUNGEN199526190220其他仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清碱性磷酸酶（ALP）磷酸对硝基苯酚法测定1实验原理碱性磷酸酶的活性由在PH值为104，2氨基2甲基1丙醇（AMP）存在的情况下测量P硝基磷酸苯酯（PNPP）的转换速率决定。ALPPNPPAMPPNPAMPPO4在410/480NM测定PNP的生成速率，它与标本中ALP的活性成正比。2标本采集与处理21病人准备无特殊要求。22标本类型标本最好是无溶血的血清或肝素化的血浆。23血清分离应在收集后两小时内分离出来。避免使用含EDTA或草酸盐的血浆。3标本存放23天内的活性损失1525保存300U/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17方法局限性171本法线性上限为2400U/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作110稀释，重新测定，结果乘以11。172干扰物质当样品中抗坏血酸浓度1704MOL/L，胆红素浓度684MOL/L，甘油三酯浓度113MMOL/L时没有观察到干扰。即使极低浓度的血红蛋白都会对检测产生干扰。18补救措施当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19参考文献1FRIEDMAN,RBANDYOUNG,DSEFFECTSOFDISEASESONCLINICALLABORATORYTESTS,2NDEDITION,AACCPRESS,WASHINGTON,DC,19892BLAIR,HE,GENZYME,USPATENTPENDING3TIETZ,NWED,CLINCIALGUIDETOLABORATORYTESTS,2NDEDITION,WBSAUNDERS,19904HENRY,RJ,CANNON,DCANDWINKELMAN,JW,CLINICALCHEMISTRY,PRINCIPLES19745NCCLS,INTERFERENCETESTINGINCLINCIALCHEMISTRY,EP7P,19866YOUNG,DS,EFFECTSOFDRUGSONCLINCIALLABORATORYTESTS,4THEDITION,AACCPRESS,19957NCCLS,EVALUATIONPROTOCOLEP5T2,19928RAUSCHER,EETAL,FRESENIUSZ,ANALYTCHEM,324,304198620其他仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清葡萄糖（GLU）己糖激酶（HK法）测定法1实验原理己糖激酶紫外比色测定法。HK葡萄糖ATPG6PADPMG2G6PDHG6PNAD6磷酸葡萄糖NADHH2标本21病人准备12小时禁食。22类型血清或血浆（EDTA，肝素或氟化钠），标本最好不要溶血。迅速分离血清或血浆，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。随机收集尿样。3标本存放血清、血浆应在血液采集1小时内，尽早分离。加入糖分解抑制剂（NAF，KF）后的稳定性1525保存可稳定1天,48保存可稳定7天。血清中的葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在25下可稳定8个小时，在4下可稳定72小时。尿样应保存在28下并尽快进行分析。脑脊髓液如果避免蒸发可在28下稳定至少5天，5天内不检验的标本应在收集后立即储存在20的条件下。4标本运输常温条件下保存运输。5标本拒收标准细菌污染、超时送检的的标本。6实验材料61试剂申能血糖测定试剂盒剂1664ML试剂2616ML）611试剂组成试剂1TRIS缓冲液PH7880MMOL/LMG24MMOL/LATP17MMOL/LNAD17MMOL/L试剂2MG24MMOL/L己糖激酶1500U/L葡萄糖6磷酸脱氢酶1500U/L612试剂准备试剂为即用式。613试剂稳定性与贮存试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。614变质指示当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。615注意事项此试剂为体外诊断用。不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如排向下水道请用大量的水冲洗。62校准品使用DIASYS公司提供的TRUCALU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品SOP文件。63质控品具体参见生化检验校准品和质控品SOP文件。7仪器奥林巴斯AU1000生化分析仪8操作步骤81项目基本参数参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数SOP文件82仪器操作步骤参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程SOP文件9检验结果的判断与分析10质量控制在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程SOP文件。11计算方法以TRUCALU复合校准品血糖校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以MMOL/L报告。手工测定计算方法为AU葡萄糖浓度（MMOL/L）校准液浓度AS12参考值范围（MMOL/L）新生儿脐带血35881小时20552小时2249514小时19431028小时26454452小时2744儿童（空腹）16岁4170719岁3959成人（空腹）3964参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13临床意义检测血清或血浆中葡萄糖主要用于糖尿病的诊断和治疗监视，还可用于检出新生儿低血糖症、排除胰岛细胞癌以及评估各种疾病碳水化合物代谢状况。血清葡萄糖水平可能会异常高（高血糖）或异常低（低血糖）。葡萄糖测量用于诊断和治疗碳水化合物代谢紊乱，包括糖尿病，新生儿低血糖，自发性低血糖，郎格罕氏岛细胞癌等。葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，怀孕的妇女中很常见。妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之间或一天之中有一个显著的变化。脑脊髓液（CSF）葡萄糖的测定帮助区别病毒性脑膜炎与细菌性脑膜炎；细菌性脑膜炎和结核性脑膜炎中的葡萄糖值通常很低（不到的40至50血清葡萄糖），病毒性脑膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性脑膜炎（肿瘤细胞在脑膜中广泛渗透）也使CSF葡萄糖值在正常值以下。14操作性能141线性范围0128MMOL/L142精密度精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精密度小于3，总精密度小于3。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度N20XMMOL/LSMMOL/LCV批间精密度N20XMMOL/LSMMOL/LCV样品26500059091样品26720142211样品316100127079样品316540296179143方法学比较本公司的试剂盒Y与某商品化试剂盒X，同时对76个样品进行GLU检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下Y100X000MMOL/L；R0998。144灵敏度本试剂的检测限为01MMOL/L。145病人结果可报告范围0128MMOL/L15超出范围结果处理本法线性上限为28MMOL/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作110稀释，重新测定，结果乘以11。16病危报警值的处理女性及婴儿的血糖测定值222MMOL/L；男性的血糖测定值222MMOL/L；新生儿的血糖测定值166MMOL/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17方法局限性171本法线性上限为28MMOL/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用09氯化钠溶液作110稀释，重新测定，结果乘以11。172干扰物质使用试剂起始法，当样品中抗坏血酸浓度1704MOL/L，胆红素浓度684MOL/L，血红蛋白浓度500G/L，甘油三酯浓度226MMOL/L时没有观察到干扰。18补救措施当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19参考文献1THOMASLCLINICALLABORATORYDIAGNOSTICS1STEDFRANKFURTTHBOOKSVERLAGSGESELLSCHAFT1998P13172SACKSDBCARBOHYDRATESINBURTISCA,ASHWOODEREDITORSTIETZTEXTBOOKOFCLINICALCHEMISTRY3RDEDPHILADELPHIAWBSAUNDERSCOMPANY1999P75080820其他仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。血清尿素氮（BUN）谷氨酸脱氢酶测定法1实验原理脲酶谷氨酸脱氢酶（UREASEGLDH）连续监测法。尿素被脲酶水解产氨。在NADH的存在下，氨和酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD。NADH的减少和样品中尿素浓度成正比。本法是连续监测法。脲酶尿素2H2O2NH42HCO3谷氨酸脱氢酶NH4酮戊二酸NADHL谷氨酸NADH2O2标本21病人准备血清无特殊要求。要留取24小时尿样。22类型血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1100稀释。3标本存放血清或血浆稳定性425保存可稳定7天；20保存可稳定1年。尿液稳定性2025保存可稳定2天；48保存可稳定7天；20保存可稳定1个月。4标本运输常温条件下保存运输。5标本拒收标准细菌污染的标本。6实验材料61试剂申能尿素测定试剂盒剂1664ML试剂2616ML）611试剂组成试剂1TRIS缓冲液PH78120MMOL/L酮戊二酸7MMOL/LADP06MMOL/L谷氨酸脱氢酶1000U/L脲酶6000U/L试剂2NADH025MMOL/L612试剂准备试剂为即用式。613试剂稳定性与贮存试剂保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。614变质指示当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。615注意事项此试剂为体外诊断用。不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。应采取必要的预防措施使用试剂。62校准品使用DIASYS公司提供的TRUCALU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品SOP文件。63质控品具体参见生化检验校准品和质控品SOP文件。7仪器奥林巴斯AU1000生化分析仪8操作步骤81项目基本参数参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数SOP文件82仪器操作步骤参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程SOP文件9检验结果的判断与分析10质量控制在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程SOP文件。11计算方法以TRUCALU复合校准品尿素氮校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以MMOL/L报告。将尿素量乘以系数28可以换算成尿素氮量；将尿素氮量乘以系数0357可以换算成尿素量。手工测定计算方法为AU尿素氮浓度（MMOL/L）校准液浓度AS12参考值范围血清/血浆1成人（MMOL/L）全球2872女性50岁3575男性50岁3092儿童13岁1860413岁25601419岁2975尿素/肌酐比率12540MMOL/L/MMOL/L尿液2043072MOL/D（注各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13临床意义尿素是蛋白质分解代谢的含氮终产物。高尿素血症或氮血症表现为血液中尿素水平升高。鉴别肾前和肾后氮血症时可以同时检测尿素和肌酐。因脱水、蛋白质代谢增加、皮质醇治疗或肾脏灌注减少等引起的肾前氮血症，表现为尿素水平升高而肌酐水平正常。由泌尿管道阻塞引起的肾后氮血症，表现为尿素和肌酐水平都升高，但肌酐升高程度较小。发生肾病时，肾小球滤过作用明显下降或蛋白质摄入量大于200G/天都会导致尿素浓度升高。尿素氮的检测用于诊断和治疗某些肾