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文档简介

1、植物克隆的技术基础是-, 理论基础是-,植物组织培养,植物细胞的全能性,第二节 植 物 的 克 隆,离体、消毒的植物器官、组织或细胞,脱分化,植物组织培养,1、概念,植物体的每个活细胞具有遗传上的全能性,都具有发育为完整植株的潜能,叫做植物细胞全能性。,2、原因,3、全能性的体现:,一、植物细胞的全能性,植物细胞 动物细胞,不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间因遗传性的差异,细胞全能性的表达程度大不相同.,生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质.,有些植物在多次继代培养后,会丧失细胞全能性的表达能力,原因:1.遗传物质发生不可逆转的改变 2.激素平衡被打破或外源激素作用的结

2、果,克隆成功所需的条件(a) 1.探讨特定植物细胞全能性表达的条件(激素配比) 2.选择性能优良、细胞全能型表达充分的基因型,思考讨论:为什么体内细胞没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织、器官?,基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期,生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的,合成的蛋白质也不一样,从而形成了不同的组织和器官。,离体状态 有一定营养物质、激素和其他外界条件(如无菌、 温度、PH),细胞表现出全能性的条件,例1、在生物体内,细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官,是因为:,A、细胞丧失了全能性,B、基因的表达有选择性,C、不同的细胞内基因不完

3、全相同,B,二、植物组织培养程序,1、配制半固体培养基 2、无菌操作切取一些小块组织 3、获得愈伤组织 4、诱导愈伤组织 5、再生新植株出现,脱分化,通过调节营养物质和植物生长调节剂的适当配比,植物组织培养的培养基,无机营养物质:植物所必需的大量元素及微量元素 有机营养物质 含N物质:包括维生素和氨基酸 碳源:2%5%的蔗糖 琼脂:起凝固支持作用 植物生长调节剂:(生长素,细胞分裂素) PH值:5.06.0,愈伤组织,强调几个概念:,愈伤组织:,植物组织块切口处的细胞在创伤的刺激下发生脱分化,继续分裂增殖,形成一种相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。,植物细胞的脱分化:由高度分化的植物

4、器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。,获取 外植体,无菌接种,诱导愈伤组织 的形成,试管苗的形成,扩大培养,移栽,脱分化,再分化,例2、当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时,下列有可能使其表现出全能性,发育成完整的植株的是( ) A、细胞分裂素 B、生长素 C、一定的营养物质 D、以上三者均是,D,D,例3、在生物体的所有细胞中,全能性最高的是 A、卵细胞 B、植物花粉 C、体细胞 D、受精卵,三、植物细胞培养主要几种技术:,1、组织培养 2、悬浮细胞培养 3、原生质体培养 4、单倍体培养,通过调节营养物质和生长调节剂的适当配比,诱导愈伤组织分化出芽和根的分生

5、组织而形成再生新的植株。,通过液体悬浮培养使愈伤组织分散成单细胞,经适宜培养基中成分的诱导,可发育成胚状体,从而形成新株。,原生质体:去除细胞壁后的植物细胞。,用适当方法进行原生质体培养,也可以获得新植株。,用花药离体培养方法获得单倍体植株。,植物细胞,愈伤组织,芽、根,单细胞,胚状体,植株,植株,植物激素的不同配比,植物激素的不同配比,植物激素的不同配比,原生质体培养技术,植物细胞结构图,如何剥离细胞壁呢?,用纤维素酶和果胶酶啊!,原生质体培养,植物 细胞,0.50.6mol/L的甘露醇 (较高渗透压),纤维素酶 和果胶酶,球型的 原生质体,原生质体:植物细胞除去壁后的部分,为什么要加较高渗

6、透压的甘露醇呢?,防止原生质体吸水胀破,植株,植物细胞工程:,1借助基因工程方法,将外源基因导入受体细胞,2通过细胞融合将不同来源的遗传物质重新组合,3通过显微注射将不同来源的遗传物质重新组合,本课小结:,一、植物细胞的全能性,三、植物细胞培养主要几种技术,二、植物组织培养程序,四、植物克隆的成就:,五、植物克隆的发展,1、细胞培养和器官培养 2、原生质体培养和植物细胞工程 3、多途径上的植物克隆实践,1、概念2、原因3、体现,1、配置半固体培养基 2、无菌操作切取一些小块组织 3、获得愈伤组织 4、诱导愈伤组织 5、再生新植株出现,1、组织培养 2、悬浮细胞养 3、原生质体培养 4、单倍体培

7、养,练习:,1、为何已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能?,离体、提供营养物质、激素及其它适宜条件。,体内的细胞在特定的时间和空间条件下,基因选择性表达的结果。,生物体的每一个细胞都含本物种的全套遗传物质,都有发育成完整个体的全套基因。,2、体内的细胞为什么没有表现出全能性,而是分化成不同的组织器官?,3、表现全能性的条件有哪些?,反馈练习,1.下列属于组织培养的是:( ) A.花粉培养成单倍体植株 B.芽发育成枝条 C.根尖分生区发育成成熟区 D.未受精的卵发育成植株,A,2.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需要的( ) A.消毒灭菌 B.适宜的温

8、度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素,C,3.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,不需要( ) A.具有完整细胞核的细胞 B.离体状态 C.导入外源基因 D.一定的营养物质和激素,C,4、有关全能性的表述中,不正确的是( ) 受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完 整个体,因此全能性最高 生物体内细胞由于分化全能性不能表达 卵细胞和受精卵一样,细胞未分化,全能 性很高 植物细胞离体培养在一定条件下能表现出 全能性,C,5.下列植物细胞全能性最高的是( )A.形成层细胞 B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞 6下列细胞全能性最高的是( )A植物的卵细胞B植物的精子细胞C被子植物的受精卵

9、D被子植物的的叶肉细胞,A,C,7.自然界中有一种含有叶绿体的原生动物眼虫,说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活,请探讨:动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?如果理论上可行,请设计出具体实验方案。,本课结束,原生质体培养成功后,植物细胞工程得以发展。这是在原生质体培养的基础上,由原生质体融合和基因工程技术结合的研究领域。 植物细胞工程的概念和操作过程是:培养植物细胞,借助基因工程方法,将外源DNA导入受体细胞中,或通过细胞融合、显微注射将不同的遗传重组,再通过对这些转基因细胞或重组细胞进行培养,获得具有特定性状的新植物。,反馈练习,1.下列属于组织培养的是:( ) A.花粉培养成单倍体植株 B.芽发育成枝条 C.根尖分生区发育成成熟区 D.未受精的卵发育成植株,A,下图是植物组织培养的简略表示。据此回答: (1)表示 ,它能被培养成为的 根本原因是。 (2)表示,它与相比分化程度,全能性。 (3)若想制作人工种子,应该选

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