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文档简介
1、血液病的流式细胞术分析,华西医院临检血液室 蒋能刚,流式细胞术在血液病中的应用: 急性白血病免疫分型 淋巴细胞增殖性疾病免疫分型 骨髓增生异常综合征辅助诊断 微小残留白血病 ZAP70、P糖蛋白等预后指标检测 PNH(CD55、CD59) 细胞周期分析 CD34+细胞绝对计数,标本种类,外周血 骨髓 胸腹水 脑脊液 淋巴结细针穿刺液 活检组织,标本要求,室温或24 72h内 骨髓:急性白血病,MDS,MM 外周血:CD55、CD59,LGL,标本前处理,离心收集细胞(胸腹水、脑脊液)或制备细胞 悬液(活检组织) 了解标本中细胞组成(瑞氏染色、台盼蓝染色,细胞浓度调整,一般处理步骤 胞膜抗原:标
2、记-溶血-洗涤 胞浆抗原:标记-溶血-固定/破膜-标记-洗涤 免疫球蛋白:溶血-洗涤-标记-洗涤,设门方案 SSC/FSC CD45 CD19、 CD20 CD3、CD5,光散射特征与细胞形态的关系,正常骨髓,淋巴,单核,粒细胞,CD45,SSC,原始,嗜碱,嗜酸,Blast windows,抗体设置,髓系 一般标志:CD13、CD33、CD117、MPO 其他标记:CD14、CD64、CD4 CD71、Gly A CD61、CD41 CD36 其他非髓系标记:CD2、CD5、CD7、CD56、CD19,骨髓增生异常综合症(MDS,主要表现为粒系及单核系抗原表达异常 正确的结果解释有赖于良好的
3、质量控制和标本细胞活性,B淋巴细胞,确定克隆性 阶段性B细胞标记物:CD5、CD10、CD20、CD22、CD23、FMC7 其他标记物:CD11c、CD25、CD103、CD38,T/NK细胞,抗原表达缺失和强度变化 T淋巴细胞:CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8 NK细胞:CD16、CD56,benign,Malignant,结果分析,分析的重点在于确定每一个细胞标记的存在与否以及表达的强弱(模式识别)。 每个抗体在阳性细胞上的表达百分率并不重要。 以残存正常细胞(如正常成熟淋巴细胞)作为分析参照物。 结合细胞形态可事半功倍,AML-M1,AML-M2,AML-M3,AML-M4/M5,AML-M6,非造血细胞,非特异性染色(死亡细胞,ALL,血小板附着于原始粒细胞所致CD61阳性拖尾,巨核细胞白血病,微小残留白血病: 灵敏度为1/10001/1
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