苏教版选修3第1章第1节基因工程的概述学案

1、第一节基因工程的概述课前预习导学KEQ1AN Y VXIDAOX UE敏詮学航：学习目标重难点1. 概述基因工程的概念、含义及其诞 生历程。2. 说出DNA重组技术的基本工具及 其作用特点。3简述基因工程基本操作程序。重点：1. 能分析出DNA重组技术所需要的三种工具的作 用。2. 能理解限制酶的作用特点以及与解旋酶的区别。 难点：能分析出基因工程的载体所具备的条件。働钞导引：、基因工程的诞生和发展1 基因工程的理论基础(1) 艾弗里证明了 DNA是;沃森和克里克阐明了 DNA分子的;尼伦贝格等破译了 。(2) 限制性酶和酶等工具酶、质粒等载体和 酶的发现，直接促使了基因工程的诞生。(3) 基

2、因工程的诞生和发展经历了三个时期：19731976年为, 19771981年为, 1982 年以后为 。_1973年，美国科学家 等将两种不同来源的 DNA分子进行体外重组，并首次实现了重组 DNA分子在大肠杆菌中的表达，创立了 的新技术一一基因工程。2. 基因工程基因工程是指在体外通过人工“ ”和“”等方法，对生物的基因进行和,然后导入受体细胞并使重组基因在受体细胞中 ,产生人类需要 的的技术。因而，基因工程又称为 。基因工程是在基因水平上操作、改变生物的的技术。预习交流根据基因工程的概念分析，基因工程的操作对象、操作环境、操作水平和基本方法分别 是什么？二、基因工程的工具-1. 限制性核酸

3、内切酶 科学家们陆续发现了特定的酶与载体-分子手术刀 限制性核酸内切酶。每种限制性核酸内切酶只能识别大部分限制性核酸内切酶在切开 定核苷酸组成的单链，这种单链称为“少部分限制性核酸内切酶在切开2. DNA连接酶一一分子针线 DNA连接酶可将用同一“连接起来。，并在特定的位点上切割 DNA分子。 DNA双链时，切口处的两个末端都带有伸出的由若干特。切割形成的“DNA双链时产生“3. 载体一一将外源基因导入受体细胞的运载工具常用的载体有 、等。其中 是最早应用的载体。它是细菌细胞中的一种很小的 状DNA分子。预习交流1. 限制性核酸内切酶主要分布在哪里？其本质是什么？2. 载体有什么作用？三、基因

4、工程的一般过程和技术基因工程是现代生物技术的核心，其基本过程包括五大步骤。1 .获得。2. 制备。3. 转化。4 筛选出获得目的基因的 。5.培养受体细胞并诱导 的表达等方面。一预习交流获取目的基因的方法有哪些？答案：一、1. （1）遗传物质 双螺旋结构 遗传密码 （2）核酸内切 DNA连接 逆转录 （3）开始期发展期迅猛发展和实际应用期科恩定向改造生物2. 剪切拼接改造重新组合表达基因产物重组DNA技术遗传性状一一 预习交流：答案：基因工程的操作对象是 DNA分子，也就是基因； 操作环境是在生物体外； 操作水 平是分子水平；操作基本方法是采用剪切一拼接一导入一表达的基本思路获得相应的基因产

5、物。二、1.多种多样的 核苷酸序列 黏性末端平口末端2. 限制性核酸内切酶黏性末端 平口末端-3. 质粒噬菌体动植物病毒 质粒环预习交流：1. 答案：限制性核酶内切酶主要分布在原核生物体内。它的本质是蛋白质，它也具有 高效性、专一性、温和性等酶的基本特点。2. 答案：作为运载工具将目的基因转移到宿主细胞中去，并利用它在宿主细胞内对目 的基因进行大量复制。三、1.目的基因2. 重组DNA分子3. 受体细胞4. 受体细胞5. 目的基因预习交流：答案：（1）从基因文库（如基因组文库和cDNA文库）中获取目的基因。（2）利用PCR（聚合酶链式反应）技术扩增目的基因。（3） 此外，如果基因片段比较小，核

6、苷酸序列又已知，也可以利用DNA合成仪用化学方法直接人工合成。课堂合作探究mTTTmTmm-mTTmTTmTmTTTmTmTnmTmTmmTmKETANGIiEZUGTANJUJv * * C- H4 V * * * 4 !一、限制性核酸内切酶一一“分子手术刀”*牯动与探究+ IEcoR I GAAlTTC 一 G AATTC（在G 与 A CTT；AAG CT TA AG之间切割）：*黏性末端中庙线Sma ICCCiGGGCCCGGG（在C与G GGGiCCCGGGCCC之间切割+平口末端中轴线切割DNA分子时产生的两种不同末端（箭头表示酶的切割位置）1 根据上图分析这两种限制性核酸内切酶识

7、别的核苷酸序列和切割的位点分别是什 么？2限制性核酸内切酶和解旋酶有什么区别？2廷殍理用下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是（）。A种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列B. 限制性核酸内切酶的活性易受温度影响C. 限制性核酸内切酶能识别和切割 RNAD. 限制性核酸内切酶可从原核生物中提取（师点津1. 获取目的基因和切割目的基因使用同一种限制酶。2. 限制酶的切割位点的选择必须保证标记基因的完整性，以便于检测。3. 识别的序列的特点：呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如图，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。如:C

8、CAGGA以两侧碱基互补对称。GGTCC TGC GC以中心线为轴，两侧碱基互补对称;CG CG二、DNA连接酶一一“分子针线”电活动与探究DNA连接酶的作用是什么？它与 DNA聚合酶的区别是什么?出吐移魁用)-A-T-A-T-Ctt（多选）利用DNA连接酶可连接下列哪两个黏性末端？（J- A-A -A-A-T-T-CttC.D. 项目 种类作用底物作用部位作用结果n A连接酶DMA分子片段瞬酸二酯键形成重组DNA分子限制性核 酸内切酶DXA分子礎醱二酯键形成黏性末端或乎 末端nA聚合酶脱氧核昔酸磷酸二酯键形成新的I）NA分子A.B.（师点津（1）几种酶一的比较。(2) DNA连接酶与限制性核

9、酸内切酶的关系。-I I I I 1 I-XUSS -1-I I I I 1 -GAATTC 酸内切酶G* AATTCCTTAAG 、DNA建接酶 C TTAAGI I I 1 1 11 I I_三、载体一一“运输工具”活动与探抚1 作为载体必须具备哪些条件？2 画图说明目的基因与载体结合的过程。下列有关质粒的描述，错误的是()。A. 质粒中含有四种核糖核苷酸B. 质粒呈环状C. 质粒上含有一些抗生素的抗性基因D. 质粒可以自我复制师点律(1) 载体具备的条件。 对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命活动。 具标记基因，能对重组 DNA是否进入受体细胞进行鉴定。 能自我复制，通过复制进行基因

10、扩增。 具有多个酶切位点， 供外源基因插入其中， 而且每种酶切位点最好只有一个，避免酶切后环状DNA打开，丢失某些片段。(2) 最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核 DNA之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。(3) 其他载体：入噬菌体的衍生物、动植物病毒等。答案：问题导学活动与探究一：1. 答案：EcoRI识别的序列为 GAATTC切割的位点在 G与A之间。Smat识别的序列为 CCCGGG切割的位点在C与G之间。2. 答案：限制性核酸内切酶主要作用于两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而解旋酶主要作用于碱基对之间的氢键 (如图所示)o a处为限制性核酸内切酶作用位

11、点，b处则为解旋酶作用位点。迁移与应用：C解析：解答本题的关键，一是牢记限制性核酸内切酶的概念；二是认识DNA与 RNA在结构上的根本区别。限制性核酸内切酶来源于原核生物； 限制性核酸内切酶能识别双链 DNA分子中某种特定 的核苷酸序列，并将每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开；限制性核酸内切酶是一种蛋白质，其活性易受温度、pH等外界条件的影响。活动与探究二：答案：(1) DNA连接酶将限制酶切割所产生的DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。它与限制酶作用的位点相同。(2) DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来，而 DNA聚合酶是将许多单个的脱氧

12、核苷酸连接成脱氧核苷酸长链。迁移与应用：CD解析：能把DNA这把“梯子”扶手断口处连接起来的酶是DNA连接酶。DNA连接酶可连接用同一种限制性核酸内切酶处理得到的黏性末端或平口末端，用同一种限制性核酸内切酶处理得到的黏性末端其单链部分碱基可互补配对。活动与探究三：1. 答案：（1）载体的作用：作为运载工具将目的基因转移到宿主细胞中去，并利用它 在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。（2）载体必须具备以下条件：具有自我复制能力以便在宿主细胞中稳定保存并大量复制；具有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中；具有特殊的标记基因，如四环素抗性基因、 择。载体（质粒）I一个切口，两个黏

13、性末端氨苄青霉素抗性基因等标记基因,會口的基因的DNA分子两个切口，获得口的棊因供重组DNA勺鉴定和选2.答案：重组质粒（重组DNA分子）迁移与应用：A解析：牢记质粒的本质与结构。质粒是一种具有自我复制能力的双链环状DNA分子。质粒上有一些特殊的基因，如抗四环素基因、抗氨苄青霉素基因，用于对重组DNA进行鉴定和选择。1 如下图，两个核酸片段在适宜条件下，经X酶的催化作用，发生下述变化，则X酶是（ ）。ACGAATTCGTI|II |TGCTTAAGCA样酶ACGAATTCGTIiiiiiiiiiiiiiiiiiirTG-C TTAAGCAA. DNA连接酶 B . RNA聚合酶C. DNA聚合

14、酶 D .限制性核酸内切酶2. 下列获取目的基因的方法中需要模板链的是（）。从基因组文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因反转录法 通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A.3.A.C.4. B .C.下列有关基因工程的叙述，正确的是（ 基因工程是细胞水平上的生物工程 基因工程产生的变异属于人工诱变下图所示的四个 DNA分子中，彼此间具有黏性末端的一组是（D .）。B. 基因工程的产物对人类都是有益的D.基因工程育种的优点之一是目的性强）。 A.B.C.D.5.（多选）下列关于限制性核酸内切酶的说法，错误的是（）。A. 限制性核酸内切酶被称为“分子手术刀”B. 限制性核酸内切酶跟其他的酶一样，具有专一性C. 一种限制性核酸内切酶可切割多种DNA分子片段D. 限制性核酸内切酶能在特定部位的两个核苷酸碱基之间切断氢键答案：1. A 解析：DNA连接酶的作用是将两个用同一种限制性核酸内切酶切割得到的黏性末 端连接起来。2. D解析：PCR利用的是DNA双链复制原理，即将双链 DNA之间的氢键打开，变成单 链DNA作为聚合反应的模板。反转录法是以目的基因转录成的信使RNA为模板，在逆转录 酶的作用下，先反转录形成互补的单链 DNA再合成双链 DNA则不需要模板。3. D解析：基因