小学期药分实验论文-复方阿司匹林片APC鉴别、杂检、含量测定

1、小学期药分实验论文复方阿司匹林片APC鉴别、杂检、含量测定 指导老师：李迎春 实验室老师：李晓娟 姓名：刘倩倩 组员： 郑泽宇 陈嘉媛 隆建翔 班级：12级临床药学 电话： 邮箱： 地址：药学院 日期：2015/9/10复方阿司匹林片APC鉴别、杂检、含量测定摘要：目的 用药物分析学方法评价复方乙酰水杨酸片的质量。方法： 1、阿司匹林的鉴别：与三氯化铁反应，阿司匹林的水解反应，薄层色谱法。 2、复方片剂的杂质检查:检查片剂中游离水杨酸，检查片重差异。 3、复方片剂中各组分的含量测定：容量滴定法，高效液相法，紫外分光光度法结果： 鉴别实验方法专属性强，确定复方阿司匹林片中有阿司匹林成

2、分。杂质检查实验发现游离水杨酸含量超过杂质限量；片重差异小于5%。容量分析法测得复方阿司匹林片中阿司匹林含量为标示量的95.95%，非那西丁含量为标示量的79.33%，咖啡因的含量为标示量的76.34% 。紫外分光光度法测得每片含量为0.2044g准确度93.52% HPLC法测得阿司匹林含量0.2031g，准确度92.41%。结论：所检测的复方乙酰水杨酸片不合格。关键词：复方乙酰水杨酸片，紫外分光光度，高校液相色谱，含量测定。Abstract Objective：Evaluate the quality of compoundaspirin tablets by pharmaceutical

3、 analysis method. Methods： 1、Distinguish of aspirin: Reaction with ferric chloride，hydrolysis reaction of aspirin and TLC. 2、Impurity test of compound tablets: check the free salicylic acid in tablets ,check the variation of tablet weight. 3、Determination of components in compound tablets：Volumetric

4、 titration 、ultraviolet spectrophotometry and HPLC. Results: The specificity of distinguish experiment is good to determine aspirin composition was existed in Compound A.P.C. The result of impurity test experiment shows that the amount of free salicylic acid is beyond the impurity limit; the variati

5、on of tablet weight is less than 5%. The content that test by volumetric analysis of aspirin, phenacetin, caffeine in Compound Aspirin tablets is 95.95%, 79.33% , 76.34% in each labeled amount. Accuracy rating is 93.52%. The content of aspirin in compound tablets is 0.2031g that test by HPLC , which

6、 accuracy rating is 92.41%. Conclusion：The Compound Aspirin Tablets were test is unqualified.Key words：compound Aspirin Tablets,Uv-vis spectrophotometry,High Performance Liquid Chromatography,Assaying. 复方阿司匹林片剂:复方阿司匹林片剂（APC）具有解热镇痛、消炎和抗风湿作用，其三个有效成分分别是A阿司匹林(乙酰水杨酸)、P非那西汀（乙酰对氨苯乙醚）和C咖啡因(1,3,7三甲基黄嘌呤），阿司匹林

7、在空气中不稳定容易变成水杨酸，含量下降，本实验主要通过鉴别，杂质检查是否合格，含量测定让我们学会如何设计实验方法，熟悉各种操作，学会使用液相色谱。1.实验材料1.1仪器：超声：KQ-500DE型数控超声波清洗器昆山市超声仪有限公司；砂芯过漏装置；抽漏器:郑州长城科商贸公司；GF254薄层板；水浴锅：XNT-DA数显调节仪 余姚市亚星仪表有限公司；精细点样毛细管：华西医科大学仪器厂；电热套：KDM型调温电热套 山东省正兴仪器厂1.2药品：阿司匹林对照品:山东新华制药有限公司 批号:；水杨酸对照品：天津市光复科技发展公司 M=138.12 含量:99.5%；三氯化铁：天津光复科技发展公司 M=27

8、0.29 含量：99.0%；溴化钾：天津光复科技发展公司 M=119 含量：99.0%；冰醋酸:天津市光复科技发展公司 M=60.05 含量:99.5%；磷酸：天津市光复科技发展公司 M=98 含量：85.0%；盐酸：北京化工厂 M=98 分析纯；无水碳酸钠：上海虹光化工厂 M=105.9 含量：99.8%；硫酸：北京化工厂 M=98.08分析纯；无水乙醇：天津富宇精细化工有限公司 M=46.07 含量：95%2.实验方法2.1鉴别试验 2.1.1 阿司匹林片的鉴别与三氯化铁反应取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0.1g）加水10ml 煮沸，放冷加三氯化铁试液一滴，即显紫堇色。2.1.2 水解

9、反应取本品的细粉适量（约相当与阿司匹林0.5g），加碳酸钠试液10ml，煮沸2分钟后，放冷加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气。2.1.3 薄层色谱法单一对照品溶液的制备：分别称取乙酰水杨酸对照品适量，加氯仿制成含一定浓度（C=1/10药品标示量/1ml）的单一对照品溶液。 取供试药品溶液的制备：取供试药品细粉适量配成C=1/10药品标示量/1ml 的供试品溶液。取单一对照品溶液适量，供试药品溶液适量，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯-氯仿-冰醋酸(5：3：2)为展开剂。展距为8cm，展开后取出晾干，置紫外光灯(254nm)下观察。样品溶液所显的三个斑点的位置和颜色分

10、别与相应的对照品溶液所显的斑点一致。2.2 杂质检查2.2.1 溶液游离水杨酸: 取本品0.10g,加乙醇1mL 溶解后，加冷水适量使成50mL,立即加新制的稀硫酸铁铵溶液取盐酸溶液(9100)1mL,加硫酸铁铵指示液2mL后,再加水适量使成100mL1mL,摇匀;30秒钟内如显色,与对照液(精密称取水杨酸0.01g,加水溶解后,加冰醋酸0.1mL,摇匀,再加水使成100mL,摇匀,精密量取1mL，加乙醇1mL、水48mL与上述新制的稀硫酸铁铵溶液1mL ，摇匀)比较,不得更深（0.1%）2.2.2 重量差异检验：取供试品20片,精密称定总重量,求得平均片重后,再分别精密称定每片的重量,每片重

11、量与平均片重比较重量差异限度(%).2.3 容量滴定法测定复方乙酰水杨酸片中A、P、C的含量2.3.1 乙酰水杨酸的含量测定 精密称取上述细粉适量(约相当于乙酰水杨酸0.4g），“置分液漏斗中，加水15ml，摇匀，用氯仿振摇提取次3次(20，10，10ml)，提取氯仿液用同一份水10ml洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇(对酚酞指示液显中性)20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.l mol/l儿氢氧化钠液滴定，即得(每1ml 0.1mol/l氢氧化钠液相当子18.02mg的C9H8O4)。 按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数g/片=（T*V*f/W称样量）*平均片重2.3.2非那

12、西丁的含量测定精密称取上述细粉适量(约相当于非那西丁0.3g，置锥形瓶中，加稀硫酸25ml，缓缓加热回流40分钟，放冷至室温，将析出的水杨酸滤过，滤渣与锥形瓶用盐酸液（1-2）40ml，分数次洗涤，每次5ml，合并滤液与洗液，加溴化钾3g溶解后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，在室温用0.l mol/L亚硝酸钠液迅速滴定，随滴随搅拌至近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量的水将尖端洗涤，洗液并入溶液中继续缓缓滴定，至用细玻棒蘸取溶液少许，划过涂有碘化钾淀粉指示液的白瓷板上，即显蓝色的条痕，停止滴定，30s后再蘸取少许，划过一次，如仍显蓝色的条痕，即达终点、即得(每lml的0.lmol/L亚

13、硝酸钠液相当于17.92mg的C10H13NO2)。按下式计算每片含非那西丁的克数 g/片=(TVf/W称样量)X平均片重2.3.3 咖啡因的含量测定精密称取上述细粉适量(约相当干咖啡因50mg)，加稀硫酸5ml，振摇数分钟使咖啡因溶解，滤过，滤液置50ml容量瓶中，滤器与滤渣洗涤三次，毎次5ml，合并滤液与洗液，精密加0.lmo1/L碘液25ml，用水稀释至刻度，摇匀，在约25避光放置15分钟，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液25ml置碘量瓶中，用0.1mol/硫代硫酸钠滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白实验校正，即得 (每1ml的0.05mol/L

14、碘液相当于2.653mg的C8H10N4O2.H2O)。按下式计算每片含咖啡因的克数 mg/片=2(TV碘液f/W称样量)X平均片重2.4 HPLC法测定复方阿司匹林片中阿司匹林的含量2.4.1 配制对照品溶液梯度组：精取1.0036g阿司匹林对照品，加入10ml甲醇溶解，后用蒸馏水定容200ml容量瓶为1号，取10ml水稀释200ml为2号，取5ml2号水稀释10ml为3号，浓度为0.125mg/ml即12.5mg/100ml母液，分别精密量取10、20、30、40、50ml置100ml的容量瓶中并稀释至刻度摇均浓度分别为12.5、25、37.5、50、62.5ug/ml滤膜滤过取20ul注

15、入液相色谱仪记录色谱图，色谱面积和浓度c进行线性回归。2.4.2 复方阿司匹林样品组:精密称取APC 0.2614g于干净的烧杯，加入10ml无水甲醇溶解，滤过残渣后用蒸馏水定容与250ml容量瓶，超声溶解10min,再用水定容于刻度，用滤膜过滤后，取续滤液进液相。2.5 紫外吸光光谱法测定APC片剂中乙酰水杨酸的含量2.5.1 对照样品标准曲线 称取0.050g水杨酸溶于少量的0.1mol/ml NaOH溶液中，然后蒸馏水定容于100ml容量瓶中，将六个50ml容量瓶按0-5依次编号，分别移去0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml于相应编号容器里，各加入1.0ml 0

16、.10mol/l NaOH溶液，先用蒸馏水稀释30ml左右，80水浴加热10min,冷却至室温，稀释至刻度，摇匀。2.5.2 样品复方阿司匹林APC 取一片在洁净烧杯中，加入2.0ml 0.10 mol/lNaOH先胀溶，再搅拌过滤，用20ml NaOH淋洗两次,40ml 蒸馏水淋洗两次，倒入250ml容量瓶并用水定容。从250ml容量瓶吸取2ml稀释成100ml记成1组；从250ml容量瓶吸取2.5ml稀释成50ml,记成2组80水浴加热10min.冷却室温摇匀,分别测吸光度，每份三次。2.5.3 加样回收率实验 称取复方阿司匹林APC溶解，加入配置成相当于样品测定浓度下的阿司匹林的80%、

17、100%、120%的阿司匹林对照品于100ml容量瓶，稀释50倍，记成1、2、3组，按相同的紫外条件，测定吸光度计算阿司匹林回收率。3. 结果与分析3.1 鉴别实验3.1.1阿司匹林片的鉴别与三氯化铁反应操作：药物质量称取：10片复方APC重4.8495g，平均片重0.48495g。阿司匹林理论称取量0.48495g，实际称取0.4851g蒸馏水溶解，置电热套加热水解，放冷，加入新配的三氯化铁试液结果：溶液显紫堇色，得出复方中含阿司匹林。3.1.2 水解反应操作：理论称取1.102g 实际称取1.1084g，样品加新配碳酸钠试液（1.5g加到100ml蒸馏水中）10ml，煮沸2min，加入稀硫

18、酸。析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气。结果：析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气，含阿司匹林。3.1.3 薄层色谱法水杨酸对照品对照品溶液供试药品供试品溶液0.2205g22.05mg/ml0.4937g49.37mg/ml结果：样品溶液所显的斑点的位置和颜色与相应的对照品溶液所显的斑点一致，存在阿司匹林成分，且含量大致合格。3.2 杂质检查3.2.1 溶液游离水杨酸操作：称取复方阿司匹林0.0990g，50ml定容。称取水杨酸0.0102g，定容100ml,取1ml稀释50ml。杂志限量（%）=0.0102/（100*50）/(0.0990/50)100%=0.1%结果：样品组深于对照组，证明实验中

19、有误差或样品有过期现象或其它质量问题。3.2.3 重量差异检验平均片重和标示片重重量差异限度/%0.3g以下7.50.3g及0.3g以上5称量20片总重9.6278g ，每片重 XS=0.4814g0.0049；重量差异XS=0.00%0.3.3 容量滴定法测定复方乙酰水杨酸片中A、P、C的含量3.3.1 乙酰水杨酸的含量测定APC含量（g）消耗NaOH的量（ml）测量阿司匹林（g)0.887120.90.20590.884423.50.23220.881519.70.1953平均消耗NaOH的量（ml）V=21.367ml ；每片阿司匹林平均含量（g)=(21.36718.02)0.8843

20、0.4851000=0.2111g;占标示量百分比=0.2111/0.220*100%=95.95%。RSD=9.00%，提取完全，操作过程满意。3.3.2 非那西丁的含量测定APC含量（g）消耗NaNO2的量（ml）测得非那西丁（g)0.961612.960.23400.969813.210.23860.964613.370.2414平均消耗NaNO2的量（ml）V=13.18ml ,每片含量（g）=0.119g0.0019,为标示量的0.119/0.15*100%=79.33% RSD=1.57%.分析：回流洗涤提取不完全，药物部分分解，导致测得非那西定含量偏低。3.3.3 咖啡因的含量测

21、定APC含量（g）加碘量（ml）消耗Na2S2O量（ml）计算咖啡因（mg）0.6906256.840.990.69544013.235.340.6920257.139.790(空白)2517.8RSD=10.32%每片含量（mg)=38.1650.69270.485=26.72mg为标示量的26.72/35*100%=76.34% 分析：用空白实验排除碘液变质的影响，而NaS2O3具有还原性易被空气氧化，导致滴定剩余量过多，和咖啡因结合的量少，使结果偏小；操作滴定没有保证迅速完成，组间有差异；药品部分分解。3.4 法测定复方阿司匹林片中阿司匹林的含量3.4.1 配制对照品溶液梯度组对照品浓度

22、（ug/ml)峰面积112.54510622552520337.54505 复方阿司匹林样品组浓度（ug/ml)峰面积428.3平均值=437.97421.7SD=22.70463.9RSD=0.0518测出复方APC阿司匹林的含量（g)=437.97ug/ml250ml=0.1095g；称取复方APC阿司匹林的含量（g）=0.26140.4850.22=0.1186g；准确度%=0.1095/0.1185*100%=92.41%；测得每片复方APC阿司匹林含量0.2031g。3.5紫外吸光光谱法测定APC片剂中乙酰水杨酸的含量3.5.1 对照样品标准曲线组号浓度（g/ml)

23、吸光度平均值0001100.1562200.2863300.5214400.6795500.8783.5.2样品含量应用上标准曲线y=0.0177x-0.0224复方阿司匹林(g)复方阿司匹林(ug/ml)吸光度A均值阿司匹林含量（ug/ml)0.48538.80.26716.3597(无效）0.70641.15每片含量（g)=16.35*50*250/=0.2044g准确度16.35（85)=92.90% 该紫外条件和液体浓度可以很有效准确测得复方APC阿司匹林的含量。3.5.3 回收率计算复方阿司匹林（g）阿司匹林对照品（g）阿司匹林测M(g）回收率（%）0.1232

24、0.04480.097893.53%平均值=123.22%0.12330.05610.1219117.65%SD=0.32830.12370.06720.1626158.48%RSD=0.2664平均回收率稍微大与100%，操作存在误差方法大致正确，需要加强仪器使用规范液体稀释精确；可方法准确度可以被认可。4. 结论:所检测的复方乙酰水杨酸片杂质超标、含量降低，与规格比较视不合格。5. 分析讨论：鉴别试验显色反应比较快速定性判定，操作简单现象明显，TLC薄层色板因为没有非那西定和咖啡因的对照品，所以只做出来阿司匹林的斑点，大小跑板长度都很理想；杂质检查复方阿司匹林的时候，有意义的就是游离水杨酸的检查，用比色法在杂质限量0.1%的情况下，发现样品显红色深于对照比色管，含量超标；含量测定：容量分析法是最熟悉的方法，可是细节上很考验我们的操作，每个实验从头到尾三组平行，氧化还原性质的样品需要即使避光处理，在咖啡因含量测定时，按照给定的碘液和硫代硫酸钠浓度计算，含量是标示量的四五倍，我们做了空白实验，有效的避开碘液变质浓度降低；高校液相存在很大的问题，因为考虑到称量量的准确度所以采用了高浓度稀释的方法，考虑到甲醇液体的有害性，我们只采用部分甲醇溶解，蒸馏水定容的操作，数据出来发现线性相关性差，几乎没有 被利用的意义