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文档简介
1、植物器官培养,植物花器官培养,花器官培养是指整个花器及其组成部分(如花托、花瓣、花丝、花柄、子房、花茎和花药等)的无菌培养,背景:花期培养技术是由Nitsch(1949)建立的,花器官培养,定义,过程,取材,从健壮植株上摘取未开放的花蕾(已开花的不宜用于培养,因为消毒和培养都较困难),先用70%酒精消毒20s,再用饱和漂白粉溶液浸10到20min,或用0.1%升汞消毒4到6min,再用无菌水冲洗3到5次,接种培养,用整个花蕾培养时,只要把花梗插入固体培养基中。若用花器的某个部分,则分别取下,切成0.3cm0.5cm左右的小片,接种到培养基中,放到培养室内培养。几周之后便可以得到完整的植株了,培
2、养基:供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等,一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基;固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基,1)基本培养基,MS、N6、B5等,2)激素,愈伤组织诱导:基本培养基+2,4-D,分化培养基:基本培养基+6-BA +IAA,生根培养基:生长素,培养基的选择及植物激素对花器官培养的影响,培养实例,材料的选择与消毒,1,选材 母株上取下还未开放的花蕾(以小的为好) 2,冲洗 在清水中冲洗,把萼片与花柄上的表皮毛轻轻擦去,再用流水冲洗几次后,再用蒸馏水冲洗 3
3、,消毒 在无菌超净工作台上,用70%酒精表面消毒半分钟,再在饱和漂白粉溶液中消毒20min左右,取出用无菌水清洗34次,接种培养及植物再生,1,用镊子把花蕾上的萼片与花瓣、雌蕊、雄蕊去掉,2,并切下花托接种于MS+6-BA1mg/L+NAA0.22mg/L的培养基上, 3,然后培养在温度为26左右光照强度为1500lx,光照时间为10h的培养室内, 约两个星期后即可形成少量愈伤组织,约一个月后便分化出绿色芽点,并抽茎 展叶长大成苗,2,1,NO,2,1,YES,选择生长末期或已进入休眠期的组织 ,则外植体对诱导反应迟钝或无反应,材料越小存活率越低,大多数植物应在生长开始的季节采样,选择生理年龄小的器官,注意事项,克服后代分离,缩短育
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