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1、茶树菇多糖脱蛋白方法研究 茶树菇多糖脱蛋白方法研究是小柯论文网通过网络搜集,并由本站工作人员整理后发布的,茶树菇多糖脱蛋白方法研究是篇质量较高的学术论文,供本站访问者学习和学术交流参考之用,不可用于其他商业目的,茶树菇多糖脱蛋白方法研究的论文版权归原作者所有,因网络整理,有些文章作者不详,敬请谅解,如需转摘,请注明出处小柯论文网,如果此论文无法满足您的论文要求,您可以申请本站帮您代写论文,以下是正文。 摘要 将传统的多糖提取方法、胰蛋白酶的“酶解-透析”作用及活性炭处理相结合去除茶树菇多糖提取液中的蛋白质。结果表明:蛋白质去除较完全,多糖的损失率较少,同时还可去除色素、果胶和核酸等杂质。关键词

2、 茶树菇多糖;脱蛋白;方法中图分类号 s646 文献标识码a文章编号1007-5739(2008)20-0014-01茶树菇是担子菌纲伞菌目类绣伞科的真菌微生物,是一种被人们称为“菇中珍品”的食用菌,它含有多种微量元素和人体所需要的17种氨基酸,营养价值和药用价值比其他食用菌高出数倍以上。茶树菇多糖的药理作用很广泛,主要表现为可提高机体免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、抑制流感病毒、抗感染以及对化学物质所致肝损伤有保护作用等。有关茶树菇多糖分离纯化的报道并不多见。在分离阶段大多都采用多次有机试剂沉淀法来去除其中的蛋白质,但是这种方法存在一次性除蛋白质效率低、多糖损失率高、有机相不易分离、污染较大等缺点

3、。笔者通过试验,获得一种去除茶树菇多糖中蛋白质的新方法,其一次除蛋白质效率高,操作简单,废液易回收。1 材料与方法1.1材料与试剂茶树菇干品,购于辽宁省沈阳市超市;胰蛋白酶(北京奥博星生物技术责任有限公司产品);95%乙醇、无水乙醇、丙酮、氯仿、正丁醇、活性炭均为分析纯。1.2试验仪器721-a可见分光光度仪;国华-数显恒温水浴锅;lgr10-4.2高速冷冻离心机;lgj-10冷冻干燥机;phs-25 ph计;nicolet evolution300紫外-可见分光光度仪。1.3工艺流程茶树菇干品粉末(过60目)热水浸提离心取上清液脱除蛋白95%乙醇沉淀丙酮、无水乙醇冲洗回收多糖冷冻干燥茶树菇粗

4、多糖。1.4茶树菇提取液脱蛋白茶树菇提取液先用sevage试剂(氯仿正丁醇为41)除蛋白1次,离心透析48h,按一定比例加入胰蛋白酶溶液进行酶解,2h后透析,最后用活性炭处理,离心得到脱蛋白液。1.5分析方法牛血清蛋白测定蛋白含量;紫外吸收法定性分析。2结果与分析2.1茶树菇多糖提取液脱蛋白效果由表1可知,通过常用的脱蛋白方法,即反复多次使用“sevage试剂透析”除蛋白,蛋白质去除率较高,但多糖损失率也较高,且该方法大量使用有机试剂,有机相与多糖不易分离,需要透析时间较长,污染较大。而使用本试验创新的脱蛋白方法,sevage试剂一次除蛋白效率达到88%以上,残留的蛋白质主要为以糖肽键结合的糖

5、蛋白复合物,经过酶解处理,部分糖肽键断开,脱落的蛋白质再被分解为小分子物质,经过透析去除。剩余结合紧密的糖蛋白复合物经过活性炭处理后被去除干净。检测提取液蛋白质去除较完全,多糖损失率较低。由此说明,该方法能快速、有效地去除茶树菇多糖中的蛋白质。2.2紫外吸收光谱经过sevage试剂、胰蛋白酶的“酶解-透析”作用及活性炭处理的茶树菇多糖溶液在190300nm下进行紫外扫描,观察其紫外吸收如图1所示。由图1可知,经过处理后的多糖溶液样品,在波长260 nm和280nm处无吸收峰,说明样品中的核酸和蛋白质基本去除干净。200nm附近的强吸收峰与之前紫外扫描的未脱除蛋白的茶树菇多糖样品的强吸收峰一致,

6、是茶树菇多糖的特征吸收峰,这与文献报道一致。3结论通过试验获得一种新的茶树菇多糖提取液脱蛋白质方法,其能够快速去除茶树菇多糖中的蛋白质,具有脱蛋白效率高、操作简单、多糖损失小等特点;该法还能有效地去除茶树菇多糖中的其他杂质,如色素、核酸等大分子物质。4参考文献1 牛广财,朱丹.马齿觅多糖脱蛋白方法的研究j.食品研究与开发,2005,26(5):51-53.2 付桂明,刘成梅,涂宗财.茶树菇水溶性多糖的分离纯化和化学组成的研究j.食品科学,2005,26(9):180-184.3 徐大伦,欧昌荣,黄晓春,等.浒苔多糖脱蛋白方法的研究j.水产科学,2005,24(5):26-27.4 李志敏,王伯

7、初,周菁,等.植物多糖提取液的集中脱蛋白方法的比较分析.重庆大学学报,2004,27(8):57-59.5 欧阳小丽,张晓昱,王宏勋,等.茶薪菇菌丝体多糖提取方法的研究j.中国食用菌,2004,23(5):35-37.6 赵国华,陈宗道,李志孝,等.活性多糖的研究进展j.食品与发酵业,2001,27(7):45-48.7 倪德江,谭少波,脱蛋白工艺对茶多糖提取率及蛋白质含量的影响j.中国茶叶,2002,24(4):6-7.8 李娟,张耀庭,曾伟,等.应用考马斯亮蓝法测定总蛋白含量j.中国生物制品学杂志,2000,13(2):118-120.9 王丽华,李元瑞,陈懿,等.姬松茸多糖脱蛋白方法的研

8、究j.食品科技,2000(1):18-19.10 邢小黑,吴明忠灵芝多糖化学研究j.中国食用菌,1996,15(3):14-15.其他参考文献baker, sheridan. the practical stylist. 6th ed. new york: harper & row, 1985.flesch, rudolf. the art of plain talk. new york: harper & brothers, 1946.gowers, ernest. the complete plain words. london: penguin books, 1987.snell-hor

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