实训五饲料粗脂肪的测定

1、號肪测定仪实训五饲料粗脂肪的测定索氏脂肪巽取器，【教学目标】1. 学会各种饲料样本的粗脂肪的方法。2. 学会仪器的使用【教学重点】样本的测定方法。【教学方法】操作指导【课时分配】6学时【原理】索氏脂肪提取器中用乙醚提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有有机酸，磷脂、脂溶性Vit，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。【分析步骤】1）仲裁法使用索氏脂肪提取器测定。索氏提取器应干燥无水。抽提瓶 （内有沸石数粒）在105C 2C烘箱中烘干60min，干燥 器中冷却30min,称重。再烘干30min,同样冷却称重，两次重量之差小于 0.0008g为恒重。称取试样15g（准确至0.0002g），于

2、滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105C 2C烘箱中，烘干120min（或称测水分后的干试样，折算成风干样重），滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚60100mL在6075C的水浴（用蒸馏水）上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流 次数为每小时约10次，共回流约50次（含油高的试样约 70次）或检查抽提管流出的乙醚挥 发后不留下油迹为抽提终点。取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残 余乙醚。擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105C 2C烘箱中烘干120min，干燥器中冷却 30min称重，再烘干3

3、0min，同样冷却称重，两次重量之差小于O.OOIg为恒重。2）结果计算in 7 - mi xlOO%式中：m风干试样重量，gom 已恒重的抽提瓶重量，g om己恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，go3）推荐法鲁氏残留法操作步骤a. 将脱脂滤纸裁成10X 10cm2大小，叠成一边不封口的纸包，用铅笔编号，按顺序排列于培养皿上，置于105C土 2C烘箱中烘2h,取出放于干燥器中冷却至室温，分别放入同一称量瓶中称重（mo, g） ob. 将25g风干样品（通过40目筛）用小药匙小心装入已经称重的纸包中，封上包口。按顺序排列于培养皿中。置于105C 2C烘箱中烘3h,取出放入干燥器中冷却至室温,7080C

4、水浴锅中回分别放入原称量瓶中，称至恒重 （mi, g）。将样品包放入抽提管中，倒入无水乙醚，使之刚 超过样品包高度，浸泡过夜。然后将浸泡过样品的无水乙醚放入抽提瓶中，再重新向抽提管 中倒入无水乙醚，使之完全浸没样品包。连接装置，接通冷凝水，在 流68h，回流速度以每分钟 20mL左右为宜。抽提完毕，取出样品包，在通风处挥干乙醚.剩余乙醚可进行回收。c. 将样品包仍按原序号排列在培养皿中，置于105C 2C烘箱中烘2h,取出放入干燥器中冷却至室温，再将样品包放原称量瓶中，称至恒重（m2, g） o结果计算粗脂肪=mt m x 100%m1 rd式中，m 滤纸+称量瓶重（g）;m 提取前样品包+称

5、量瓶重（g）;m 提取后样品包+称量瓶重（g ）o上述两种方法都是以乙醚为溶剂的提取方法，其优点是具有较好的准确度和精密度，尤其是测定粗脂肪含量在 5河下的样品，用此法比较可靠。 缺点是费工费时，反复提取需8 16h；另外乙醚不能将样品中的全部脂肪提尽。这是因为部分脂肪常与蛋白质或碳水化合物 等非脂肪成分结合。成为结合态脂类，如脂蛋白、糖脂、磷酯等，同时样品也必须是烘干的，因乙醚难以渗入含水样品的组织内部。在烘干样品时，又应考虑到脂肪在高温下易被空气氧化等情况。脂肪测定仪 操作步骤a. 打开恒温加热装置开关，控制工作温度为75 C。b. 用万分之一分析天平称 2g左右的样品（准确至0.0002

6、g） （m 1），放入滤纸筒内烘干。c. 用套筒夹将6个滤纸套筒装入浸提冷凝管内，当确信套筒已被磁铁吸牢后取下套简夹。d. 用分析天平称浸提杯重量 （m2），然后加入约50mL无水乙醚，用杯托将6个浸提杯放在 加热板上，再将冷凝管提升机构搬下，使浸提怀与冷凝管连接好。e. 事先接通浸提冷凝管的冷却水，将滤纸筒置于“沸腾”位置。冷凝管应有良好的冷凝 作用；f. 无水乙醚沸腾15min或30min（依样品含油量而异）后，将滤纸筒提升到“冲洗”位置， 冲洗 30min 或 45min。g. 冲洗结束后，关闭冷凝管旋塞阀，回收乙醚。h. 松开冷凝管提升机构，取下浸提杯，并放入烘箱烘干。i. 在干燥器中冷却浸提杯，然后用分析天平称重（呛）。j. 按以下公式计算样品中粗脂肪含量。 测定结果的计算粗脂肪=V3 V2X 100%W式中：W风干试样重量，g。W已恒重的浸提杯重量，g。W己恒重的盛有脂肪的浸提杯重量，g。6.337重复性每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。粗脂肪含量在10%上 （含10%）允许相对偏差为 3%粗脂肪含量在10%下时，允许相对偏差为 5% 【实训作业及思考题】1. 测定混合饲料、配合饲料、浓缩饲料或单一饲料中粗脂肪的含量，并写出实训报告。2. 脂肪包的高度超过虹吸高度对测定结果有何影响？为什