芳胺类药物的分析-专课件

1、芳胺类药物的分析-专1 芳胺类药物的分析-专2 芳胺类药物芳胺类药物：氨基直接与苯环相连。：氨基直接与苯环相连。 如如 :对氨基苯甲酸酯类、酰胺类对氨基苯甲酸酯类、酰胺类等等 芳烃胺类药物芳烃胺类药物: 氨基在烃基侧链上。氨基在烃基侧链上。 如如:苯乙胺类苯乙胺类 分类：分类： COOR2R1NH N HCR 2 O R 1 R 3 R 4 CHCH OH NH R3 R2.HX 芳胺类药物的分析-专3 l一、对氨基苯甲酸酯类一、对氨基苯甲酸酯类 l具有对氨基苯甲酸酯的基本结构。具有对氨基苯甲酸酯的基本结构。 1结构特点结构特点： 第一节第一节 芳胺类药物的分析芳胺类药物的分析 COOR2R1

2、NH 芳胺类药物的分析-专4 l（代表药物）：（代表药物）： NH2 COOCH2CH2N(C2H5)2 .HCl NH2 COOCH2CH3 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因苯佐卡因苯佐卡因盐酸丁卡因盐酸丁卡因 芳胺类药物的分析-专5 2、化学性质、化学性质 （1） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮 化化偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量；可与含量；可与 芳醛发生缩合生成芳醛发生缩合生成SchiffSchiff碱；易氧化变色。碱；易氧化变色。 （2 2） 酯键易水解酯键易水解 （3 3）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀

3、试剂）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂 发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。 （4）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。 芳胺类药物的分析-专6 3 3、鉴别反应鉴别反应 l(1)(1)、重氮化、重氮化- -偶合反应偶合反应 l具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等，具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等， 在酸性溶液中与在酸性溶液中与NaNONaNO2 2TSTS发生重氮化反应，发生重氮化反应， 再与碱性再与碱性 - -萘酚萘酚TSTS偶合产生猩红色偶氮偶合产生猩红色偶氮 化合物。化合物。 ArNH2 HC

4、l NaNO2 重氮盐橙黄猩红色 萘酚 OH- 直接直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠 、 苯佐卡因苯佐卡因 芳胺类药物的分析-专7 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因苯佐卡因、盐酸普鲁卡因 ChP（2005） 鉴别鉴别 （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反）本品显芳香第一胺类的鉴别反 应（附录应（附录） 取供试品约取供试品约50mg，加，加稀盐酸稀盐酸1m1，必，必 要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L 亚硝酸钠溶液数滴亚硝酸钠溶液数滴，滴加，滴加碱性碱性-萘酚试液萘酚试液 数滴数滴，视供试品不同，生成由，视供试品不同，生成由橙黄到猩红橙黄到

5、猩红 色沉淀。色沉淀。 芳胺类药物的分析-专8 盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与 NaNONaNO2 2作用生成乳白色作用生成乳白色N-N-亚硝基化合物亚硝基化合物 沉淀，可与具有芳伯氨基的同类药物区别。沉淀，可与具有芳伯氨基的同类药物区别。 芳胺类药物的分析-专9 l(2)(2)、水解产物的反应、水解产物的反应 lA A苯佐卡因的鉴别试验苯佐卡因的鉴别试验 l取本品取本品0.10.1g g，加氢氧化钠试液加氢氧化钠试液5 5mlml，煮沸，煮沸， 即有乙醇生成，加碘试液，加热，即生即有乙醇生成，加碘试液，加热，即生 成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。成黄色沉淀，并发生

6、碘仿的臭气。 N H2 CO O C 2H5 + N aO H N H2 CO O N a + C 2H5O H C 2 H 5 O H + I 2 + N a O H C H 3 I + H C O O N a + H 2 O 黄色 芳胺类药物的分析-专10 B.盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2005） 鉴别鉴别 取本品约取本品约0.1g，加水，加水2ml溶解后，溶解后， 加加10氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液1ml，即生成，即生成白色沉白色沉 淀淀；加热，变为油状物加热，变为油状物；继续加热，；继续加热，产生产生 的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝 色色

7、；热至油状物消失后，放冷，加；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸盐酸酸 化，即析出白色沉淀。化，即析出白色沉淀。此沉淀能溶于过量此沉淀能溶于过量 的盐酸。的盐酸。 芳胺类药物的分析-专11 NH2 COOCH2CH2N(C2H5)2.HCl NH2 COOCH2CH2N(C2H5)2 NaOH N a O H N H 2 C O O N a + H O C H 2 C H 2 N ( C 2 H 5 ) 2 可 使 湿 润 的 红 色 石 蕊 试 纸 变 蓝 H C l N H 2 C O O H H C l 白色 N H 2 C O O H . H C l 2-二乙氨基乙醇 过量 芳胺类药物的

8、分析-专12 硫氰酸盐衍生物硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因盐酸丁卡因 ChP（2005） 鉴别鉴别 取本品约取本品约0.1g，加，加5%醋酸钠溶液醋酸钠溶液 10ml溶解后，加溶解后，加25%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液1ml， 即析出即析出白色结晶白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，；滤过，结晶用水洗涤， 在在80干燥，依法测定（附录干燥，依法测定（附录C），），熔熔 点约为点约为131。 （3）制备衍生物测熔点）制备衍生物测熔点 芳胺类药物的分析-专13 l典型典型UV参数参数 ll lmin min l lmax max l ls s A Al lmax max E E1cm 1cm 1% 1% 芳胺

9、类药物的分析-专14 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChP（2005） 鉴别鉴别 取本品，精密称定，按干燥品计算，取本品，精密称定，按干燥品计算， 加加0.01mol/L盐酸溶液制成每盐酸溶液制成每1ml中含中含 0.40mg的溶液，照分光光度法（附录的溶液，照分光光度法（附录A） 测定，在测定，在263nm与与271nm的波长处有最大的波长处有最大 吸收；其吸收；其吸收度分别为吸收度分别为0.530.58与与0.43 0.48。 芳胺类药物的分析-专15 （5）IR 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChP（2005） 鉴别鉴别 本品的红外光吸收图谱与对照的图本品的红外光吸收图谱与对照的图 谱（光谱集谱

10、（光谱集324图）一致。图）一致。 芳胺类药物的分析-专16 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 杂质来源杂质来源 制剂制备或贮藏过程中水解产生制剂制备或贮藏过程中水解产生 检查方法检查方法 TLC 杂质对照品法杂质对照品法 4 4、杂质检查杂质检查 芳胺类药物的分析-专17 精密量取本品，加乙醇稀释使成为精密量取本品，加乙醇稀释使成为每每1ml 中含盐酸普鲁卡因中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶的溶液，作为供试品溶 液液。取对氨基苯甲酸对照品，取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每加乙醇制成每1ml 中含中含30 g的溶液，作为对照品溶液。的

11、溶液，作为对照品溶液。取上述两取上述两 种溶液各种溶液各10 l，分别点于含有羧甲基纤维素钠，分别点于含有羧甲基纤维素钠 为粘合剂的硅胶为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯薄层板上，用苯-冰醋酸冰醋酸-丙酮丙酮- 甲醇（甲醇（14 1 1 4）为展开剂，展开后，取）为展开剂，展开后，取 出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2对二甲对二甲 氨基苯甲醛乙醇溶液氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸，加冰醋酸5ml制成）制成） 喷雾显色。喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应供试品溶液如显与对照品溶液相应 的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，的杂质斑点，其颜色与对照品溶

12、液主斑点比较， 不得更深。不得更深。 芳胺类药物的分析-专18 %2 . 1%100 105 . 2 101030 %100 3 供试品量 允许杂质存在的最大量 L 芳胺类药物的分析-专19 l5、含量测定、含量测定 l (1) (1)亚硝酸钠滴定法亚硝酸钠滴定法 l 原理原理 l具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与 NaNO 2 反应生成重氮盐，根据消耗反应生成重氮盐，根据消耗 NaNO2量，计算出含量。量，计算出含量。 Cl- + 22+2+ArNH2 NaNO2 HCl ArNN NaCl H2O 芳胺类药物的分析-专20 具游离芳伯氨基的药物可用本法具游离芳

13、伯氨基的药物可用本法 直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，直接测定。具潜在芳伯氨基的药物， 如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等） 经水解；芳香族硝基化合物（如无味经水解；芳香族硝基化合物（如无味 氯霉素）经还原，也可用本法测定。氯霉素）经还原，也可用本法测定。 NHCOR + H2O NH2 + RCOOH H+ NO2 + 6H NH2 + 2H2O 芳胺类药物的分析-专21 l. 操作中的主要条件操作中的主要条件 重氮化反应属于分子反应重氮化反应属于分子反应 反应速度受多种因素影响反应速度受多种因素影响 滴定液滴定液NaNO2及反应生成的重氮及反应生成的重氮 盐都不

14、稳定盐都不稳定 芳胺类药物的分析-专22 （1）加入适量）加入适量KBr加速反应加速反应 KBr为催化剂为催化剂 在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：在盐酸存在下，重氮化反应的机理为： NaNO2+HClHNO2+NaCl HNO2+HClNOCl+H2O 芳胺类药物的分析-专23 第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比 较快较快,所以整个反应速度取决于第一步所以整个反应速度取决于第一步. NN+Cl - 快 N N OH 快 NNO H 慢 NO + Cl- NH2 芳胺类药物的分析-专24 lA1. 当苯环上特别是氨基邻位或对位上当苯环上特别是氨

15、基邻位或对位上 有吸电基时有吸电基时,如如HSO3COOH2 NOX N H 2 . . X l吸电基通过诱导效应使氨基吸电基通过诱导效应使氨基 上电子云密度降低，从而碱上电子云密度降低，从而碱 性降低，游离芳伯胺浓度增性降低，游离芳伯胺浓度增 大，所以反应速度就快。大，所以反应速度就快。 等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速 度加快。度加快。 芳胺类药物的分析-专25 lA2. 当在苯环上有供电基时，当在苯环上有供电基时， l则使反应速度降低。如则使反应速度降低。如 等。等。ROR l供电基能使氨基碱性增强，这样氨供电基能使氨基碱性增强，这样氨 基成盐的机会就

16、增大，游离芳伯胺基成盐的机会就增大，游离芳伯胺 的浓度就减小，所以反应速度就慢的浓度就减小，所以反应速度就慢。 芳胺类药物的分析-专26 OHNOBr HBr HNO 22 OHNOCl HClHNO 22 （1）K1 （2）K2 K1 300 K2 加入加入KBr，可增大被测溶液中，可增大被测溶液中NO+的的 浓度，所以能加快重氮化反应速度浓度，所以能加快重氮化反应速度 芳胺类药物的分析-专27 （2） 加入过量的盐酸：加入过量的盐酸： 加过量盐酸的目的：加过量盐酸的目的： 重氮化反应速度加快；重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定；重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而

17、影响测定结果防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果 NN+Cl - + H 2N NN NH + HCl 盐酸盐酸 1:2.56 芳胺类药物的分析-专28 （4）滴定速度：先快后慢）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下滴定管尖端插入液面下2/3处，一次将大部处，一次将大部 分滴定液放下，近终点时方改为慢速滴定分滴定液放下，近终点时方改为慢速滴定 （3 3）室温条件下滴定）室温条件下滴定 10103030 芳胺类药物的分析-专29 （5）. 指示终点的方法指示终点的方法 A.永停滴定法永停滴定法 ChP（2005）、）、BP（2005） 芳胺类药物的分析-专30 原理：原理： l在被测溶液中

18、插入两个相同铂在被测溶液中插入两个相同铂 电极，在两个电极间加约电极，在两个电极间加约50mV 电压，并且在回路中串联一个电压，并且在回路中串联一个 灵敏的检流计（灵敏的检流计（10A 9/格）。 格）。 l当用当用NaNO2滴定时，滴定时，在终点前在终点前， 溶液中无亚硝酸，线路中没有溶液中无亚硝酸，线路中没有 电流，电流计指针指零。电流，电流计指针指零。 l当到达滴定终点时当到达滴定终点时，由于溶液，由于溶液 中有微过量的中有微过量的HNO2，使得在两使得在两 个电极上发生氧化还原反应个电极上发生氧化还原反应 芳胺类药物的分析-专31 阳 极： OHNO 2 eHHNO 2 eHHNO 2

19、 OHNO 2 l导致在两电极间有电子流动，从而线 路中有电流产生，使得电流计指针发 生偏转并且不再返回零点。 阴 极： 芳胺类药物的分析-专32 lB外指示剂法外指示剂法 l淀粉淀粉-KI糊剂或试纸糊剂或试纸 OH2NaCl2KCl2INOHCl4KI2NaNO2 2 22 遇淀粉显蓝色 l原理：原理： 当达到滴定终点时，溶液中稍过量当达到滴定终点时，溶液中稍过量 的的NaNO2在酸性条件下氧化在酸性条件下氧化KI析出析出I2， I2遇淀粉显蓝色。遇淀粉显蓝色。 芳胺类药物的分析-专33 l使用方法：使用方法： l滴定时，把淀粉滴定时，把淀粉- - KIKI糊剂在白磁板糊剂在白磁板 上铺为薄

20、层或制上铺为薄层或制 成淀粉成淀粉- -KIKI试纸，试纸， 用玻璃棒蘸取少用玻璃棒蘸取少 量被滴定的溶液量被滴定的溶液 划过，如果立即划过，如果立即 出现蓝色即已到出现蓝色即已到 滴定终点。滴定终点。 芳胺类药物的分析-专34 l外指示剂法的缺点外指示剂法的缺点： 由于被滴定的溶液是强酸性，在没有由于被滴定的溶液是强酸性，在没有 达到终点时，达到终点时，KI在酸性条件下遇光在酸性条件下遇光 能被空气氧化析出碘，就有可能呈能被空气氧化析出碘，就有可能呈 现蓝色，而造成误判。现蓝色，而造成误判。 由于经常蘸取溶液进行试验，可造成由于经常蘸取溶液进行试验，可造成 供试品的损失而带来误差。供试品的损

21、失而带来误差。 方法难掌握。方法难掌握。 芳胺类药物的分析-专35 （3）电位法）电位法 USP（24） （4）内指示剂法）内指示剂法 中性红中性红 不可逆指示剂不可逆指示剂 芳胺类药物的分析-专36 (2)非水滴定法（盐酸丁卡因、盐酸利多非水滴定法（盐酸丁卡因、盐酸利多 卡因）卡因） l原理原理 l侧链烃胺的叔胺氮具有弱碱性侧链烃胺的叔胺氮具有弱碱性,可采用非可采用非 水溶液滴定法测定含量水溶液滴定法测定含量. l非水碱量法非水碱量法 l溶剂：冰醋酸（醋酐）溶剂：冰醋酸（醋酐） l滴定液：高氯酸滴定液：高氯酸 l指示剂：结晶紫指示剂：结晶紫 l醋酸汞的作用醋酸汞的作用 芳胺类药物的分析-专3

22、7 1.1.结构特点：结构特点： 苯胺的酰基衍生物，其共性是具有芳酰氨基苯胺的酰基衍生物，其共性是具有芳酰氨基 酰胺基邻位或对位有取代基。酰胺基邻位或对位有取代基。 第二节、酰胺类药物的分析第二节、酰胺类药物的分析 NH C R2 O R1 R3 R4 芳胺类药物的分析-专38 HONHCOCH3 对乙酰氨基酚（扑热息痛）对乙酰氨基酚（扑热息痛） S O O NHCOCH3CH3CONH 醋氨苯砜醋氨苯砜 代表药物：代表药物： 芳胺类药物的分析-专39 NHCOCH2N(C2H5)2 CH3CH3 HCl 盐酸利多卡因盐酸利多卡因 芳胺类药物的分析-专40 NHCO N C4H9 CH3 CH

23、3 HCl 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 芳胺类药物的分析-专41 l2性质性质： l水解后显芳伯胺特性水解后显芳伯胺特性 l共性共性具有芳酰胺结构，水解成芳伯氨基，具有芳酰胺结构，水解成芳伯氨基， 发生重氮化偶合反应发生重氮化偶合反应。 l利多卡因、布比卡因，酰胺基邻位上有两利多卡因、布比卡因，酰胺基邻位上有两 个甲基，有很大空间位阻，水解较为困难。个甲基，有很大空间位阻，水解较为困难。 所以其盐的水溶液比较稳定（利多卡因在所以其盐的水溶液比较稳定（利多卡因在 80%的硫酸溶液中加热才能水解）的硫酸溶液中加热才能水解） 芳胺类药物的分析-专42 l水解产物易酯化水解产物易酯化 对乙酰氨基酚和醋氨

24、对乙酰氨基酚和醋氨 l苯砜苯砜, ,水解后产生水解后产生醋酸醋酸, ,可在硫酸介质中与可在硫酸介质中与 l乙醇反应乙醇反应, ,发出醋酸乙酯的香味发出醋酸乙酯的香味. . l酚羟基的特性酚羟基的特性( (与与FeClFeCl3 3反应反应) ) l具有酚羟基或水解后能产生酚羟基（对乙酰具有酚羟基或水解后能产生酚羟基（对乙酰 氨基酚），可与氨基酚），可与FeClFeCl3 3作用呈色。作用呈色。 碱性碱性 l利多卡因、布比卡因侧链中具有叔氨利多卡因、布比卡因侧链中具有叔氨N N原子，原子， 显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀 试剂反应进行鉴别或非水碱量法

25、测定含量。试剂反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。 芳胺类药物的分析-专43 l 与重金属离子反应与重金属离子反应 CHCl TSCONa CuSO 3 32 4 黄色 转溶于 蓝紫色 中 利多卡因 细小的亮绿色利多卡因 H CoCl 2 la a与铜离子的反应与铜离子的反应 lb b与钴盐反应与钴盐反应 芳胺类药物的分析-专44 l3.3.鉴别鉴别 l（1 1）重氮化）重氮化- -偶合反应偶合反应 l具有潜在的芳伯氨基，水解或还原后，可发具有潜在的芳伯氨基，水解或还原后，可发 生重氮化生重氮化- -偶合反应。偶合反应。 例如：对乙酰氨基酚例如：对乙酰氨基酚 芳胺类药物的分析-专45 对氨基酚对

26、乙酰氨基酚 、 HCl 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ChP（2005） 鉴别鉴别 取本品约取本品约0.1g，加，加稀盐酸稀盐酸5m1，置，置水浴水浴 中加热中加热40分钟，放冷分钟，放冷；取；取0.5m1，滴加，滴加亚硝酸亚硝酸 钠试液钠试液5滴滴，摇匀，用水，摇匀，用水3ml稀释后，加稀释后，加碱性碱性- 萘酚试液萘酚试液2m1，振摇，即显红色。，振摇，即显红色。 芳胺类药物的分析-专46 （2）三氯化铁反应）三氯化铁反应 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 HONHCOCH3 对乙酰氨基酚结构中具有酚羟基，可直接对乙酰氨基酚结构中具有酚羟基，可直接 与三氯化铁试液反应显蓝紫色与三氯化铁试液反应显蓝紫色

27、 芳胺类药物的分析-专47 (3) (3) 与重金属离子反应与重金属离子反应 A.A.分子结构中具有分子结构中具有芳酰胺芳酰胺的盐酸利多卡因，的盐酸利多卡因， 在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝在碳酸钠试液中，与硫酸铜反应生成蓝 紫色的配位化合物，此有色物转溶入氯紫色的配位化合物，此有色物转溶入氯 仿中显黄色。仿中显黄色。 芳胺类药物的分析-专48 B.B.盐酸利多卡因，在酸性溶液中与氯化钴试液盐酸利多卡因，在酸性溶液中与氯化钴试液 反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。 芳胺类药物的分析-专49 三硝基苯酚衍生物三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因盐酸利多卡因 ChP（200

28、5） 鉴别鉴别 取本品取本品0.2g，加水，加水20ml溶解。溶解。 （1）取溶液）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液，加三硝基苯酚试液 10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤 后，干燥，依法测定（附录后，干燥，依法测定（附录C），），熔点熔点 为为228232，熔融时同时分解。，熔融时同时分解。 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChP（2005） （4）制备衍生物测熔点）制备衍生物测熔点 芳胺类药物的分析-专50 l(6)UV l(7)IR 芳胺类药物的分析-专51 (1)(1)乙醇溶液的澄清度与颜色乙醇溶液的澄清度与颜色 生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致

29、生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则导致 对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。 C l N O 2 水解 NO2 OH 还原 NH2 OH 乙酰化 NHCOCH3 OH 中间体对氨基酚的有色氧化物在乙醇中显橙中间体对氨基酚的有色氧化物在乙醇中显橙 红色或棕色红色或棕色 芳胺类药物的分析-专52 芳胺类药物的分析-专53 lTLC法法 l 供试品溶液供试品溶液 上清液 离心 溶解 乙醚 样品（对乙酰氨基酚） ml5 g1 l 对照品溶液对照品溶液 l对氯乙酰苯胺乙醚溶液（对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50 g/ml） l 分离系统分离系统 l硅胶硅胶GF254 l氯仿氯仿-丙酮

30、丙酮-甲苯（甲苯（13 5 2） 芳胺类药物的分析-专54 l 限量限量: %005.0%100 5 000,000, 1 200 5040 l 点样量点样量 l样品液：样品液：200 l l 点于硅胶点于硅胶GF254薄层板上薄层板上 l对照液：对照液：40 l l 判断判断 l在在254nm波长紫外灯下观察，供试品溶液如波长紫外灯下观察，供试品溶液如 显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较,不得不得 超过其大小与颜色。超过其大小与颜色。 芳胺类药物的分析-专55 l(3)对氨基酚对氨基酚 l制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水制备中乙酰化不完全或贮存不当发生水

31、解都能引入对氨基酚解都能引入对氨基酚 l检查原理：检查原理： l对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰 化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液 比较判断对氨基酚的限量。比较判断对氨基酚的限量。 OHNa2Fe(CN)5NO + H2NNa2Fe(CN)5H2NOH + H2O OH- 芳胺类药物的分析-专56 检查方法检查方法 对照法对照法 取本品取本品1.0g，加甲醇溶液（，加甲醇溶液（12） 20ml溶解后，加溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠碱性亚硝基铁氰化钠试液试液 1m1，摇匀，放置，摇匀，放置30min；如显色，与对；如显色，与

32、对 乙酰氨基酚对照品乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚加对氨基酚50 g用用 同一方法制成的对照液比较，不得更深同一方法制成的对照液比较，不得更深 （0.005）。）。 %005. 0%100 0 . 1 1050 %100 6 供试品量 允许杂质存在的最大量 L 芳胺类药物的分析-专57 l5 5 含量测定：含量测定： l（1 1）非水溶液滴定法）非水溶液滴定法 l（2 2）分光光度法）分光光度法 芳胺类药物的分析-专58 芳胺类药物的分析-专59 R1CH CH NH R2 OH R3 苯乙胺类药物的基本结构苯乙胺类药物的基本结构 * l具有脂烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。具有脂烃胺侧链，属

33、于芳烃胺类药物。 l多数在苯环上有多数在苯环上有1 1 2 2个羟基取代基。个羟基取代基。 芳胺类药物的分析-专60 HO HO C OH H CH2NHCH3 肾上腺素 常见的苯乙胺类药物常见的苯乙胺类药物 HO HO C OH H CH2NH2 重酒石酸去甲肾上腺素 C C COOH COOH OHH HHO 芳胺类药物的分析-专61 HO C H OH CH2NHCH3 HCl 盐酸去氧肾上腺素 HO C H OH CH 2NHCH(CH3)2 HCl HO 盐酸异丙肾上腺素 芳胺类药物的分析-专62 Cl H 2N Cl C H OH CH 2 NH C(CH 3)3 HCl 盐酸克仑

34、特罗盐酸克仑特罗 H 2SO4 2 HO CH 2OH C H OH CH 2 NH C(CH 3)3 硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇 芳胺类药物的分析-专63 l二二性质性质： l1. 易被氧化易被氧化 l邻苯二酚或苯酚结构，易被氧化呈色，在邻苯二酚或苯酚结构，易被氧化呈色，在 碱性溶液中更易变色，可与重金属离子络碱性溶液中更易变色，可与重金属离子络 合呈色。合呈色。 l3. 具有旋光性具有旋光性 具有手性碳原子具有手性碳原子,具有光学活性，可利用此性具有光学活性，可利用此性 质进行质量分析质进行质量分析。 l2. 显碱性显碱性 具有烃胺侧链，其氮为仲胺氮，显弱碱性，具有烃胺侧链，其氮为仲胺氮，显

35、弱碱性， 能与酸成盐。能与酸成盐。 芳胺类药物的分析-专64 4. 溶解性溶解性 游离碱难溶于水，易溶游离碱难溶于水，易溶 于有机溶剂，其盐可溶于水于有机溶剂，其盐可溶于水 5. 取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特 罗可用重氮化罗可用重氮化偶合反应鉴别、亚偶合反应鉴别、亚 硝酸钠滴定法测定含量。硝酸钠滴定法测定含量。 6 . UV 7. IR 芳胺类药物的分析-专65 l三鉴别试验三鉴别试验 1.氧化反应氧化反应 )( 222 O Ior OH 棕色 聚合 聚合物 放置 肾上腺素红 肾上腺素 中性或酸性中性或酸性 偏酸性偏酸性 芳胺类药物的分析-专66 芳胺类药物的分

36、析-专67 同样条件下 去甲肾上腺素 比较稳定 几乎不被氧化 pH=6.5的条件下的条件下,这三种药物均被碘氧化产生红色这三种药物均被碘氧化产生红色, 无法区别无法区别 酒石酸氢钾饱和溶液酒石酸氢钾饱和溶液 去甲肾上腺素去甲肾上腺素 PH=3.56PH=3.56 碘试液碘试液 放置放置5分钟分钟硫代硫酸钠试液硫代硫酸钠试液 无色或微红色或淡紫色无色或微红色或淡紫色 肾上腺素肾上腺素 盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 同样条件下同样条件下 红棕色或紫色红棕色或紫色 芳胺类药物的分析-专68 2.2. 三氯化铁反应：三氯化铁反应： 3.3.甲醛硫酸反应（甲醛硫酸反应（Marquis)Marquis

37、) 醌式结构呈色醌式结构呈色 4.4.亚硝基铁氰化钠反应（亚硝基铁氰化钠反应（Rimini)Rimini) 脂肪族伯氨的专属反应脂肪族伯氨的专属反应 重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺, ,加水溶解后加水溶解后, ,加亚硝基加亚硝基 铁氰化钠试液、丙酮数滴与碳酸氢钠少量铁氰化钠试液、丙酮数滴与碳酸氢钠少量, , 加热后加热后, ,即显红紫色即显红紫色. . 芳胺类药物的分析-专69 杂质来源杂质来源 原料残存原料残存 检查方法检查方法 UV 检查原理检查原理 利用酮体在利用酮体在310nm波长处有最波长处有最 大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有 吸收，规定一定浓

38、度溶液在吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处波长处 的吸收度限制酮体的量。的吸收度限制酮体的量。 芳胺类药物的分析-专70 肾上腺素中肾上腺酮的检查肾上腺素中肾上腺酮的检查 芳胺类药物的分析-专71 310nm A2.0mg/ml HCl 0.05mol/L 测的溶液 溶液 样品 规定：规定：A A310nm 310nm0.05 0.05 方法方法 3. 限量计算限量计算 肾上腺酮的肾上腺酮的 453E %1 cm1 100 1 2/1000 100 = 0.055 杂质限量%=453 0.05 芳胺类药物的分析-专72 五、含量测定五、含量测定 （一）（一）非水溶液滴定法非水溶液滴定法

39、原料药原料药 脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性 以冰醋酸为溶剂以冰醋酸为溶剂, ,加入醋酸汞试液加入醋酸汞试液 以消除氢卤酸的干扰以消除氢卤酸的干扰, ,结晶紫为结晶紫为 指示剂指示剂, ,用高氯酸滴定液进行滴定用高氯酸滴定液进行滴定. . 芳胺类药物的分析-专73 （二）溴量法（二）溴量法 盐酸去氧肾上腺素及盐酸去氧肾上腺素及 其注射液、重酒石酸间羟胺其注射液、重酒石酸间羟胺 HO CH CH2NHCH3 OH Br2+3 Br Br HO Br CH CH2NHCH3 OH +3HBr 芳胺类药物的分析-专74 （三）（三）HPLC法法 重酒石酸去甲肾上腺素注射液重酒石酸去甲肾

40、上腺素注射液 离子对反相高效液相色谱法离子对反相高效液相色谱法 外标法定量外标法定量 调节溶液调节溶液pH为为3.00.1，加入离子，加入离子 对试剂庚烷磺酸钠对试剂庚烷磺酸钠 芳胺类药物的分析-专75 例1. 能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜 色反应的试液为 A. 浓硫酸 B. 甲醛试液 C. 氨试液 D. 甲醛硫酸试液 E. 茚三酮试液 芳胺类药物的分析-专76 例2. 盐酸异丙肾上腺素的检查项目是 A. 有关物质 B. 二苯酮 C. 盐酸 D. 醛 E. 酮体 芳胺类药物的分析-专77 盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有 A. 重氮化偶合反应 B. 氧化反应 C. 磺化反应 D. 碘化反应 芳胺类药物的分析-专78 采用亚硝酸钠法测定 含量的药物有 A. 苯巴比妥 B. 盐酸丁卡因 C.苯佐卡因 D. 醋氨苯砜 E. 盐酸去氧肾上腺素