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文档简介
1、微生物培养基配制 培养基是指人工配制的、适合于微生物生长繁殖或累积代谢 产物所需的各种营养物的混合基质 。配制培养基是进行微生物检验工作的基础,甚至是任何与微生物有关工作的基础。注意事項-灭菌锅的使用加水盖过底部铁板一放入东西一关门一調整溫度時間一关紧泄压阀灭菌結束後,等压力降回零時才可打開門進入灭菌锅之物品,蓋子不可關太緊或太鬆拿滅菌後物品請記得帶耐熱手套培养基中的主要成分及其作用:营养物质:N源、C源、无机盐、生长因子、水常用的N源:蛋白胨、牛肉膏、肉浸汁、酵母膏常用的C源:糖、醇类物质(单糖:葡萄糖、果糖、半乳糖、 甘露糖 双糖:蔗糖、麦芽糖、乳糖;多糖:淀粉、纤维素、菊糖;醇类:甘露醇
2、、卫茅醇、甘油)水:用蒸馏水,不能用自来水凝固剂:琼脂、明胶、血清等抑制剂:1、作用:鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖,增加待检菌的 检出率2、种类:盐类:氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾(钠) 、亚硒酸 钠等染色剂类:煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红胆盐类:猪(牛、羊)胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆 酸盐、胆石酸盐抗菌素:青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素指示剂1、作用:用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质和含 氮化合物,产酸产碱的能力。2、常用的指示剂: 酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲 基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等。培养基的类型:根据培养基的物理状态来区分:1、液体培养
3、基:主要用于增菌培养、鉴别性培养2、固体培养基: 用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定3、半固体培养基: 观察微生物的动力,有时用来保藏菌种4、脱水(商品)培养基:脱水培养基也称为商品培养基、预制 干燥培养基。将各种营养成分按比例配制完全 ,制成脱水的干粉状,装 瓶出售;使用时只需按比例加人定量的水溶化、灭菌便 可。根据培养基的用途来区分:增殖培养基选择培养基鉴别培养基1、增殖培养基: 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增殖培养基。能够给微生物提供较适当的生长环境从而使微生物大量繁殖的培养基称为增
4、菌培养基。增菌、运送用培养基CbQ大肠杆歯墳凿増茧览养基沙厂1氏繭壇苗134隹s中抄n氏苗壇芮沙厂1氏菌墳离肉初培养基恚賀氏茧増苗磺悝蛋白殊水绘养基霍乱亚苗墳苗B3全黄包帚药球苗1苦苗錢冲蛋白降才器养基眇门氏繭墳翦mo血谀增凿培养基血祗中细菌増園:B3.丄:SUdLl/i密许基础培养基化校星1中细凿増谢2、选择培养基:在培养基中加入抑制剂以杀死或抑制不需 要的菌种,分离对象因对该抑制剂有抗性而正常生长繁殖的 培养基,称之为选择培养基。分离培养用的培养基名悸用僮号呂偉麗 绘养基沙n氏和吉聂氏茧雇分离志贺氏讀分鶴鉴別大肠杼苗. 产气杆茧分禹鳖别麦金断碌酯绘养基 匚叫皿:肠直孜病苗分两甘爲爵高盐 京
5、鹿培养基:舞BR杆苗并需蔓别PQ球腊坨养基誰贺氏. 抄门氏苗分离中国蓝琼腦堵养基厕道曹分离鉴別宦SL亚菌命高高盐蔡氏琼脂培养基真苗.詩毋苗分羯3、鉴别培养基: 在培养基中加入指示剂或化学药品 ,目的菌经培养后其代谢产物与化学试剂发生显色反应,因而用肉眼可快速鉴别出目的菌,这样的培养基称之为鉴别培养基。 例如:伊红美蓝培养基(EMB)就是一种常用的鉴别性培养基。伊红美蓝培养基用于食品、乳制品、水源和病源标本中革兰氏阴性肠道菌的分离和鉴别鉴别用培养基蛋白豚水培养罐駄基质和霍乱红试验氧糠胆盐发醸壤养基麦康 凯墳养基大肠杆芮发醉翼糖试裝O.珈扎梱发酵培莽基肠逍歯生化试验 宜窝酵半国体培养基动力试验和葩
6、种傑書三粘铁偉脂培养基 TST肠杆歯柚 发酵及毓化氢反应孰化钾些础培幷些沙门氏歯分离脱檢酶试骤对照培养曲细菌瞬竣酶述验4、活体培养基:病毒、立克次氏体等专性寄生微生物不能在一般培养基上生长,常用鸡胚、活细胞和动物进行培养。采用鸡胚培养时,将微生物接到绒毛尿囊膜、尿囊、羊膜囊和卵黄囊中进行培养,即可得培养物。细胞培养指将病毒接种到体外培养的活细胞上使其增殖。(三)培养基制备的基本方法和注意事项?培养基的制备记录培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化?培养基pH的初步调正 培养基的过滤澄清培养基的分装?培养基的灭菌 培养基的质量测试培养基的保存1、培养基的制备记录?每次制备培养基均应有记录,包括
7、培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等。?记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的 培养基一同存放、以防发生混乱。2、培养基成分的称取?培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方上面做出记号,并将所需称取的药品一 次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。3、培养基各成份的混合和溶化?指示剂应在调节好pH值后再加入;煮溶后要补加足水份;?不能把培养基煮焦,焦化的不能使用。4、培养基pH的校正灭菌后pH值会下降0.10.2,在做培养基
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