糖皮质激素对

1、糖皮质激素对胃分泌物的影响 小组成员：实验目的： 了解糖皮质激素对胃分泌物的影响，即对胃酸（游离酸、结合酸）、胃蛋白酶、黏液分泌的影响。通过学习胃分泌物的作用机制，了解短期和长期服用糖皮质激素的患者（如：哮喘）可能会出现的药物产生的胃部问题。实验原理： 糖皮质激素作用很广泛，不仅调节糖代谢，还参与机体多种生理功能的调节。如糖皮质激素可作用于消化系统，促进胃液，胃蛋白酶等的分泌，并抑制胃黏液的分泌，降低胃黏膜的抵抗力。胃黏膜有许多腺体，胃底和胃体黏膜的腺体分泌胃蛋白酶和胃酸。在一般情况下，胃液的分泌受神经和体液调节。其长期大量应用（如：哮喘）可诱发消化性溃疡，糖皮质激素也能掩盖溃疡的初期症状，以

2、致出现突发出血和穿孔等严重并发症。 实验材料： 大白鼠（禁食24小时）实验器材、药品： 器材：哺乳类动物手术器械，鼠板，直径2mm长20cm的细塑料管，纱布，试管若干支，碱式滴定管，2ml和5ml注射器，分光光度仪，胃插管，ph试纸，离心机，锥形瓶。 药品：1戊巴比妥钠、生理盐水、糖皮质激 素、柠檬酸磷酸缓冲液（ph5.8）、1%阿新蓝、0.2% hcl 、若干块纤维蛋白、 0.1%胃蛋白酶、1%nahco3 。实验方法：麻醉大白鼠麻醉大白鼠： 用1戊巴比妥钠（3050mgkg） 腹腔麻醉。a.备皮备皮：颈部及上腹正中剑突处。b.颈部手术： 在颈部作长约1.5cm的皮肤切口，分离肌肉，暴露气管

3、，分离气侧的食管，将插管经食管插入胃内，环线结扎以固定插管 。（2）手术手术：c.腹部手术腹部手术： 在上腹正中剑突下作一切口，打开腹腔，用温热的生理盐水纱布将胃轻轻拉出腹腔置于腹外，上下均用湿纱布覆盖，并在胃与十二指肠交界处做一插管。用注射器将大量温热的生理盐水冲洗胃，是残留食物由胃插管流出体外，流出的生理盐水澄清时即表示胃被洗净，然后将胃放回腹腔。 将大白鼠固定站立在固定架上，固定好后把腹腔合拢，使插管游离在腹腔外。并用台灯照射以维持动物体温。d.固定固定：（3）实验项目实验项目： a、30min后将5ml的生理盐水由食管插管射入，同时在腹腔插管下端用试管收集由幽门端流出的液体2min，连

4、续冲洗3次，收集3个胃液样品，分别标记为a、b、c管，作为对照。b、用注射器将大量生理盐水射入食管端插管冲洗胃。静脉注射4ml糖皮质激素并由食管端注入5ml生理盐水，同时在腹腔插管下端用试管收集由幽门端流出的液体2min，连续冲洗3次，收集3个胃液样品，分别标记为d、e、f管，做为实验项。c、胃液中各种分泌物的测定：（1）、胃酸的测定：吸取2ml胃液于锥 形瓶中，加入1滴1%酚酞作为指示剂，用0.1mol/lnaoh滴定，当出现红橙色（ph为7）时所消耗的碱量（ml）乘以 2，即为胃液中游离酸的含量。（2）、总酸的测定： 继续以0.1mol/lnaoh滴定，使溶液完全的柠檬黄后，再滴定至浅红色

5、为止，所消耗碱的量（包括滴定游离酸耗用的量）乘以2，即为胃液的总酸量。 （3）、胃蛋白酶的测定： 标 号 实验项试管一0.2% hcl 1ml + 一块纤维蛋白试管二0.1%胃蛋白酶1ml+ 一块纤维蛋白试管三0.1%胃蛋白酶+1ml 1%nahco3 + 一块纤维蛋白试管四0.1%胃蛋白酶1ml煮沸冷却+ 一块纤维蛋白试管五胃液1ml+ 一块纤维蛋白5支试管均放入37的恒温水中经0.51小时后取出并观察变化按照上述表格内容对a、b、c、d、e、f管中分泌物均作胃蛋白酶的测定。 （4）、胃黏液的测定： 试管一试管二胃液1ml0.2% hcl 1ml1%阿新蓝0.1ml柠檬酸磷酸缓冲液（ph5.

6、8）3.3ml均加蒸馏水至5ml，混匀于室温放置24小时，2500r/min离心10分钟，取上清液测定615nm波长的吸光度。两管的吸光度差值即为阿新蓝与胃液中黏液的结合量，用阿新蓝毫克数表示黏液含量。预期结果： 静脉注射糖皮质激后，测定的胃液，胃蛋白酶量增加，胃黏液量减少。可能出现的问题： 由于糖皮质激素的用量无法准确把握，可能会影响实验结果。 可能由于个体差异，出现对糖皮质激素的过敏现象或其他反应，导致影响实验结果。注意事项： 为保证胃液分泌，大白鼠不宜麻醉太深。 实验对象大白鼠，在对其进行实验前24小时禁食，但不能禁水。 手术操作要仔细，尽量减少损伤和出血，插管时不得刺破胃壁。课题总结： 糖皮质激