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文档简介
1、名词解释基因:产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。Tm值:通过加热变性是DNA的双螺旋结构失去一半时的温度。中度重复序列:指真核细胞DNA序列重复次数在10-104,占DNA的10%-40%增强子(enhancer):能强化转录起始的序列,具有远距离效应、无方向性、无物种和基因的特异性、具有组织特异性、相位性等特点。分子杂交:由来源不同的两个DNA单链或RNA单链,或者是一条DNA单链和一条RNA单链结合成双链分子的过程。限制性内切酶:内切酶的一类,能够专一性识别多聚核苷酸链上的特殊核苷酸序列,并使每条链的磷酸二酯键断开的。反式作用因子:能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核
2、心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。半保留复制:即子代DNA分子中仅保留一条亲代链,另一条链则是新合成的,这是双联DNA普遍的复制机制。PCR:即聚合酶链反应。是模仿细胞内发生的DNA复制过程进行的,在体外由酶催化合成特异性DNA片段。是扩增DNA片段的方法。Anticodon:存在于tRNA上并与mRNA上的密码子相互配对的三联子密码central dogma:是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。在某些病毒中的RNA自我复制(如烟草花叶病毒等)
3、和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程(某些致癌病毒)是对中心法则的补充。single-strand binding protein(SSB):是一类特异性和单链区DNA结合的蛋白质。功能在于稳定DNA解开的单链,阻止复性和保护单链部分不被核酸酶降解。Transcription:是指拷贝出一条和DNA链序列完全相同(除了T替换为U之外)的RNA单链的过程。Exon(外显子):前体RNA中,具有编码蛋白质功能的编码区域。Promoter(启动子):是一段位于结构基因5端上游区的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确地结合并具有转录起始的特异性。satellite DNA
4、:又称为随体。只在真核生物中发现的,占基因组的10%60%,由6100个碱基组成,在DNA链上串联重复成千上万次。c value:一种生物单倍体基因组DNA的总量。chromatin:纤维串珠状的长丝,是染色体在细胞生活周期的分裂间期存在的特定形态。overlapping gene:具有部分共用核苷酸序列的基因,即同一段DNA携带了两种或以上不同蛋白质的编码信息。重叠的部分可以在调控区,也可以在结构基因区。常见于病毒和噬菌体基因组中denaturation:核酸的变性指核酸双螺旋区的氢键断裂,变成单链,并不涉及共价键断裂。autonomously replicating sequences(A
5、RS)即自主复制序列,是酵母的复制起始位点。core promoter elements:真核生物基因启动子中,介导基因转录起始的最小的一段连续DNA序列。 degeneracy:由一种以上密码子编码同一种氨基酸的现象称为密码子的简并性。leading strand(前导链):以复制叉向前移动的方向为标准,一条模板链是35走向,在其上DNA能以53方向连续合成,此链成为前导链。open reading frame:翻译时由起始密码子开始,到终止密码子结束为止,可生成一条具有特定序列的多肽链的核酸序列。hyperchromic effect:核酸(DNA和RNA)分子解链变性或断链,其紫外吸收值
6、(一般在260nm处测量)增加的现象。topoisomerase:是指通过切断DNA的一条或两条链中的磷酸二酯键,然后重新缠绕和封口来更正DNA连环数的酶。tRNA identity:同一种tRNA分子共同具有的,能被特异性氨酸tRNA合成酶识别的一些特定位置上的核苷酸。translation:是指以转录形成的mRNA链为模板,把核苷酸三联遗传密码子翻译成氨基酸序列、合成多肽链的过程。constitutive heterochromatin:主要由高度重复序列DNA构成的,在细胞的所有时期都保持凝聚状态的染色质repression:阻遏物或阻遏物-辅阻遏物复合物与基因的调控序列结合而将其封闭,
7、从而阻止基因的表达。reverse transcription:以RNA为模板,依靠逆转录酶的作用,以四种脱氧核苷三磷酸(dNTP)为底物,产生DNA链。常见于逆转录病毒的复制中。facultative heterochromatin:在个体发育的特定阶段,由原来的常染色质凝缩并丧失基因转录活性而转变成的异染色质。codon:mRNA中碱基顺序与蛋白质中氨基酸顺序的对应关系是通过密码实现的,mRNA上每3个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸,这三个核苷酸称为密码,也叫三联子密码。positive regulation:当转录调节因子与启动子内或启动子附近的结合位点结合后,对转录起促进作用,
8、称为正调控。splitting gene:真核生物结构基因。由若干个编码区和非编码区,互相间隔开但又连续,镶嵌而成。去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因。intragenenic promoter:真核生物三类启动子之一。被RNA聚合酶所识别,位于转录起点下游,即在基因内部。如5S和tRNA以及胞质小RNA基因的启动子。isoaccepting tRNA:摇摆假说的相对性说明了摇摆范围的局限,在通用三联体密码中一个密码子家族必须由两种tRNA识读。能解读同义密码子的不同tRNA被定义为同工受体tRNA。activating protein:抑制素的两
9、个亚基组成的二聚体。是转化生长因子家族的成员,亚基有A,B 两种同工型,可形成AA、AB、BB三种组合。除能刺激促卵泡激素的分泌外,还有多种细胞生物效应。jumping gene:一段可以从原位上单独复制或断裂下来,环化后插入另一位点,并对其后的基因起调控作用的DNA序列。c-value paradox:指C值往往与种系进化的复杂程度不一致,某些低等生物却具有较大C值的反常现象。Priming:PCR过程中引导互补链DNA合成的一种脱氧核苷酸寡聚体,其3端必须具有游离的OH基团。Cot1/2:表示复性一半的Cot值。Co为变性DNA复性时的初始浓度,以核苷酸的摩尔浓度表示,t为时间,以秒表示。
10、在一定条件下,Cot1/2可以表示复性反应的速度。estein:polysome:mRNA同时与若干个核糖体结合形成的念珠状结构,称之为多核糖体。replication fork:adaptive expression:intein:euchromatin:选择题1蛋白质生物合成的方向是(D)。(a)从CN端 (b)定点双向进行 (c)从N端、C端同时进行 (d)从NC端2在蛋白质合成中,下列哪一步不需要消耗高能磷酸键( A )。 (a)肽基转移酶形成肽键 (b)氨酰一tRNA与核糖体的“A,位点结合 (c)核糖体沿mRNA移动 (d)fMettRNAf与mRNA的起始密码子结合以及与大、小亚
11、基的结合3下列哪些因子是真核生物蛋白质合成的起始因子( CDE )。 (a)IF1 (b)IF2 (c)eIF2 (d)eIF4 (e)elF4A4DNA复制中RNA引物的主要作用是( A )。 (a)引导合成冈奇片段 (b)作为合成冈奇片段的模板 (c)为DNA合成原料dNTP提供附着点 (d)激活DNA聚合酶5DNA复制的精确性远高于RNA的合成,这是因为( B )。(a)新合成的DNA链与模板链形成了双螺旋结构,而RNA链不能 (b)DNA聚合酶有3 5外切酶活力,而RNA聚合酶无相应活力(c)脱氧核苷酸之间的氢键配对精确性高于脱氧核苷酸与核苷酸之间的配对(d)DNA聚合酶有5 3外切酶
12、活力,RNA聚合酶无此活性6能编码多肽链的最小DNA单位是( A )(a)顺反子 (b)操纵子 (c)启动子 (d)复制子 (e)转录子7证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是:( C ) (a)从被感染的生物体内重新分离得到DNA,作为疾病的致病剂 (b)DNA突变导致毒性丧失 (c)生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能 (d)DNA是不能在生物体间转移的因此它一定是一种非常保守的分子 (e)真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代8在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中
13、,发夹结构的形成:( AD )(a)基于各个片段间的互补,形成反向平行双螺旋(b)依赖于AU含量,因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少(c)仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生(d)同样包括有像GU这样的不规则碱基配对(e)允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基9下面哪些真正是乳糖操纵子的诱导物?( BDE )(a) 乳糖 (b)蜜二糖 (c)O硝基苯酚半乳糖苦 (d)异丙基半乳糖苷 (e)异乳糖10细胞器DNA能够编码下列哪几种基因产物?( ABCDEF )(a)mRNA (b)大亚基rRNA (c)小亚基rRNA (d)tRNA(e)4.5S rRNA (
14、f) 5SrRNA11. DNA在l0nm纤丝中压缩多少倍(长度) ( A )(a)6倍 (b)10倍 (c)40倍 (d)240倍 (e)1000倍 (f)10000倍12氨酰tRNA的作用由(B)决定(a)其氨基酸(b)其反密码子(c)其固定的碱基区(d) 氨基酸与反密码子的距离,越近越好(e)氨酰tRNA合成酶的活性13一个复制子是: ( BC )(a)细胞分裂期间复制产物被分离之后的DNA片段(b)复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白(c)任何自发复制的DNA序列(它与复制起始点相连)(d)任何给定的复制机制的产物(如:单环)(e)复制起点和复制叉之间的DNA片段14对于一个特定
15、的起点,引发体的组成包括: ( A C )(a)在起始位点与DnaG引发酶相互作用的一个寡聚酶(b)一个防止DNA降解的单链结合蛋白(c)DnaB解旋酶和附加的DnaC,DnaT,PriA等蛋白(d)DnaB,单链结合蛋白,DnaC,DnaT,PriA蛋白和DnaG发酶(e)DnaB解旋酶,DnaG引发酶和DNA聚合酶III15下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述: ( C )(a) 因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物(b)全酶、TFI和解链DNA双链形成的复合物(c)全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物(d)三个全酶在转录起始位点形成的复合物(e) 因子、核心酶和促旋酶形成的
16、复合物16下面叙述哪些是正确的?( C)(a)c值与生物体的形态复杂性呈正相关(b)c值与生物体的形态复杂性呈负相关(c)每个门的最小c值与生物体形态复杂性是大致相关的17简单序列DNA( CD)(a)与Cot1/2曲线的中间成分复性(b)由散布于基因组中各个短的重复序列组成(c)约占哺乳类基因组的10(d)根据其核苷酸组成有特异的浮力密度(e)在细胞周期的所有时期都表达18氨酰tRNA分子同核糖体结合需要下列哪些蛋白因子参与?( BDE )(a)EF-G (b)EF-Tu (c)EF-Ts (d)EF-2 (e)EF-119核糖体的E位点是:( B )(a)真核mRNA加工位点(b)tRNA
17、离开原核生物核糖体的位点(c) 核糖体中受EoR I限制的位点(d)电化学电势驱动转运的位点20下列有助于抑制功能的是:(BCDE )(a)使用tRNA类似物,如嘌呤霉素(b)在tRNA修饰酶的结构基因中引入点突变(c) 氨酰tRNA合成酶结构基因中引人点突变(d)提高tRNA阻遏物的竞争效率(如与释放因子和正确的tRNA的竞争力)(e)在编码tRNA的基因的反密码子区中引入点突变21.基因组是;( D )(a)一个生物体内所有基因的分子总量(b)一个二倍体细胞中的染色体数(c)遗传单位(d)生物体的一个特定细胞内所有基因的分子的总量22真核基因经常被断开:( BDE )(a)反映了真核生物的
18、mRNA是多顺反子(b)因为编码序列“外显子”被非编码序列“内含子”所分隔(c)因为真核生物的DNA为线性而且被分开在各个染色体上,所以同一基因的不同部分可能分布于不同的染色体上(d)表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译(e)表明真核基因可能有多种表达产物,因为它有可能在mRNA加工的过程中采用 不同的外显子重组方式23DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述:( CD )(a)哺乳动物DNA约为45,因此发烧时体温高于42是十分危险的(b)依赖于AT含量,因为AT含量越高则双链分开所需要的能量越少(c)是双链DNA
19、中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值(d)可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定(e)就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度24核小体的电性是:( C )(a)正 (b)中性 (c)负25在I型内含子剪接的过程中,( C )(a)游离的G被共价加到内含子的5端(b)GTP被水解(c)内含子形成套马索结构(d)在第一步,G的结合位点被外来的G占据,而在第二步,被3剪接位点的G取代(e)被切除的内含子继续发生反应,包括两个环化反应26下述特征是所有(原核生物、真核生物和病毒)复制起始位点都共有的是(ACD )(a)起始位点是包括多个短重复序列的独持DNA片段(b)起始位点是形成稳定
20、二级结构的回文序列(c)多聚体DNA结合蛋白专性识别这些短的重复序列(d)起始位点旁侧序列是AT丰富的,能使DNA螺旋解开(e)起始位点旁侧序列是GC丰富的,能稳定起始复合物27标出以下所有正确表述: (C)(a)转录是以半保留方式获得序列相同的两条DNA链的过程(b)依赖DNA的DNA聚合酶是多亚基酶,它负责DNA的转录(c)细菌的转录物(mRNA)是多基因的(d)因子指导真核生物hnRNA的转录后加工,最后形成mRNA(e)促旋酶在模板链产生缺口,决定转录的起始和终止28细胞器DNA能够编码下列哪几种基因产物?( ABCDEF )(a)mRNA(b)大亚基rRNA(c)小亚基rRNA(d)
21、tRNA(e)4.5S rRNA(f) 5SrRNA29下面关于真核生物翻译的叙述中,哪一个(哪些)是正确的?(AE )(a)起始因子eIF只有同CTP形成复合物才起作用(b)终止密码子与细菌的不同(c)白喉毒素使EF-l ADP核糖酰化(d)真核生物蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸,蛋白质合成后它马上被切除(e)真核生物的核糖体含有两个tRNA分子的结合位点30真核起始因子eIF-3的作用是:( B )(a)帮助形成亚基起始复合物(eIF-3,GTP, Met-tRNA, 40S)(b)帮助亚基起始复合物(三元复合物,40S)与mRNA5端的结合(c)若与40S亚基结合防正40S与60
22、S亚基的结合(d)与mRNA5端帽子结构相结合以解开二级结构(e)激活核糖体GTP酶,使亚基结合可在GTP水解时结合,同时释放eIF-231. 选出下列所有正确的叙述。( C )(a)外显子以相同顺序存在于基因组和cDNA中(b)内含子经常可以被翻译(c)人体内所有的细胞具有相同的一套基因(d)人体内所有的细胞表达相同的一套基因(e)人体内所有的细胞以相同的一种方式剪接每个基因的mRNA32下列哪些基因组特性随生物的复杂程度增加而上升?( ABD )(a)基因组大小(b)基因数量(c)基因组中基因的密度(d)单个基因的平均大小33DNA的变性:( ACE )(a)包括双螺旋的解链(b)可以由低
23、温产生(c)是可逆的(d)是磷酸二酯键的断裂(e)包括氢键的断裂34当新的核小体在体外形成时,会出现以下哪些过程 ( A )(a)核心组蛋白与DNA结合时,一次只结合一个(b)一个H32H42核形成,并与DNA结合,随后按顺序加上两个H2A-H2B二聚体(c)核心八聚体完全形成后,再与DNA结合35一个复制子是: (C )(a)细胞分裂期间复制产物被分离之后的DNA片段(b)复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白(c)任何自发复制的DNA序列(它与复制起始点相连)(d)任何给定的复制机制的产物(如:单环)(e)复制起点和复制叉之间的DNA片段36DNA多聚体的形成要求有模板和一个自由3OH
24、端的存在。这个末端的形成是靠( ABDE )(a)在起点或冈崎片段起始位点(3GTC)上的一个RNA引发体的合成(b)随着链替换切开双链DNA的一条链(c)自由的脱氧核糖核苷酸和模板起随机按WatsonCrick原则进行配对(d)靠在3末端形成环(自我引发)(e)一种末端核苷酸结合蛋白结合到模板的3末端37Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)是指: ( A)(a)在mRNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序(b)在DNA分子上转录起始点前8-13个核苷酸处的顺序(c)16srRNA3端富含嘧啶的互补序列 (d)启动基因的顺序特征 (e)以上都正确38DNA以半保留方式复制,如果
25、一个具有放射性标记的双链DNA分子,在无放射性标记的环境中经过两轮复制。其产物分子的放射性情况如何( A )。(a)其中一半没有放射性 (b)都有放射性(c)半数分子的两条链都有放射性 (d)都不含放射性39修补胸腺嘧啶有数种方法,其中之一是用DNA连接酶、DNA聚合酶等催化进行,试问这些酶按下列哪种顺序发挥作用( C ):(a)DNA连接酶DNA聚合酶核酸内切酶(b)DNA聚合酶核酸内切酶DNA连接酶(c)核酸内切酶DNA聚合酶DNA连接酶(d)核酸内切酶DNA连接酶DNA聚合酶40下列关于核不均一RNA(hnRNA)的论述哪些是正确的( A)。 (a)它们的寿命比大多数细胞液的RNA为短(
26、b)在3端有一个多聚腺苷酸(polyA)长尾,是由DNA编码的 (c)它们存在于细胞核的核仁外周部分(d)链内核苷酸不发生甲基化反应(e)有大约四分之三成份将被切除棹,以形成mRNA41. 以下关于假基因的陈述哪些是正确的?(DEF )(a)它们含有终止子(b)它们不被转录(c)它们不被翻译(d)它们可能因上述任一种原因而失活(e)它们会由于缺失或其他机理最终从基因组中消失(f)它们能进化为具有不同功能的新基因42细胞器基因组:(A )(a)是环状的(b)分为多个染色体(c)含有大量的短的重复DNA序列43组蛋白在生理条件pH下的净电荷是:(A )(a)正 (b)中性 (c)负44原核细胞信使
27、RNA含有几个其功能所必需的持征区段它们是:( D )(a)启动子,SD序列起始密码子,终止密码于,茎环结构(b) 启动子,转录起始位点,前导序列,由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF,尾部序列,茎环结构(c)转录起始位点,尾部序列,由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF,茎环结构(d)转录起始位点,前导序列,由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF,尾部序列45DNA的复制:( ABD )(a)包括一个双螺旋中两条子链的合成(b)遵循新的子链与其亲本链相配对的原则(c)依赖于物种特异的遗传密码(d)是碱基错配最主要的来源(e)是一个描述基因表达的过程46标出下列所有正确的答案: ( C )(
28、a)转录是以半保留的方式获得两条相同的DNA链的过程(b)DNA依赖的DNA聚合酶是负责DNA复制的多亚基酶(c)细菌转录物(mRNA)是多基因的(d)因子指导真核生物的hnRNA到mRNA的转录后修饰(e)促旋酶(拓扑异构酶II)决定靠切开模板链而进行的复制的起始和终止47关于DNA指导下的RNA合成的下列论述除了哪一项都是正确的( C )。(a)只有存在DNA时,RNA聚合酶才能催化磷酸二酯键的形成。(b)在合成过程中,RNA聚合酶需要一个引物。(c)RNA链的延长方向是5 3。(d)在多数情况下,只有一条DNA链作为模板。48DNA聚合酶在分类时属于六大酶类中的哪一种( A )。 (a)
29、合成酶类 (b)转移酶类 (c)裂解酶类 (d)氧化还原酶类 49体内参与甲基化反应的直接甲基供体是( D )。(a)Met (b)S腺苷甲硫氨酸(c)甲酰甲硫氨酸 (d)Met-tRNA 50下列哪些内容属于蛋白质合成后的加工、修饰( BCDE )。(a)切除内含子,连接外显子 (b)切除信号肽 (c)切除N-端Met(d)形成二硫键 (e)氨基酸的侧链修饰问答题1. 简述染色体包装模型。(4分)答:DNA和组蛋白组成核小体,核小体串联成10nm纤维的染色质细丝,10nm纤维盘绕成30nm的螺线管粗丝,螺线管进一步压缩成超螺旋管,最后形成的双链DNA与非组蛋白结合成为染色体结构。2. 简述原
30、核与真核基因结构的特点。(6分)答:原核和真核基因结构均具有启动子、编码区、终止子及上、下游非编码区等结构,而原核生物的基因是连续编码的,而且具有基因重叠现象;真核生物基因编码区是不连续的,被不可编码蛋白质的内含子将可编码蛋白质的外显子间隔开。3. 简述遗传密码的特点。(4分)答:(1)密码无标点:从起始密码始到终止密码止,需连续阅读,不可中断。增加或删除某个核苷酸会发生移码突变。(2)密码不重叠:组成一个密码的三个核苷酸只代表一个氨基酸,只使用一次,不重叠使用。(3)密码的简并性:在密码子表中,除Met、Trp各对应一个密码外,其余氨基酸均有两个以上的密码,对保持生物遗传的稳定性具有重要意义
31、。(4)变偶假说:密码的专一性主要由头两位碱基决定,第三位碱基重要性不大,因此在与反密码子的相互作用中具有一定的灵活性。(5)通用性及例外:地球上的一切生物都使用同一套遗传密码,但近年来已发现某些个别例外现象,如某些哺乳动物线粒体中的UGA不是终止密码而是色氨酸密码子。(6)起始密码子AUG,同时也代表Met,终止密码子UAA、UAG、UGA使用频率不同。4.用图绘制真核基因的精细结构。(6分) 上游非编码区 增强子 启动子区(识别区、CAAT boxGC box上游启动子元件 TATA box) 转录起始位点 编码区(外显子、内含子、终止子) 下游非编码区5.简述PCR反应的系统组成和参数设
32、置。(4分) 答:PCR反应的系统分为反应体系和扩增程序两部分。反应体系包含灭菌超纯水、缓冲液、MgCl2、引物、聚合酶、模板、核苷酸;扩增程序包括:第一步,在9095变性;第二步,在7075下进行延伸;第三步,在3755之间复性,第四步,重复循环上述过程。具体反应的温度、时间、循环次数视用于反应的DNA片段和目的而定。6.简述探针的类型。(5分)答:cDNA探针:通过逆转录获得cDNA后,将其克隆于适当的克隆载体,通过扩增重组质粒而使cDNA得到大量的扩增.提取质粒后分离纯化作为探针使用.它是目前应用最为广泛的一种探针.基因组探针:从基因组文库里筛选得到一个特定的基因或基因片段的克隆后,大量
33、扩增,纯化,切取插入片段,分离纯化为探针.寡核苷酸探针:根据已知的核酸顺序,采用DNA合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段作为探针.RNA探针:采用基因克隆和体外转录的方法可以得到RNA或反义RNA作为探针.7.简述操纵子模型的基本组成要件。(5分) 答:一般而言,操纵子有共同的控制区和调节系统。包括在功能上彼此相关的结构基因和控制部位,后者由启动子(P)和操纵基因(O)所组成。以大肠杆菌的乳糖操纵子为列,其含Z、Y及A三个结构基因,分别编码-半乳糖苷酶、透酶、乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动序列P及一个调节基因。基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子受阻遏而处于转录失活状
34、态。在启动序列P上游还有一个分解(代谢)物基因激活蛋白CAP结合位点,由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成LAC操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达。8.简述阳性克隆筛选的原理。(6分) 答:在构建基因工程载体系统时,载体DNA分子上通常携带一定的选择性遗传标记基因,转化或转染宿主细胞后可以使后者呈现出特殊的表型或遗传特性,如抗药性、插入失活、显色互补等,据此通过在选择培养基加入适量选择物,从而初步筛选出重组子。9.从C值悖论的角度谈谈你对基因组大小与生物复杂度之间的辨证关系。(15分)10.试述基因表达调控与生命本质的关系。(15分)11.从遗传物质
35、的发现与基因概念的发展阐述基因概念的内涵。(15分)12简述真核生物基因组的序列组成。(简答,5分) 答:真核生物体细胞内的基因组分细胞核基因组与细胞质基因组,包括单拷贝序列、简单重复序列、中度和高度重复序列等。单拷贝序列亦称非重复序列,是指在基因组中只有1个拷贝或2-3个拷贝的序列。短片段的重复序列按排列方式不同可分为三种类型:(1)正向重复又叫顺向重复,这种重复序列的方向是相同的;(2)反向重复的方向相反,呈两侧对称,常存在于插入序列和转座子两端的结构元件中 ;(3)回文序列 (Palindromic sequence)是一种旋转对称,回文序列常存在于各种蛋白质结合位点。长片段的重复序列分
36、为轻度重复、中度重复和高度重复三种:1、轻度重复序列是指在基因组中含2-10拷贝的序列;2、中度重复序列是指在真核基因组中重复数十至数万次的重复序列;3、高度重复序列是一种简单的重复序列,有的重复单位长度不超过6bp,但在基因组中重复可达十万次。13描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用。(简答,5分) 答:1、通过核苷酸聚合反应,使DNA链沿5向3方向延长(DNA聚合酶活性);2、由3端水解DNA链(3向5核酸外切酶活性);3、由5端水解DNA链(5向3核酸外切酶活性);4、由3端使DNA链发生焦磷酸解;5、无机磷酸盐与脱氧核糖核苷三磷酸之间的焦磷酸基交换。14试比较转录与复
37、制的区别。(8分) 答:目的不同,所使用的酶、原料及其它辅助因子不同,转录是合成RNA,复制是合成DNA;方式不同:转录是不对称的,只在双链DNA的一条链上进行,只以DNA的一条链为模板,复制为半不连续的,分别以DNA的两条链为模板,在DNA的两条链上进行;复制需要引物,转录不需要引物;复制过程存在校正机制,转录过程则没有;转录产物需要加工,复制产物不需要加工;复制与转录都经历起始、延长、终止阶段,都以DNA为模板,新链按碱基互补原则,53方向合成。15蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容?(简答,8分) 答:1.氨基端和羧基端的修饰:除去信号肽序列、乙酰化、N端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸的切除等。2.共
38、价修饰,如磷酸化、糖基化、羟基化、二硫键的形成等。3.亚基的聚合,对于蛋白质是由二个以上亚基构成的而言。4.水解断链,即是一种mRNA翻译后的多肽链经水解后产生几种不同的蛋白质或多肽。16区别可诱导和可阻遏的基因调控。(6分)235 答:基因初始状态编码产物基因调控条件可诱导基因调控关闭分解平时含量少的糖类或氨基酸的蛋白质生活环境普遍利用的能源物质缺乏,基因开启可阻遏基因调控开启细胞代谢必需小分子物质生活环境中小分子物质充分,基因关闭17阐述基因概念的变化。(12分) 答:19世纪中叶,奥地利生物学家孟德尔发现分离规律和自由组合规律。并提出遗传因子,此即基因概念的萌芽;1900年,孟德尔定律的
39、重新发现,标志着遗传学的诞生;1909年,Johannsen首次用“基因”取代“遗传因子”,并提出“基因型”和表现型“。此时,“基因”只是一个抽象的符号;1926年,Morgan发表基因论。首次提出“三位一体”的基因概念基因是一个功能单位、一个突变单位、一个重组单位。另外,基因在染色体按一定顺序、间隔一定距离线性排列;1941年,Beadle和Tatum提出“一个基因一种酶”假说,后修改为“一个基因一种多肽”;1955年,Benzer提出顺反子、突变子、重组子;1961年,Jacob和Monod提出操纵子模型至今。18现分离了一段DNA片段,可能含有编码多肽的基因的前几个密码子,该片段的序列组
40、成如下: 5 CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG 33 GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC 5(1) 哪一条链作为转录的模板链?(2分)3 GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC 5(2) mRNA的序列是什么?(3分)5 CGCAGGAUCAGUCGAUGUCCUGUG 3(3) 此mRNA能形成二级结构吗?(3分)不能,没有串联密码子。(4) 翻译从哪里开始?朝哪个方向进行?(2分)AUG 5向3此DNA最可能是从原核细胞还是真核细胞中分离的? (2分) 真核细胞19.简述DNA作为遗传物质的证据。(简答,5分) 答:细菌转化实验; 噬菌体侵染实验;
41、烟草花叶病毒的拆合实验20简述组蛋白、非组蛋白的特点。(简答,6分) 答:组蛋白是一类碱性蛋白质,进化上的极端保守性、无组织特异性、肽链上氨基酸分布的不对称性、组蛋白的修饰作用。非组蛋白:非组蛋白是一类酸性蛋白质,富含天冬氨酸和谷氨酸,带负电荷。具有多样性,组织专一性和种属多样性。21简述RNA聚合酶的主要功能和种类。(简答,8分) 答:原核生物相同RNA聚合酶催化三种RNA的合成:信使RNA(mRNA)、核糖体RNA(rRNA)及转运RNA(tRNA)。真核生物RNA聚合酶:1、RNA聚合酶,合成核糖体RNA(rRNA)前体45S,当成熟后会成为28S、18S及5,8S核糖体RNA,是将来核
42、糖体的主要RNA部份。2、RNA聚合酶,合成信使RNA(mRNA)的前体及大部份小核RNA(snRNA)以及微型RNA(microRNA)。3、RNA聚合酶,合成转运RNA(tRNAs)、rRNA 5S及其他可以在细胞核及原生质找到的细小的RNA。22基因转录是如何起始的?(8分) 答:首先启动, RNA聚合酶正确识别DNA模板上的启动子并形成二元闭合复合物,随即DNA构象发生重大变化,结合区双链解开,最初两个NTP结合并在这两个核苷酸之间形成磷酸儿酯键,即形成RNA聚合酶、DNA和新生RNA的三元复合物,转录即自此开始。对于真核生物,除了RNA聚合酶外,还有至少7种辅助因子参与。23简述DN
43、A复制的忠实性机制。(6分) 答:维持DNA复制高度忠实性有四个方面:(1)DNA聚合酶的选择作用;(2)DNA聚合酶的校正作用;(3)RNA引物的合成与切除是提高DNA复制准确性的重要因素;(4)DNA复制后错配碱基的修正(光复活修复、剪切修复、重组修复、SOS)。24以乳糖利用为例说明阻遏蛋白的负性调控和CAP的正性调控。(11分) 答:1,乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z,Y,A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶,透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I.2,阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子
44、处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶.所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控.3,CAP的正性调节:在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶.4,协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与
45、CAP的正调控两种机制,互相协调,互相制约.25一段从E.coli中分离出来的DNA单链序列为: 5GTAGCCTACCCATAGG3(1) 假设mRNA是由这段DNA单链的互补链作为模板转录而来,mRNA的序列怎样?(2分) 5GUAGCCUACCCAUAGG3(2) 如果转译从mRNA的5端开始,将得到什么样的多肽(假设并不需要起始密码 子,密码子见图)?当tRNAAla离开核糖体后,核糖体将结合什么样的tRNA?当Ala的氨基形成肽键后,如果有化学键断裂,是什么键? tRNAAla又将怎样? (4分) Val-Ala-Tyr-Pro tRNATyr 二酯键 tRNAAla移位至E位点(3
46、)这个RNA可编码多少种不同的肽?如果以另一条DNA单链作为模板,还会得到相同的肽吗? (6分)密码子简表:26.简述核小体结构要点。(简答,5分) 答:核小体是染色体的基本结构单位,由DNA和组蛋白(histone)构成,是染色质(染色体)的基本结构单位。由4种组蛋白H2A、H2B、H3和H4, 每一种组蛋白各二个分子,形成一个组蛋白八聚体,约200 bp的DNA分子盘绕在组蛋白八聚体构成的核心结构外面,形成了一个核小体。27参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能?(简答,6分) 答:mRNA:蛋白质合成的模板;tRNA:蛋白质合成的氨基酸运载工具;核糖体:蛋白质合成的场所;辅
47、助因子:(a)起始因子-参与蛋白质合成起始复合物形成;(b)延长因子-肽链的延伸作用;(c)释放因子一-终止肽链合成并从核糖体上释放出来。28简述细菌染色体基因组结构的一般特点。(简答,8分) 答:(1)细菌的染色体基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成细菌的染色体相对聚集在一起,形成一个较为致密的区域,称为类核(nucleoid)。(2)具有操纵子结构,其中的结构基因为多顺反子,受同一个调节区的调节。数个操纵子还可以由一个共同的调节基因(regulatorygene)即调节子(regulon)所调控。(3)在大多数情况下,结构基因在细菌染色体基因组中都是单拷贝,但是编码rRNA的基因往往是
48、多拷贝的。(4)和病毒的基因组相似,不编码的DNA部份所占比例比真核细胞基因组少得多。(5)具有编码同工酶的同基因(isogene)(6)在细菌基因组中编码顺序一般不会重叠,即不会出现基因重叠现象。(7)在DNA分子中具有各种功能的识别区域,这些区域往往具有特殊的顺序,并且含有反向重复顺序。(8)在基因或操纵子的终末往往具有特殊的终止顺序,它可使转录终止和RNA聚合酶从DNA链上脱落。29简述蛋白质生物合成过程。(8分) 答:蛋白质合成可分四个步骤,以大肠杆菌为例:(1)氨基酸的活化:游离的氨基酸必须经过活化以获得能量才能参与蛋白质合成,由氨酰-tRNA合成酶催化,消耗1分子ATP,形成氨酰-tRNA。(2)肽链合成的起始:由起始因子参与,mRNA与30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始复合物,整个过程需GTP水解提供能量。(3)肽链的延长:起始复合物形成后肽链即开始延长。首先氨酰-tRNA结合到核糖体的A位,然后,由肽酰转移酶催化与P位的起始氨基酸或肽酰基形成肽键,tRNAf或空载tRNA仍留在P位最后核糖体沿mRNA53方向移动一个密码子距离,A位上的延长一个氨基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位,全部过程需延伸因子EF-Tu、EF-Ts,能量由GTP提供。(4)肽链合成终止,当核糖体移至终止密码UAA、UAG或UG
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