【全程复习方略】2014年高考生物 6.2实验九DNA的粗提取与鉴定配套课件 新人教版

1、第2讲 实验九 DNA的粗提取与鉴定 1.DNA1.DNA的提取的提取（1 1）DNADNA和蛋白质在不同和蛋白质在不同NaClNaCl溶液中溶解度不同：溶液中溶解度不同： 2mol/L2mol/LNaClNaCl溶液溶液0.14mol/L0.14mol/LNaClNaCl溶液溶液溶解规律溶解规律DNADNA溶解溶解_蛋白质蛋白质部分发生部分发生盐析沉淀盐析沉淀_在在NaClNaCl溶液从溶液从2mol/L2mol/L降低的过降低的过程中，蛋白质溶解度逐渐增大程中，蛋白质溶解度逐渐增大 析出析出溶解溶解（2 2）_，但细胞中的某些物质可以溶于酒精，但细胞中的某些物质可以溶于酒精溶液，据此可进一

2、步提纯溶液，据此可进一步提纯DNADNA。2.DNA2.DNA的鉴定的鉴定DNA+_ DNA+_ 蓝色。蓝色。 DNADNA不溶于酒精溶液不溶于酒精溶液沸水浴沸水浴二苯胺二苯胺1.1.鸡的血细胞鸡的血细胞鸡的血细胞鸡的血细胞_，含有大量的，含有大量的DNADNA；材料来源容易获得。；材料来源容易获得。注意不能选用哺乳动物的血细胞，因为其红细胞高度分化，没有注意不能选用哺乳动物的血细胞，因为其红细胞高度分化，没有_，不能从中获得，不能从中获得DNADNA。2.2.植物细胞植物细胞由于具有细胞壁，不能使用吸水涨破的方法，需进行研磨，使细由于具有细胞壁，不能使用吸水涨破的方法，需进行研磨，使细胞破裂

3、。胞破裂。 含有细胞核含有细胞核细胞核细胞核 选材：选用含有细胞核的选材：选用含有细胞核的_ 操作：宰杀所选动物收集其血液，操作：宰杀所选动物收集其血液， 防止凝血，加入的抗凝剂是防止凝血，加入的抗凝剂是_溶液溶液 操作：将血液倒入离心管中离心操作：将血液倒入离心管中离心2 min2 min，除，除 去上清液去上清液 目的：使鸡血细胞快速沉淀，得到目的：使鸡血细胞快速沉淀，得到_1.1.制备血制备血 细胞液细胞液取血取血离心离心鸡血细胞鸡血细胞柠檬酸钠柠檬酸钠鸡血细胞液鸡血细胞液 （1 1）分别取鸡血细胞液）分别取鸡血细胞液5 mL5 mL 10 mL10 mL和蒸馏水和蒸馏水20mL20mL

4、，倒入，倒入 烧杯内混合，并用玻璃棒烧杯内混合，并用玻璃棒 _快速搅拌快速搅拌5 min5 min （2 2）纱布过滤，滤液中含）纱布过滤，滤液中含_和其他核物质和其他核物质 2.2.提取鸡提取鸡血细胞的血细胞的细胞核物细胞核物质质沿一个方向沿一个方向DNADNA3.3.溶解细胞核内的溶解细胞核内的DNADNA：向滤液中加入：向滤液中加入2 mol/L NaCl2 mol/L NaCl溶液溶液40 mL,40 mL, 玻璃棒沿一个方向搅拌玻璃棒沿一个方向搅拌1 min1 min4.4.析出含析出含DNADNA的黏稠物：溶液的黏稠物：溶液+ +蒸馏水蒸馏水 析出丝状物析出丝状物 （缓慢加蒸馏水直

5、至黏稠物不再增加为（缓慢加蒸馏水直至黏稠物不再增加为 止），此时止），此时NaClNaCl溶液被溶液被_5.5.滤取含滤取含DNADNA的黏稠物的黏稠物 目的：得到含目的：得到含DNADNA的黏稠物的黏稠物 轻轻搅拌轻轻搅拌沿一个方向沿一个方向稀释到稀释到0.14 mol/L0.14 mol/L6.6.将将DNADNA的黏稠物再溶解的黏稠物再溶解 操作：用操作：用_过滤过滤 目的：得到含目的：得到含DNADNA的滤液的滤液7.7.过滤含有过滤含有DNADNA的的NaClNaCl溶液溶液两层纱布两层纱布 使用的试剂：冷却的、体积分数使用的试剂：冷却的、体积分数 为为_ 操作：沿一个方向搅拌，出现

6、乳操作：沿一个方向搅拌，出现乳 白色丝状物，用玻璃棒将白色丝状物，用玻璃棒将 丝状物卷起丝状物卷起 目的：得到含杂质较少的目的：得到含杂质较少的DNADNA丝状物丝状物 8.8.提取含杂质提取含杂质 较少的较少的DNADNA95%95%的酒精溶液的酒精溶液 使用试剂：使用试剂：0.015mol/L0.015mol/L的的NaClNaCl溶液、溶液、_ 操作：操作： 现象：现象： 9.DNA9.DNA的鉴定的鉴定二苯胺二苯胺不出现蓝色不出现蓝色出现蓝色出现蓝色二苯胺二苯胺1 1制备鸡血细胞液时，为什么要倒掉上层血浆？制备鸡血细胞液时，为什么要倒掉上层血浆？提示：提示：去除上层血浆的目的是为了增加

7、去除上层血浆的目的是为了增加DNADNA的相对含量。的相对含量。 2.2.实验中出现数次相同操作，其操作的目的分别是什么？实验中出现数次相同操作，其操作的目的分别是什么？提示：提示：操操 作作目目 的的加蒸馏加蒸馏水水2 2次次（1 1）加入鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破）加入鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破（2 2）加到含）加到含DNADNA的浓的浓NaClNaCl溶液中，使溶液中，使NaClNaCl溶液的浓度溶液的浓度降至降至0.14 mol/L0.14 mol/L，有利于，有利于DNADNA的析出的析出用纱布用纱布过滤过滤3 3次次（1 1）过滤血细胞破裂液，提取细胞核物质（滤液）过滤血细

8、胞破裂液，提取细胞核物质（滤液）（2 2）滤取）滤取0.14 mol/L NaCl0.14 mol/L NaCl溶液中析出的溶液中析出的DNADNA（黏稠（黏稠物）物）（3 3）过滤含有）过滤含有DNADNA的的NaClNaCl溶液（滤液）溶液（滤液） 操操 作作目目 的的涉及到涉及到NaClNaCl溶溶液液4 4次次（1 1）加）加2 mol/L NaCl2 mol/L NaCl溶液，溶解提取的细胞核物质溶液，溶解提取的细胞核物质（2 2）（加蒸馏水稀释）（加蒸馏水稀释）0.14 mol/L NaCl0.14 mol/L NaCl溶液使溶液使DNADNA析出析出（3 3）加）加2 mol/L

9、 NaCl2 mol/L NaCl溶液，溶解滤取的溶液，溶解滤取的DNADNA黏稠物黏稠物（4 4）用）用0.015 mol/L NaCl0.015 mol/L NaCl溶液，用于鉴定溶液，用于鉴定DNADNA6 6次搅拌次搅拌（1 1）步骤）步骤2 2中搅拌的目的是加速血细胞破裂中搅拌的目的是加速血细胞破裂（2 2）步骤）步骤3 3、6 6、9 9中搅拌的目的是使中搅拌的目的是使DNADNA溶解溶解（3 3）步骤）步骤4 4、8 8中搅拌的目的是析出中搅拌的目的是析出DNADNA 3.3.实验中提取到较多实验中提取到较多DNADNA的关键步骤包括哪些操作？的关键步骤包括哪些操作？提示：提示：

10、（1 1）向鸡血细胞液中加入足量的蒸馏水）向鸡血细胞液中加入足量的蒸馏水, ,必须用玻璃棒沿必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出DNADNA。（2 2）提取含杂质较少的）提取含杂质较少的DNADNA时必须用冷酒精。时必须用冷酒精。（3 3）盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯和试管最好也是塑）盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯和试管最好也是塑料制品，因为玻璃制品表面带电荷，料制品，因为玻璃制品表面带电荷，DNADNA中的磷酸基带相反的电中的磷酸基带相反的电荷，会被吸附于玻璃表面，减少荷，会被吸附于玻璃表面，减少DNADNA含量

11、。含量。 1 1（20122012玉林模拟）甲、乙两图为玉林模拟）甲、乙两图为“DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定”实实验中涉及的两个操作装置图。相关叙述正确的是验中涉及的两个操作装置图。相关叙述正确的是( )( )A A图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaClNaCl溶液，但两者溶液，但两者浓度不同浓度不同B B图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝，另一支试管中的溶液不变蓝蓝，另一支试管中的溶液不变蓝C C图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使DNADNA

12、析出，并缠绕在玻璃棒析出，并缠绕在玻璃棒上上D D图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果【解析解析】选选D D。图甲烧杯中为酒精溶液，图乙试管中为。图甲烧杯中为酒精溶液，图乙试管中为NaClNaCl溶液，溶液，则则A A错误。图乙试管需要在沸水中加热错误。图乙试管需要在沸水中加热5 min5 min，则，则B B错误。图甲用错误。图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，卷起丝状物，则玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，卷起丝状物，则C C错误。图乙操作错误。图乙操作中所用的二苯胺最好现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，则中所用的二苯胺最好现配现用，

13、否则二苯胺会变成浅蓝色，则D D正确。正确。 2.(20112.(2011江苏高考江苏高考) )在利用鸡血进行在利用鸡血进行“DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定”的的实验中，相关叙述正确的是实验中，相关叙述正确的是( )( )A A用蒸馏水将用蒸馏水将NaClNaCl溶液浓度调至溶液浓度调至0.14 mol/L0.14 mol/L，滤去析出物，滤去析出物B B调节调节NaClNaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C C将丝状物溶解在将丝状物溶解在2 mol/L NaCl2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈溶液中，加入

14、二苯胺试剂即呈蓝色蓝色D D用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同 【解析解析】选选B B。在物质的量浓度为。在物质的量浓度为0.14 mol/L0.14 mol/L的的NaClNaCl溶液中，溶液中，DNADNA的溶解度最低，的溶解度最低，DNADNA存在于析出物中，故不能滤去析出物，存在于析出物中，故不能滤去析出物，A A项错项错误；利用误；利用DNADNA与与RNARNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取异，提取DNADNA，去除其他成分，去除其他成分，B B项正确；进行项正确；进

15、行DNADNA鉴定时，加入鉴定时，加入二苯胺试剂后还需经沸水浴加热才能出现蓝色，二苯胺试剂后还需经沸水浴加热才能出现蓝色，C C项错误；用菜项错误；用菜花作为实验材料时需先用洗涤剂溶解细胞膜，花作为实验材料时需先用洗涤剂溶解细胞膜，D D项错误。项错误。 3.3.在在“DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定”实验中，将第三次过滤获得的纱布实验中，将第三次过滤获得的纱布上含有的上含有的DNADNA的黏稠物的黏稠物( (含有较多杂质含有较多杂质) )分别处理如下：分别处理如下：上述操作过程正确的是上述操作过程正确的是( )( )A AB BC CD D 序号序号操作过程操作过程放入放入2 mol

16、/L2 mol/L的的NaClNaCl溶液，搅拌后过滤溶液，搅拌后过滤再加再加0.14 mol/L0.14 mol/L的的NaClNaCl溶液，搅拌后过滤溶液，搅拌后过滤再加入冷却的、体积分数为再加入冷却的、体积分数为95%95%的酒精溶液，的酒精溶液，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物 【解析解析】选选C C。第三次过滤后纱布上的是粗提取的。第三次过滤后纱布上的是粗提取的DNADNA，此，此DNADNA还还含有杂质，因此将其溶于含有杂质，因此将其溶于2 mol/L2 mol/L的的NaClNaCl溶液中，再进行过滤，溶液中，再进行过滤，以除去不溶于以除去不溶

17、于2 mol/L2 mol/L的的NaClNaCl溶液的杂质。然后向滤液中加入冷溶液的杂质。然后向滤液中加入冷却的体积分数为却的体积分数为95%95%的酒精即可析出的酒精即可析出DNADNA，然后挑出，然后挑出DNADNA进行鉴定。进行鉴定。4 4某同学以菜花为实验材料，进行某同学以菜花为实验材料，进行“DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定”实验，实验，步骤如下：步骤如下：步骤一：称取步骤一：称取30 g30 g菜花，去梗取花，切碎。菜花，去梗取花，切碎。步骤二：将碎菜花放入研钵中，倒入步骤二：将碎菜花放入研钵中，倒入10 mL10 mL研磨液，充分研磨研磨液，充分研磨10 min10 m

18、in。步骤三：在漏斗中垫上滤纸，将菜花研磨液过滤到烧杯中。在冰步骤三：在漏斗中垫上滤纸，将菜花研磨液过滤到烧杯中。在冰箱中放置几分钟，取上清液。箱中放置几分钟，取上清液。步骤四：将一倍体积的上清液倒入两倍体积的某溶液中，并用玻步骤四：将一倍体积的上清液倒入两倍体积的某溶液中，并用玻璃棒缓缓地、轻轻地搅拌溶液，将絮状物缠绕在玻璃棒上。璃棒缓缓地、轻轻地搅拌溶液，将絮状物缠绕在玻璃棒上。 请回答下列问题：请回答下列问题：（1 1）请指出并改正该同学实验操作中的错误）请指出并改正该同学实验操作中的错误:_:_。（2 2）步骤二不能采用加入蒸馏水使细胞吸水涨破的方法，原因）步骤二不能采用加入蒸馏水使细

19、胞吸水涨破的方法，原因是是_；为使研磨充分，可以加入；为使研磨充分，可以加入_；为；为溶解溶解DNADNA，加入的研磨液中氯化钠浓度应为，加入的研磨液中氯化钠浓度应为_。（3 3）步骤四中所用两倍体积的某溶液为）步骤四中所用两倍体积的某溶液为_。（4 4）简要说明鉴定步骤四所得絮状物是）简要说明鉴定步骤四所得絮状物是DNADNA的基本实验设计思的基本实验设计思路路:_:_。 （5 5）该同学在上述实验的基础上，想进一步探究絮状物中是否）该同学在上述实验的基础上，想进一步探究絮状物中是否含有蛋白质。含有蛋白质。他还需要准备的试剂有他还需要准备的试剂有_、_。请你帮助该同学对步骤四的絮状物中是否含

20、有蛋白质给予鉴定。请你帮助该同学对步骤四的絮状物中是否含有蛋白质给予鉴定。 分组分组实验操作实验操作实验结果实验结果实验组实验组_+1 mL_+1 mL蒸馏水蒸馏水各加入各加入_两试管都呈现两试管都呈现_色，说明色，说明_；实验组试管；实验组试管_，对照组试管对照组试管_，说明，说明_ 对照组对照组_+1 mL_+1 mL蒸馏水蒸馏水【解析解析】本实验与用鸡血细胞提取本实验与用鸡血细胞提取DNADNA的方法相似，只是由于植的方法相似，只是由于植物细胞具有细胞壁，所以使细胞破裂释放出物细胞具有细胞壁，所以使细胞破裂释放出DNADNA的方法是不同的，的方法是不同的，要进行步骤二中充分研磨。根据教材实验，加入二氧化硅可以使要进行步骤二中充分研磨。根据教材实验，加入二氧化硅可以使研磨较为充分，研磨较为充分，DNADNA在在2 mol2 molL L氯化钠溶液中溶解度较高。析出氯化钠溶液中溶解度较高。析出DNADNA时所加入的某溶液应是体积分数