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1、会计学1实验三质粒实验三质粒DNA的酶切的酶切第1页/共36页第2页/共36页Sma:5 -CCCGGG-3 5CCC GGG.3 3 -GGGCCC-5 3GGG CCC.5第3页/共36页第4页/共36页第5页/共36页次都要用新的灭菌吸管头,DNA要尽量纯，有一定的纯度。第6页/共36页第7页/共36页己的处于不同部位的限制位点，其效率也有明显差异，这种现象称内切酶的底物位点优势效应。第8页/共36页缓冲液缓冲液 NaCl TrisHCl(pH7.5) MgCl2 DTT低离子强度低离子强度 010 mmolL 10 mmolL 10 mmolL 1 mmolL中离子强度中离子强度 50

2、 mmolL 10 mmolL 10 mmolL 1 mmolL高离子强度高离子强度 100 mmolL 50 mmolL 10 mmolL 1 mmolL第9页/共36页各种缓冲液配方第10页/共36页各种酶对不同缓冲液的相对活性第11页/共36页单酶切或双酶切缓冲液的选择表第12页/共36页第13页/共36页注：R=G, A; Y=C, T; M=A, C; K= G, T; S=G, C; W=A, T; H=A,C T; B=G, T, C; V=G,C,A; D=G,A,T; N=A,C,G,T第14页/共36页Promega公司酶切缓冲液的选取表第15页/共36页第16页/共36页第17页/共36页第18页/共36页3.灭菌的离心管和移液器Tip头第19页/共36页第20页/共36页第21页/共36页第22页/共36页第23页/共36页第24页/共36页第25页/共36页第26页/共36页第27页/共36页第28页/共36页第29页/共36页第30页/共36页第31页/共

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