Y-120 犬和大鼠6个月长毒报告

1、资料项目编号：23药品名称：Y-120资料项目名称：长期毒性试验资料及文献资料研究机构名称：第二军医大学药学院地址：上海市杨浦区国和路325号电话：究机构主要研究者姓名（签字）： 李铁军试验者姓名：李铁军 陆国才 张淑英 邱 彦 焦 勇试验起止日期：2004年12月2004年7月原始资料保存地点：第二军医大学药学院联系人姓名：李铁军联系电话品注册申请人名称： Y-120 po对犬长期毒性试验摘要 目的：根据中药新药研究指南、新药审批办法有关中药部分的修订与补充规定等有关文件的要求，对Y-120进行犬长期毒性试验，观察Beagle犬连续po

2、 Y-120 6个月后由于蓄积作用对机体产生的毒性反应，提供在高剂量给药情况下出现毒副反应的靶器官及其损伤程度，了解毒性作用的延迟反应和可逆性，确定无毒性反应剂量，为拟定人用安全剂量提供参考。观察连续180天po Y-120对犬的长期毒性。方法：32条健康犬分别按体重随机分为4组：空白对照组、0.1 g/kg组、1.0 g/kg组、2.5 g/kg组，每组8条犬，雌雄各半。每天上午8时po给药，连续180天（周日休息），空白对照组po等容量溶媒。给药容积为10 ml/kg。末次给药后24h处死24条犬做病理解剖，另8条犬停药后继续观察30天。观察症状和检测指标包括：（1）一般症状及指标：观察犬

3、的外观，行为，活动，步态，精神，食欲，大、小便，皮毛，有无流涎，恶心、呕吐，有无死亡等。一般指标包括体重、肛温、呼吸、瞳孔共4项。（2）心电图：肢体II导心电图之心率、P波电压、P-R间期、R波电压、QRS时间、T波电压和Q-T间期共7项指标。（3）血液学指标：红细胞（RBC）计数、血红蛋白（Hb）定量、红细胞压积（Hct）、红细胞平均容积（MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）、血小板（Plat）计数、网织红细胞、白细胞（WBC）计数及分类（粒细胞、淋巴细胞和单核细胞）和凝血时间（CT）共13项。（4）血液生化指标：丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨

4、酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（Tbill）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、血糖（Glu）、总胆固醇（Tch）、-谷氨酰转移酶(-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG) 、肌酸磷酸激酶(CPK)、Ca2+、P+、K+、Na+、Cl-、凝血酶时间（TT）、部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间(PT)、血浆纤维蛋白原含量(Fib)、血小板聚集率，共检测24项指标。（5）尿液检查项目：葡萄糖、蛋白质、胆红素、尿胆原、红细胞、酮体、亚硝酸盐和白细胞共8项。（6）骨髓检查：观察各系各阶段细胞有无改变，增生程度。（7）病理检查：大体

5、观察各脏器有无明显病变。对心、肝、脾、肺、肾、脑、肾上腺、胸腺、甲状腺、前列腺、睾丸、附睾、子宫及卵巢14个脏器称重，分别计算各脏器的相对重量。（8）病理组织学检查：观察心、肝、脾、肺、肾、脑（大脑、小脑、脑干）、垂体、胃、小肠、大肠、气管、食管、主动脉、胆囊、唾液腺、甲状腺、甲状旁腺、肾上腺、胸腺、胰腺、淋巴结（给药局部淋巴结、肠系膜淋巴结）、前列腺、膀胱、雄性动物睾丸、雄性动物附睾、雌性动物子宫、雌性动物卵巢、雌性动物乳腺、眼球、视神经、坐骨神经、脊椎（颈、胸、腰段）和注射部位共33项有无病变。结果：（1）一般症状：给药后各组犬外观、行为、活动、步态、精神、食欲、大小便和皮毛等无明显变化，

6、也无恶心呕吐, 注射部位无水肿、出血或感染等变化。体重、食量、肛温、呼吸、瞳孔无明显变化，无活动受限、震颤和共济失调等症状。（2）心电图：心率、P波电压、P-R间期、R波电压、QRS时间、ST段、T波电压和Q-T间期在给药前后或与空白对照组相比，各给药组均无明显变化。（3）血液学指标：RBC、Hb、Hct、MCV、MCH、MCHC、网织红细胞、WBC及分类和CT与d0及空白对照组相比，各给药组均无明显差异。与空白对照组相比，中、低剂量组d90 Plat有差异（P0.05)，但均在正常范围内波动。（4）血液生化指标：与d0及空白对照组相比，给药组ALT、ALP、Tbill、BUN、Cr、Tch、

7、Glu、TP、Alb、g-GT、LDH、TG、CPK、Ca2+、P+、K+、Na+、Cl-、TT、APTT、PT、Fig无明显差异。与空白对照组相比，低剂量组d60 AST、高剂量组d30 AST有差异（P0.05)，但均在正常范围内波动。与空白对照组和d0相比，低、中、高剂量组d30、d60、d90给药后30 min采集的血样中，血小板聚集率明显降低，且存在量效关系，给药后24 小时血小板聚集率恢复正常。(5)尿液检查：葡萄糖、蛋白质、胆红素、尿胆原、红细胞、酮体、亚硝酸盐和白细胞给药前后无明显差异。（6）骨髓检查：各系各阶段细胞增生正常，无明显形态学及比例上的改变。（7）病理检查：各脏器大

8、体观察无病理变化。心、肝、脾、肺、肾、脑、肾上腺、胸腺、甲状腺、前列腺、睾丸、附睾、子宫及卵巢的相对重量各组无明显差异。（8）病理组织学检查：空白对照组、低剂量组、中剂量组及高剂量组均有部分动物肺、脾急性淤血，肝、肾实质细胞轻度水样变性或脂肪变性，肝小叶内或汇管区炎细胞浸润，肺脏灶性出血，d90各组均可见部份动物注射部位出现局部炎症反应，d120注射部位炎症反应基本消失。上述病变分布在包括空白对照组在内的各组动物中，结合心、肝、肾相关的各项生化指标检测未见明显异常，故分析认为这些病变的出现可能是动物的自身感染或处死过程造成的人为损害，非药物所致。注射部位局部炎症可能是给药时针头机械刺激及动物不

9、配合而引起的药物渗漏造成的。结论：Y-120 0.1 g/kg组、1.0 g/kg组、2.5 g/kg连续po Beagle犬180天，对犬血液系统有一定的药理毒理作用，主要表现为给药后使血小板聚集率下降，这种作用是可逆的。Y-120对犬的安全剂量拟定为 1.0 g/kg。1 试验目的观察Y-120连续灌胃6个月对犬产生的毒性反应及其严重程度，了解毒性反应的靶器官及其损害的可逆性，确定无毒性反应剂量，为拟定人体应用的安全剂量提供参考依据。2 受试物3.1 名称：Y-1203.2 批号：3.3 理化性质： 3.4 贮存条件：室温避光密闭保存3.5 包装：磨口玻璃瓶3.6 提供单位：第二军医大学药

10、学院3.7 配制方法：临用前用蒸馏水溶解，配成所需浓度。3 动物3.1 来源、种属、品系、实验前预处理由上海第二军医大学实验动物中心提供。动物合格证号： SCXK(沪)-2002-006, 等级：普通级。实验前在动物房驯养一个月。经一般行为观察、五联疫苗接种、肠道驱虫、二次血液学、血液生化和心电图检查。选用符合国家普通级实验犬作为实验动物1。3.2 年龄:实验开始时为68月龄。3.3 体重:实验开始时为6.58.2 kg。3.4 性别:雌雄各半。3.5 每组动物数：每组8条犬，雌雄各半。3.6 饲养条件：饲养于不锈钢笼内，每笼一只。每天每只动物喂犬专用饼干500 g(由上海松江乳业提供)左右。

11、上、下午各喂食一次，自由饮水。动物房通风良好，自然光照。温度20±5，湿度与大气一致。4 剂量4.1 剂量设置及其理由：根据药效学剂量并参考大、小鼠急性毒性试验结果，给药组共设三个剂量组，低、中、高给药剂量分别为0.1、1.0和2.5 g/kg。另设一个空白对照组。空白对照组po 生理盐水。4.2 给药容积：10 ml/kg, 低、中、高给药浓度分别为0.01、0.1和0.25 g/ml。5 给药期：180天6 恢复期：30天7 给药途径：po8 方法1,2：每天上午8时，各组动物按不等浓度等容量po给药。给药前、d30、d90、d180及给药结束后 24 h及停药后30天分别记录心

12、电图II导联，测血液学、血液生化、尿液指标。其中给药前测2次取均数为d0值,其余时间点测1次。一般症状中体重、肛温、呼吸和瞳孔每2周观察记录一次，其余一般症状每天观察记录。9 观察指标1,29.1 死亡率：如有死亡，记录死亡数，及时解剖了解死因。9.2 一般症状：观察犬的外观，行为，食量，体重，活动，步态，精神，食欲，大便，小便，肛温，呼吸，瞳孔，皮毛，有无流涎、恶心、呕吐、震颤、共济失调。9.3 心电图：犬自然站立于犬台上，用 XD-7100型心电图机描记肢体II导联。观察心率、P波电压、P-R间期、R波电压、QRS时间、T波电压和Q-T间期共7项指标的变化。9.4 血液学：每只犬取静脉抗凝

13、血，用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产的BC-3000型全自动血液细胞分析仪测定：红细胞（RBC）计数、血红蛋白（Hb）定量、红细胞压积（Hct）、红细胞平均容积（MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）、血小板（Plat）计数、白细胞（WBC）计数及分类（粒细胞、淋巴细胞和单核细胞）共10项。另用2滴血记录凝血时间（CT），再另取100 l全血与1%煌焦油生理盐水100 l混匀，推片后进行网织红细胞检测。共检测13项指标。9.5 血液生化：静脉取血，分离血清，用西班牙产BTS-370 Plus全自动生化分析仪，测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨

14、酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（Tbill）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、血糖（Glu）、总胆固醇（Tch）、-谷氨酰转移酶(-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG) 、肌酸磷酸激酶(CPK)、Ca2+、P+，用美国Medica公司生产的EasyLyte型钠钾氯电解质分析仪测血清K+、Na+、Cl-。同时取抗凝血，分离血浆，用北京产普利生C2000-4型血凝仪检测凝血酶时间（TT）、部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间(PT)、血浆纤维蛋白原含量(Fib)。用上海产TYXN-96多功能智能血液凝聚仪测血小板聚集率。共检

15、测24项指标。9.6 尿液分析：用日本京都第一科学公司生产的micro AUTION MA4260自动尿液分析仪，测试尿液葡萄糖、蛋白质、胆红素、尿胆原、红细胞、酮体、亚硝酸盐和白细胞共8项。9.7 骨髓检查：于解剖的同时在胸骨取材，涂片，染色，镜检。9.8 病理检查：末次给药后24 h 腹腔注射巴比妥钠1 ml/kg麻醉，用颈总动脉放血及气管切断法每组处死一半犬，其余犬停药观察30天后同法处死病检。大体观察各脏器有无明显病变。对心、肝、脾、肺、肾、脑、肾上腺、胸腺、甲状腺、前列腺、睾丸、附睾、子宫及卵巢14个脏器称重，分别计算各脏器的相对重量。9.9 组织学检查：取心、肝、脾、肺、肾、脑（大

16、脑、小脑、脑干）、垂体、胃、小肠、大肠、气管、食管、主动脉、胆囊、唾液腺、甲状腺、甲状旁腺、肾上腺、胸腺、胰腺、淋巴结（给药局部淋巴结、肠系膜淋巴结）、前列腺、膀胱、雄性动物睾丸、雄性动物附睾、雌性动物子宫、雌性动物卵巢、雌性动物乳腺、眼球、视神经、坐骨神经、脊椎（颈、胸、腰段）和注射部位共33项。观察各剂量组和对照组的病理变化，以了解受试物的剂量-毒性关系。9.10 统计处理方法：组间比较用t检验，与d0比较用配对t检验。10 结果10.1 一般指标给药后各组犬外观、行为、活动、步态、精神、食欲、大小便和皮毛等无明显变化，也无恶心呕吐，无活动受限、震颤和共济失调等症状。体重称量结果见表1，体

17、温测量结果见表2，呼吸和瞳孔测量结果分别见表3和表4。从表14可见，与空白对照组相比及与d0相比，给药各剂量组体重、肛温、瞳孔、呼吸均无明显差异。表明长期给予Y-120对犬的体重、肛温、呼吸、瞳孔无明显影响。10.2 心电图心电图之心率、P波电压、P-R间期、R波电压、QRS时间、T波电压和Q-T间期测量结果见表511。表中无论是给药组与对照组，还是给药后与给药前相比，均无统计学差异 (P>0.05); ST段各组也未见异常抬高或压低。表明长期给予Y-120对犬的心率，心电图之P波电压、P-R间期、R波电压、QRS时间、ST段、T波电压和Q-T间期均无明显影响。10.3 血液学检查红细胞

18、（RBC）计数结果见表12、血红蛋白（Hb）含量测定结果见表13、红细胞压积（HCT）测定结果见表14、红细胞平均容积（MCV）测定结果见表15、红细胞平均血红蛋白含量(MCH) 测定结果见表16、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）测定结果见表17、血小板（Plat）计数结果见表18、白细胞（WBC）及其分类计数(淋巴细胞、粒细胞及单核细胞)结果分别见表1922、全血凝固时间（CT）测定结果见表23、网织红细胞计数见表24。从表中可见，RBC、Hb、Hct、MCV、MCH、MCHC、WBC及分类、CT及网织红细胞与d0及空白对照组相比，各给药组均无明显差异。与空白对照组相比，低剂量组及中剂量组

19、d90 Plat有差异（P0.05），但均在正常范围内波动。表明长期给予Y-120对RBC、Hb、Hct、MCV、MCH、MCHC、Plat、WBC及分类、CT及网织红细胞无明显影响。10.4 血液生化指标ALT测定结果见表25、AST测定结果见表26、ALP测定结果见表27、Tbill测定结果见表28、BUN测定结果见表29、Cr测定结果见表30、TP测定结果见表31、Alb测定结果见表32、Glu测定结果见表33、Tch测定结果见表34、LDH测定结果见表35、g-GT测定结果见表36、TG测定结果见表37、CPK测定结果见表38、Ca2+测定结果见表39、P+测定结果见表40、K+测定结

20、果见表41、Na+测定结果见表42、Cl-测定结果见表43、TT测定结果见表44、APTT测定结果见表45、PT测定结果见表46、Fig测定结果见表47、血小板聚集率测定结果见表48。从表中可见，与d0及空白对照组相比，给药组ALT、ALP、Tbill、BUN、Cr、Tch、Glu、TP、Alb、g-GT、LDH、TG、CPK、Ca2+、P+、K+、Na+、Cl-、TT、APTT、PT、Fig无明显差异。与空白对照组相比，低剂量组d60 AST、高剂量组d30 AST有差异（P0.05)，但均在正常范围内波动。与空白对照组和d0相比，低、中、高剂量组d30、d60、d90给药后30 min采集

21、的血样中，血小板聚集率明显降低，且存在量效关系，给药后24 小时血小板聚集率恢复正常。表明长期给予Y-120对ALT、AST、ALP、Tbill、BUN、Cr、TP、Alb、Glu、Tch、LDH、g-GT、TG、Ca2+、P+、K+、Na+、Cl-、TT、APTT、PT、Fig无明显影响，给药后30 min可使血小板聚集率下降，给药后24小时恢复正常。10.5 尿液检查尿液中葡萄糖、蛋白质、胆红素、尿胆原、红细胞、酮体、亚硝酸盐和白细胞8项检查结果见表4953，从表中可见，各项指标均在正常范围内波动。表明长期给予Y-120对犬尿中上述指标无明显影响。10.6 骨髓检查给药180天后、停药30

22、天后，各剂量组有核细胞增生活跃，巨核细胞增生活跃，以颗粒型为多，成熟型细胞胞浆丰富，周边可见血小板形成，全片可见巨核细胞5080个。粒细胞系各阶段细胞形态、比例基本正常，增生活跃，核浆比例正常，胞浆内未发现中毒颗粒及破溃。粒红比例为(24): 1，在正常范围。红系增生活跃，各阶段形态比例无异常，核浆发育均衡，成熟红细胞大小均一，染桔黄色，无寄生虫感染。淋巴、单核系各阶段细胞形态比例基本正常，未发现异常增生细胞。未发现其它骨髓异常细胞增生。上述结果表明，Y-120 po犬180天，对犬骨髓系无明显影响。10.7 脏器重量停药时各组的绝对脏器重量结果见表54，从表中可见，各组无统计学差异。相对脏器

23、重量结果见表55，从表中可见，三个剂量组相对脏器重量与对照组相比，均无显著的差异（P>0.05）。停药30天后各组的绝对脏器重量结果见表56，相对脏器重量结果见表57。从二表可见，各组间均无统计差异。结果表明长期给予Y-120对犬的各脏器无明显影响。10.8 组织学观察病理组织学观察主要脏器病变结果见表58。空白对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组d90及空白对照组、高剂量组d120的心、肝、脾、肺、肾、脑及注射部位组织照片见图142。各主要脏器病理组织学观察结果如下：心脏：各组心腔内未见血栓形成，心内膜无增厚。个别动物见有心肌细胞空泡变性、肌浆溶解等病理变化（编号：2、9、13）。间质

24、无明显水肿，部分动物心肌间质散在性或灶性出血等现象（编号：5、8）。心外膜未出现充血、出血、炎细胞浸润等病理变化。肝脏：肝小叶组织学结构正常，未见小叶结构改建。未见明显的肝内出血，所有动物肝细胞有轻度水肿（编号：3、4、5、9、10、11、12、14、15、17、18、19）或脂肪变性（编号：22、24、28、31），个别伴有点状或灶性坏死（编号：23、25、27、29、32）。汇管区无增宽，无纤维结缔组织增生及炎细胞浸润。未见胆管上皮增生。余各剂量组无特殊病理学改变。肺脏：个别动物可见肺泡腔灶、片状出血（编号：4）。少数动物伴有肺泡壁轻度纤维组织增生（编号：3、4、5、6、9、10、11、1

25、2、14、15、17、18、19、22、23、24、28、29、32）。余无特殊病理学改变。脾脏：脾小体组织结构正常，脾小体数量及淋巴细胞数量未见减少。脾索无增宽，脾窦无扩张充血、出血。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。肾脏：肾小球组织结构正常，未见萎缩、纤维化、玻璃样变及肥大等病变。肾小管未见扩张，上皮细胞无变性、坏死。肾间质内无血管扩张充血、出血，个别动物间质见肉芽肿性血管眼炎（编号：3）。余无特殊病理学改变。大脑：神经细胞未见胞体肿胀、胞核固缩、坏死等病理改变。未见软化灶形成。胶质细胞无增生，间质无水肿、充血、出血、炎细胞浸润等病变。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。脊髓：脊髓前角运

26、动神经元、后角感觉神经元未见胞体肿胀、胞核固缩、坏死等病理改变，未见神经胶质细胞增生、神经纤维脱髓鞘等病变，无炎细胞浸润。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。视神经：未见神经纤维脱髓鞘、神经束结构崩解等病理改变，无炎细胞浸润、血管扩张充血、出血等病变。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。肾上腺：球状带、束状带、网状带、髓质未见实质细胞的变性、坏死、炎细胞浸润、血管扩张充血、出血等病理改变。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。胸腺：皮质、髓质组织结构正常，髓质内可见胸腺小体。未见细胞的变性、坏死、充血、出血等病理改变，淋巴细胞数量未见减少。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。胰腺：外分泌部未见腺

27、泡上皮细胞变性、坏死、炎细胞浸润、充血、出血、水肿等病理改变。内分泌部胰岛细胞未见变性、坏死及炎细胞浸润等变化。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。甲状腺：滤泡上皮细胞无变性、坏死及增生等变化，滤泡内胶质无异常吸收。间质无血管扩张充血、出血、炎细胞浸润。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。脑垂体：腺垂体、神经垂体的腺细胞、神经胶质细胞未见变性、坏死、炎细胞浸润等病理改变，间质无血管扩张充血、出血。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。睾丸（带附睾）：曲精小管各级生精上皮细胞发育正常，未见变性、坏死、脱落等病变。间质未见血管扩张充血、出血、炎细胞浸润。附睾组织结构正常。对照组与高剂量组之间比较无明

28、显差异。前列腺：腺上皮细胞未见变性、坏死、脱落，腔内无坏死物及渗出物。间质无炎细胞浸润、血管扩张充血、出血等病变。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。卵巢：各级卵泡发育正常，可见成熟卵泡。黄体组织结构正常，未见细胞变性、坏死、炎细胞浸润等病变。髓质未见血管扩张充血、水肿、出血及炎细胞浸润。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。子宫：内膜上皮细胞、腺体结构正常，未见细胞变性、坏死、炎细胞浸润等病理变化。肌层、浆膜层结构正常。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。淋巴结：皮质组织结构正常，淋巴小结、副皮质区无萎缩、结构破坏，淋巴细胞数量未见减少。髓索无增宽，髓窦无扩张。对照组与高剂量组之间比较无明显差

29、异。骨髓：红细胞系、中性粒细胞巨噬细胞系、巨核细胞系、嗜酸细胞系未见亢进、抑制、变异等病理改变，血窦无扩张充血、出血。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。膀胱：粘膜层未见糜烂、溃疡形成。移行上皮细胞无变性、坏死、脱落、炎细胞浸润等病理变化。肌层、外膜组织结构正常。腔内未见渗出物、结石、寄生虫。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。胃：粘膜面无溃疡及糜烂形成。粘膜层上皮细胞未见变性、坏死、脱落、炎细胞浸润。粘膜下层、肌层、外膜组织结构正常，未见明显病理变化。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。十二指肠：无溃疡及糜烂形成。粘膜层上皮细胞未见变性、坏死、脱落，粘膜下层、肌层、外膜组织结构正常，未见明显

30、病理变化。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。回肠：无粘膜糜烂及溃疡形成。粘膜层上皮细胞未见变性、坏死、脱落，粘膜下层、肌层、外膜组织结构正常，未见明显病理变化。结肠：无粘膜糜烂及溃疡形成。粘膜层上皮细胞未见变性、坏死、脱落及炎细胞浸润，粘膜下层、肌层、外膜结构正常，未见明显病理变化。对照组与高剂量组之间比较无明显差异。上述病理组织学观察结果表明：1）存在内脏器官淤血性及非特异性的出血性改变；肺泡腔和气管的灶性出血；肝脏的非特异性水肿或脂肪变性；肾间质的非特异性轻度性炎症等病变情况，这些病变的严重程度或发生率缺少药物剂量依赖关系，而且相关的各项生物化学功能等指标均在正常值范围，故分析认为这些病

31、变属动物自身感染或处死及组织处理等所引发的人为致死性改变，并非药物的毒副作用，肺泡出血及气管积血则系动物处死挣扎吸入所致。2）比格犬Y120灌胃给药毒性试验中，对其心脏、肝脏、肾脏、脾脏、大脑、脊髓、视神经、肾上腺、胸腺、甲状腺、胰腺、脑垂体、睾丸（带附睾）、前列腺、卵巢、子宫、淋巴结、骨髓、膀胱、胃、十二指肠、回肠、结肠等4个脏器基本无组织学影响。11.0 结果评估Y-120 0.12.5 g/kg 连续po Beagle犬180天，个别指标如低、中剂量组d90 Plat有差异（P0.05)，低剂量组d60 AST、高剂量组d30 AST与空白对照组相比有差异（P0.05)，但均在正常范围内

32、波动。未发现该药对犬一般症状、肢体II导联心电图有明显影响，未发现该药对犬血液学指标有明显影响；与空白对照组和d0相比，低、中、高剂量组d30、d60、d90给药后30 min采集的血样中，血小板聚集率明显降低，且存在量效关系，给药后24 小时血小板聚集率恢复正常;Y-120对尿液检查指标也无明显影响；骨髓检查未见异常骨髓像；主要脏器绝对重量和相对重量各组无明显差异；病理组织学检查提示除内脏器官淤血性改变外，仅发现部分受试犬的肝、肾实质细胞见有水肿变性、脂肪变性及间质性炎症，部分动物肺泡腔有局灶性出血，d90各组均可见部份动物注射部位出现局部炎症反应，d120注射部位炎症反应消失。上述病变分布

33、在包括空白对照组在内的各组动物中，结合心、肝、肾相关的各项生化指标检测未见明显异常，故分析认为这些病变的出现可能是动物的自身感染或处死过程造成的人为性损害，非药物所致。注射部位局部炎症可能是给药时针头机械刺激及动物不配合而引起的药物渗漏造成的。与空白对照组及d0相比，低剂量组d30、d60及d90给药后30 min血小板聚集率降低显著（P0.05），而中、高剂量组d30、d60及d90给药后30 min血小板聚集率降低非常显著（P0.01），因此Y-120 po对犬的安全剂量拟定为 5 g/kg为宜12.0 结论Y-120 0.12.5 g/kg连续po Beagle犬180天，对犬血液系统有

34、一定的药理毒理作用，主要表现为给药后使血小板聚集率下降，这种作用是可逆的。Y-120对犬的安全剂量拟定为 1.0g/kg，临床使用时要注意监测血小板聚集率等血液学指标。参考文献1. 方喜业主编. 医学实验动物学. 北京:人民卫生出版社, 1995:155156.2. 中药、天然药物长期毒性研究技术指导原则. 中华人民共和国食品药品监督管理局药品审评中心，2004.表1 Y-120 po对犬长期毒性试验体重的影响(x±s，kg)犬号d0d30d90d180d210空白对照 14.34.96.88.4 25.05.77.79.8 36.26.68.411.3 47.07.69.311.9

35、 55.05.67.510.5 64.85.56.88.6 75.15.88.110.611.3 86.06.48.312.512.8x5.436.017.8610.4512.05s0.890.830.851.471.06低剂量组 94.75.37.110.2104.85.88.310.2114.95.98.110.7125.16.18.511.0135.66.48.610.911.2145.56.38.610.9156.07.08.810.8166.87.49.812.212.7x5.436.288.4810.8611.95s0.710.670.750.621.06中剂量组174.76.27

36、.79.5185.26.18.211.0195.16.27.79.2205.46.59.312.613.0215.56.27.99.710.2226.06.88.711.7235.86.47.811.0246.67.18.39.8x5.546.448.2010.5611.60s0.590.350.561.201.98高剂量组254.85.67.29.0265.26.39.212.7275.16.28.311.0285.66.69.012.0295.46.37.29.8305.76.27.510.311.0315.56.38.211.412.5326.27.08.612.4x5.446.318.

37、1511.0811.75s0.420.390.781.301.06表2 Y-120 po对犬长期毒性试验肛温的影响（x±s，）犬号d0d30d90d180d210空白对照 138.638.738.438.9 238.638.438.538.9 338.338.638.739.1 438.138.238.239.1 538.738.338.339.0 638.338.738.839.0 738.238.738.739.338.9 838.638.238.739.038.9x38.4338.4838.5439.0438.90s0.230.230.220.130.00低剂量组 938.63

38、8.238.839.11038.238.538.638.91138.338.538.838.91238.138.438.739.01338.438.538.538.839.01438.538.638.839.01538.438.438.338.81638.538.538.438.939.5x38.3838.4538.6138.9339.25s0.170.120.200.100.35中剂量组1738.338.738.538.81838.238.838.438.81938.338.638.438.92038.438.538.339.038.92138.738.338.539.239.12238.7

39、38.538.639.02338.838.638.839.22438.238.338.439.1x38.4538.5438.4939.039.00s0.240.180.160.160.14高剂量组2538.538.338.538.82638.438.538.638.92738.138.738.739.02838.738.938.839.32938.238.738.739.13038.438.738.639.039.53138.538.738.539.039.43238.238.538.739.3x38.3838.6338.6439.0539.45s0.200.180.110.180.07表3

40、Y-120 po对犬长期毒性试验呼吸的影响（x±s，次/分）犬号d0d30d90d180d210空白对照 122252733 228262530 321292031 422272930 526252432 624272533 72629253437 82224273239x23.926.525.331.938s2.51.92.71.51.4低剂量组 92323252610253025271125292425122725292713282523223014282023241529282529162924263436x26.825.52526.8*33s2.23.31.93.64.2中剂

41、量组172428273218242526341926262531202624243035212326282938222428293023242728282423302729x24.326.826.830.436.5s1.21.91.71.92.1高剂量组252932262626292925282728252427282926232329302722243029282425293132292529333229202428x29.42724.126.3*31s1.23.51.22.12.8 * 与空白对照组相比，P<0.01 。表4 Y-120 po对犬长期毒性试验瞳孔的影响犬号d0d30d

42、90d180d210空白对照 1 2 3 4 5 6 7 8低剂量组 910111213141516中剂量组1718192021222324高剂量组2526272829303132注: 对光反射正常表5 Y-120 po对犬长期毒性试验心率的影响（x±s，次/分）犬号d0d30d90d180d210空白对照 1181 181 167 143 2148 173 167 181 3124 121 133 130 4101 95 131 104 5201 167 169 119 6173 184 208 157 7181 166 172 154 186 8160 149 187 169 1

43、69 x158.6 154.5 166.8 144.6 177.5 s33.1 31.4 25.5 25.9 12.0 低剂量组 9160 133 152 149 10175 202 205 133 11150 178 175 133 12151 187 176 148 13158 159 179 119 180 14155 144 152 94 15174 200 183 143 16188 186 170 172 149 x163.6 173.6 174.0 136.4 164.5 s13.8 25.6 17.1 23.1 21.9 中剂量组17171 165 191 178 18170

44、179 148 118 19178 195 193 149 20146 188 161 160 157 21201 152 204 128 131 22170 179 172 125 23140 131 163 128 24155 154 161 112 x165.9 167.9 174.1 137.3 144.0 s19.4 21.4 19.6 22.8 18.4 高剂量组25200 166 179 139 26257 163 272 116 27216 138 175 123 28167 109 121 125 29138 124 115 140 30164 181 161 106 127

45、 31144 121 158 187 137 32146 146 154 133 x178.8 143.5 166.9 133.6 132.0 s41.8 25.1 48.3 24.4 7.1 表5 Y-120 po对犬长期毒性试验P波电压的影响（x±s，mv）犬号d0d30d90d180d210空白对照 10.21 0.20 0.25 0.29 20.23 0.17 0.20 0.15 30.19 0.18 0.19 0.18 40.24 0.25 0.19 0.23 50.21 0.28 0.28 0.27 60.23 0.26 0.25 0.24 70.25 0.23 0.20 0.18 0.23 80.21 0.24 0.21 0.23 0.25 x0.221 0.226 0.221 0.221 0.240 s0.020 0.039 0.034 0.048 0.014 低剂量组 90.23 0.25 0.22 0.23 100.25 0.27 0.28 0.25 110.20 0.29 0.28 0.25 120.24 0.24 0.19 0.24 130.24 0.28 0.21 0.18 0.25 140.22 0.26 0.26 0.24 150.21 0.19 0.21 0.23 160.22 0.23 0.29