高中生物实验总结

1、实验总结一、 显微镜的使用1. 制作装片的原则：材料少，切片薄，盖盖玻片慢且与载玻片成45°角，防止产生气泡。2. 主要部件：物镜（有螺纹，长度越长，距离载玻片越近，放大倍数越大）：低倍镜物像小，看到细胞多，视野大且亮，与载玻片距离远；高倍镜物像大，看到细胞少，视野小且暗，与载玻片距离近。目镜无螺纹，长度越长，放大倍数越小。3. 使用步骤：1 先用低倍镜找：取镜安放对光加片观察，找到物像移：将要观察的物像移到视野中央 2 再用高倍镜转：直接转动转换器换成高倍镜调：调节细准焦螺旋至物像清晰，若需要亮视野，可调节光圈至大光圈或调节反光镜至凹面反光镜。4. 五个关系：1 视野中的物像与标本

2、移动关系：同向移动（视野中物像移动方向与装片或切片移动方向相反）2 放大倍数=物像长度与宽度的放大倍数=目镜×物镜放大倍数3 先在低倍镜下将物像移至视野中央再换高倍镜原因：低倍镜视野范围大，而高倍镜视野范围小。若直接转换，往往由于物像不在视野中央而找不到物像。4 视野中异物位置：移动装片污物移动在装片上；污物不动移动目镜污物移动目镜上；污物不动物镜上放大倍数的变化与视野范围内细胞数量的变化的关系：i. 一行细胞成反比，如10*10时看到8个细胞排成一行，则10*40时看到2个细胞排成一行。ii. 充满视野的细胞与其平方成反比，如10*10时看到64个细胞充满视野，则10*40时看到4

3、个细胞充满视野。5. 注意事项：1 在高倍镜下运用暗视野观察的情况：紫色洋葱内表皮细胞；白色洋葱表皮细胞；草履虫的运动2 擦拭镜头用擦镜纸3 要盖盖玻片4 在物镜降至距离玻片标本约0.51cm处停止5 观察到的中间亮的黑色边圆圈是气泡，是由于盖盖玻片操作不规范或在载玻片上清水过少造成的6.需借助光学显微镜的实验：需保持活细胞状态的：.观察草履虫的运动 .观察叶绿体、线粒体等需经染色观察的：.观察细胞的有丝分裂、减数分裂、染色体变异碱性染料染色（龙胆紫、醋酸洋红、改良的苯酚品红） .观察DNA和RNA在细胞中的分布甲基绿吡罗红混合染料 .高倍镜观察线粒体健那绿 .检测生物组织中的脂肪苏丹（橘黄色

4、）/苏丹（红色）只需原色观察的：.高倍镜观察叶绿体、大液泡等 .观察植物细胞吸水失水 .酵母菌种群数量变化7.玻片标本制作：压片法：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂装片法：.观察DNA、RNA的分布 .观察线粒体 .观察叶绿体 .观察植物细胞吸水失水切片法：检测生物组织中的脂肪涂片法：观察人血细胞涂片8.常用试剂：染色剂，同6. NaCl：.配制生理盐水（0.9%），保持动物细胞正常形态 .用于DNA粗提取HCl/酒精：解离细胞或改变溶液的pH蔗糖：配制蔗糖溶液，用于测定植物细胞液的浓度或观察植物细胞的质壁分离与复原现象蒸馏水：保持植物细胞的正常形态二、 实验设计9.写课题：探究/验证（自变量）

5、对（因变量）的影响；探究/验证（自变量）和（因变量）的关系。10.写实验步骤：1 分组编号：取量、样、的（生物材料）平均分成（等量原则）例：取若干颗粒饱满的绿豆种子平均分成3组2 设置自变量：对照组（自然的，最正常的）；实验组：（+/-，有梯度的要等梯度）3 在相同且适宜的环境中培养一段时间4 观察记录 检测因变量：直接测因变量；通过测量某些指标间接获得因变量。如测定光合速率（真光合速率=净光合速率+呼吸速率）净光合速率：容器内单位体积O2增加量或CO2减少量；呼吸速率：容器内单位体积CO2增加量或O2减少量。 画表（记录原始数据）自变量1组别/自变量2因变量平均值具体数值 画图坐标曲线图（在

6、坐标轴上标明自变量/因变量/组别及相应单位，下同）柱状图11.结果预测与分析：若AB，则；若A=B，则；若AB，则12.结论（回归课题）：自变量与因变量的关系13.实验设计的基本原则：科学性原则；单一变量原则；对照性原则；可重复性原则（减少偶然误差）；简约型和可行性原则三、检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质、核酸14.还原糖（单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖；二糖：乳糖、麦芽糖）1 原理：新制Cu(OH)2与还原糖（含醛基）反应，水浴加热条件下生成Cu2O砖红色沉淀。2 试剂：斐林试剂甲液：0.1g/mlNaOH，乙液：0.05g/mlCuSO4（等量混匀，现配现用）3 步骤： 选材：白色或近于白色

7、的含还原糖量较高的植物组织（如苹果、梨、白萝卜） 制备组织样液：制浆过滤（一层纱布）取液 颜色反应：.向试管内注入1ml待测组织样液；.向试管内注入1ml斐林试剂；.将试管放入盛有5065°C温水的大烧杯中水浴加热约2min 观察颜色变化：蓝（棕）砖红色沉淀 对照实验：空白对照水+斐林试剂浅蓝色沉淀；条件对照.非还原糖+斐林试剂浅蓝色沉淀，.胃液+斐林试剂蓝无色（胃液中含酸，酸碱中和）5 注意事项：在加斐林试剂之前，要留出一部分组织样液，与鉴定后的样液颜色作对比，以增强实验说服力15.模拟尿糖的检测1 原理：糖尿病患者的尿液中含有还原糖，会与斐林试剂反应生成砖红色沉淀；正常人的尿液中

8、则不会反应。2 试剂：斐林试剂或尿糖试纸或班氏试剂3 步骤： 选材：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 颜色反应：斐林试剂（班氏试剂）水浴加热；尿糖试纸滴加尿液产生有色物质16.淀粉（非还原糖） 原理：碘液+淀粉溶液溶液变蓝色17.脂肪1 原理：脂肪+苏丹橘黄色；脂肪+苏丹红色2 步骤：法1：花生种子匀浆+3滴苏丹橘黄色（不需显微镜观察） 法2： 选材：花生种子浸泡，去种皮，将子叶切成薄片3 制片：.取最薄切片置于载玻片中央；.滴23滴苏丹染液染色3min；.去浮色：滴入12滴体积分数为50%的酒精溶液；.制成临时装片：滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片4 观察（用显微镜）：着色颗粒5 结论：圆形颗粒呈橘黄

9、色，则有脂肪存在。18.蛋白质1 原理：肽键在碱性环境中与Cu2+反应产生紫色络合物2 试剂：双缩脲试剂：A液：0.1g/ml NaOH；B液：0.01g/ml CuSO4（先加A液以制造碱性环境，再加B液）3 步骤： 选材：蛋清稀释液或豆浆滤液 显色反应：2ml待测组织样液+1ml双缩脲试剂A液摇匀+4滴双缩脲试剂B液摇匀紫色 结论：组织样液中存在蛋白质4 注意事项： 蛋清稀释液要稀释到一定程度，如果不充分稀释，与双缩脲试剂反应后会粘住试管内壁，使反应不彻底，试管也难以清洗 与还原糖的检测相同，在加入试剂前，要留出一部分组织样液。19.核酸1 原理：DNA+甲基绿绿色；RNA+吡罗红红色2

10、试剂：甲基绿吡罗红混合染色剂3 步骤： 制片：.在载玻片上滴一滴0.9%NaCl溶液，保持口腔上皮细胞正常形态；.消毒牙签轻刮口腔内壁，并将其涂抹在载玻片上；.点燃酒精灯，烘干载玻片，固定细胞，避免细胞滑落 水解：.把载玻片放入盛有30ml8%HCl的小烧杯中，分离DNA和蛋白质，改变细胞膜通透性；.水浴加热（30，5min，大烧杯） 冲洗涂片：用蒸馏水缓水流冲洗载玻片10s 染色：.吸水纸吸收水分；.滴2滴甲基绿吡罗红混合染色剂染色5min；.吸水纸吸收多余染色剂，盖上盖玻片 观察（显微镜，暗视野）：细胞核呈绿色，细胞质呈红色 结论：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少

11、量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。4 注意事项：染色剂需现配现用。三、 酒精/乙醇在实验中的用途20.无水乙醇：提取叶绿体中的色素21.90%酒精：解离液观察洋葱根尖有丝分裂22.95%冰酒精：析出含杂质较少的DNADNA的粗提取23.70%酒精：对外植体消毒植物组织培养24.50%酒精：去浮色脂肪的检测四、 制备细胞膜25.原理：细胞内外渗透压（物质浓度）有差别，渗透压内外（清水环境），细胞吸水涨破。26.步骤： 选材：哺乳动物成熟的红细胞稀释液（无细胞核和各种细胞器膜） 制片：用滴管滴取少量红细胞稀释液，滴一滴于载玻片并盖上盖玻片 观察（高倍镜）：在盖玻片一侧滴一滴蒸馏水，同时用吸水纸

12、吸引，可看到近水的部分红细胞发生变化：凹陷消失，细胞体积增大至破裂，内容物流出 离心：细胞破裂后，用离心机离心获得较纯的细胞膜。五、 高倍显微镜观察叶绿体、线粒体27.观察叶绿体 原理：叶绿体呈绿色、扁平的椭球形或球形，不需染色，即可观察其形态与分布2 步骤： 选材：新鲜的藓类叶片、菠菜叶稍带些叶肉的下表皮（叶绿体体积大，数量少）、新鲜的黑藻叶（高等被子植物，叶片薄，可直接用于临时装片的制作，且含水量高） 制片：.在载玻片中央滴一滴清水 .用镊子取一片植物材料 .放入水滴中（保持细胞和叶绿体的活性状态） .盖盖玻片 观察：低倍镜高倍镜3 注意事项：叶绿体分布状态与光强关系：会在不同光强下改变方

13、向强光下，侧面朝光，避免被灼伤；弱光下，正面朝光，接受充足光照。28.观察线粒体1 原理：健那绿染液使活细胞中的线粒体呈蓝绿色2 试剂：健那绿染液（可保持细胞正常形态）3 步骤： 制片：.载玻片中央滴一滴健那绿染液 .用消毒牙签刮漱净的口腔内壁后涂在染液中 .盖盖玻片 观察：低倍镜高倍镜：线粒体被染成蓝绿色，细胞质接近无色六、 运用同位素示踪法的实验 29.赫尔希和蔡斯探究噬菌体遗传物质实验（噬菌体侵染细菌实验）（标记35S、32 P） 30.卡尔文循环（光合作用中C的固定与转化）材料：小球藻；标记14C31.卡门、鲁宾探究光合作用中氧气的来源材料：小球藻；标记18O32.探究DNA半保留复制

14、材料：噬菌体；标记15N33.探究分泌蛋白的合成和分泌过程材料：亮氨酸；标记3H34.探究细胞膜的流动性材料：荧光蛋白（并非标记同位素）七、 探究植物细胞的失水吸水35.原理：渗透作用、质壁分离【细胞壁伸缩性比原生质层（由细胞膜、液泡膜及二膜间的细胞质组成）小】36.试剂：0.3g/ml的蔗糖溶液，蒸馏水37.步骤： 选材：紫色洋葱外表皮细胞/水绵细胞【利于观察液泡（紫色洋葱外表皮细胞的细胞液中含花青素使细胞液呈紫色）】 制片 低倍镜观察：观察细胞中央大液泡大小、原生质层位置（紧贴细胞壁） 将细胞置于蔗糖溶液中：从盖玻片一侧滴入蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次 低倍镜观察：失水液泡变小

15、，细胞液紫色加深，质壁分离 将细胞置于清水中：同 低倍镜观察：吸水液泡变大，细胞液紫色变浅，质壁分离复原38.注意事项：.细胞外液中有可以吸收的物质（通过主动运输）时，细胞先质壁分离，后自动复原 .用此实验还可探究细胞液的浓度设置一定浓度梯度蔗糖溶液，观察不同组细胞形态，在刚要质壁分离，但不发生质壁分离的细胞中所处的蔗糖溶液的浓度大致为细胞液浓度。八、 与酵母菌、醋酸菌有关实验39. 探究酵母菌的呼吸方式 原理：酵母菌是兼性厌氧菌，既可以进行有氧呼吸C6H12O66O26H2O酶6CO212H2O能量，也可以进行产生酒精的无氧呼吸C6H12O6 酶2C2H5OH2CO2 少量能量；CO2可用澄

16、清石灰水检验（变浑浊），也可用溴麝香草酚蓝水溶液检验（蓝绿黄）；C2H5OH（酒精）可用酸性重铬酸钾溶液检验（橙色灰绿色）2 试剂：NaOH溶液、澄清石灰水/溴麝香草酚蓝水溶液、酸性重铬酸钾3 步骤： 配制酵母菌培养液：将新鲜酵母菌分成两等分分别注入240ml质量分数为5%的煮沸冷却的葡萄糖溶液。 检验CO2的产生：如图 检验酒精的产生：取酵母菌培养液滤液，加入酸性重铬酸钾溶液（用浓硫酸创造酸性条件），观察溶液颜色变化4 注意事项：. 中NaOH溶液作用是去除空气中的CO2以排除对其的检验，后可先连接盛有澄清石灰水或溴麝香草酚蓝水溶液的锥形瓶，以确定CO2是否除净 .B瓶中的酵母菌培养液应先封

17、口放置一段时间，待酵母菌将B瓶中的氧气消耗完，在连接盛有的锥形瓶，确保是无氧呼吸产生的CO2通入了澄清石灰水或溴麝香草酚蓝水溶液中 .各瓶中含有一定量的细菌，实验前有必要对实验器材进行灭菌处理，排除其他生物细胞呼吸的干扰40.探究培养液中酵母菌种群数量变化 原理：酵母菌是单细胞真核生物，生长周期短，增殖速度快，探究其种群数量变化较方便；酵母菌可用液体培养基（培养液）来培养；用抽样检测法进行酵母菌的统计，计数方法是血球计数板计数法（显微计数法）2 试剂：无菌马铃薯培养液或肉汤培养液3 重要器材：血细胞计数板可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。血球计数

18、板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽, 其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网，如图，每个计数室共有400小格，总容积为0.1mm3 。计数室有长×宽：1mm×1mm, 2mm×2mm，3mm×3mm等，深度均为0.1mm。单位换算:大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.换算为1mL为0.1/1000即1/10000mL即10-4 mL 4 步骤： 制备无菌马铃薯培养液或肉汤培养液：分装、灭菌 接种酵母菌无菌环境下（酒精灯附近） 培养酵母菌不需对照组，需重复实验 取样振荡试管再取样（使其

19、分布均匀，统计准确），每天取样时间相同：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央。 观察计数暗视野：计数一个小方格内的酵母菌数量，在以此为根据，估算试管中的总数。 表格记录 结果处理5 注意事项：计数方法“两边夹一角”+方格内数量；若数量较多，则先一定程度地稀释培养液再计数41.果酒的制作 原理：酵母菌在有氧条件下增殖，最适温度在20左右，在无氧条件下进行酒精发酵，最适温度在18-25，最适pH在4.0-5.8；自然发酵中，土壤中含大量野生的酵母菌，附着在葡萄皮上；在发

20、酵中，酒精度数提高，红葡萄皮的色素进入发酵液，是葡萄糖呈现深红色；在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制2 器材：带盖的瓶子，如图3 步骤： 清洗并消毒实验器材：榨汁机清洗干净并晾干；发酵瓶清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒，或用洗洁精洗涤 选材：选择新鲜的葡萄 冲洗、除梗（顺序不能相反，防止除梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会） 榨汁 装瓶，封闭充气口 发酵：瓶中留有约1/3的空间；用无充气口和进气口的瓶子制作酒时，每隔12h左右将瓶盖拧松一次（不是打开瓶盖），以放出CO2，然后立即将瓶盖拧紧；温度严格控制在18-25，时间控

21、制在10-12d左右，可通过出料口对发酵情况监测 产品检验：.外在观察：闻气味（酒味）；有气泡、泡沫，浑浊 .生化检测酒精的检测：先在试管中加入发酵液2mL，在滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色的变化（橙色灰绿色）4 注意事项：检验的对照实验将两组葡萄汁灭菌，一组进行接种，一组加入等量蒸馏水，在分别检验42.果醋的制作 原理：醋酸菌是好氧菌，氧气充足时生理活动旺盛。在变酸的酒的表面观察到的菌膜为其在液面大量繁殖形成。醋酸菌对氧气含量敏感，深层发酵时，短时间中断通氧，会引起其死亡。氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中

22、的糖分解成醋酸C6H12O6+ 2O2酶2CH3COOH+ 2CO2+ 2H2O；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸2C2H5OH+ O2 酶2CH3CHO+2H2O，2CH3CHO+O2 酶2CH3COOH，总反应式C2H5OH+ O2 酶CH3COOH+ H2O。其最适温度为30-352 器材：同果酒制作3 步骤： 清洗并消毒实验器材 选材 冲洗、除梗 装瓶，封闭充气口 发酵：酒精发酵产生酒精后将瓶盖打开（适时打开充气口输氧），盖上一层纱布，进行葡萄醋的发酵，温度严格控制在30-35，时间控制在7-8d左右 产品检验：无气泡，浑浊，液面有白色菌膜九、 绿叶中的色素提取和分

23、离43.原理：色素可溶于有机溶剂而不溶于水；各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，从而将各种色素分离（纸层析法）44.试剂：无水乙醇（作有机溶剂）、碳酸钙（保护色素）、二氧化硅（破坏细胞结构，加速研磨，使研磨充分）、层析液（20份汽油、2份丙酮、2份石油醚、1份苯混合；9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合；汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠；体积分数为95%的酒精或93号汽油。）45.步骤： 选材：新鲜绿叶（如菠菜绿叶） 提取：称量研磨过滤收集并塞严试管口 制备滤纸条：干燥定性滤纸剪去一端两角（防止层析液在滤纸条边缘扩散过快而形成弧形色素）距剪角一端1cm处用铅笔画一

24、条细横线 画滤液细线：用毛细吸管吸取少量滤液，眼铅笔线画一条均匀细线，待滤液干后（防止色素带之间出现重叠），再画一两次（细齐直） 分离：将适量层析液倒入试管中（不能让滤液细线触及层析液，否则会使色素溶解于层析液中，得不到色素带，使实验失败）将滤纸条插入层析液中用棉塞塞住试管 46. 结果：如图 47.注意事项：.有机溶剂要选择对人体无毒害的，如食用酒精 .对光合作用其关键作用的是叶绿素a.液泡中的某些物质如花青素会对叶绿体中的叶绿素进行破坏 .叶片呈绿色的原因：叶绿色对绿光吸收最少，绿光被反射 .一般情况，光合作用所利用的光都是可见光 .恩格尔曼用透过三棱镜的光照射水绵临时装片，发现好氧菌大量

25、聚集于红光和蓝紫光区域，可得到叶绿体中色素主要吸收的色光 .叶绿体中的色素集中分布在由类囊体叠成的基粒上，基粒上还有与光合作用有关的酶 .光合作用光反应、暗反应均产生水和消耗水，光反应水的光解消耗水，ATP合成生成水；暗反应CO2固定生成水，ATP水解消耗水十、 探究细胞大小与物质运输的关系48.原理：NaOH和酚酞相遇呈紫红色；同一物质在同一介质的扩散速度相同49.试剂：NaOH溶液50.步骤： 选材：含酚酞的琼脂块（模拟细胞） 琼脂块切成不同棱长的正方体 加入NaOH溶液，浸没琼脂块 一段时间后，取出琼脂块，测量扩散深度51.结论：琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小，NaOH扩

26、散的体积与整个琼脂块体积之比随琼脂块增大而减小十一、与植物细胞有关实验52.观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 原理：有丝分裂常见于高等植物根尖、芽尖分生区细胞，且各细胞分裂相互独立；染色体易被碱性染料着色（化学性质并非为碱性的）2 试剂碱性染料：龙胆紫溶液/醋酸洋红溶液/改良的苯酚品红溶液3 步骤： 选材：洋葱根尖（或葱、蒜） 培养：洋葱3-4d浸入清水于温暖环境培养，待根长到约5cm，取根尖制片（或蒜根1-2d湿沙培养至长至1-2cm） 制装片：.解离：剪取根尖2-3cm放入HCl:酒精=1:1混合液中3-5min，使组织中的细胞相互分离开来 .漂洗：根尖酥软后，放入清水漂洗10min，防止解

27、离过度 .染色：把根尖放入染料中染色3-5min，使染色体着色 .制片：载玻片盖玻片拇指（无名指）轻按，使细胞分散开来 观察：.低倍镜下找分生区细胞（正方形，排列紧密，核大，质少，无大液泡） .换高倍镜观察53.低温诱导植物染色体数目变化 原理：植物分生组织细胞有丝分裂旺盛；低温抑制分裂中纺锤体的形成，染色体不能被拉向两极，染色体数目加倍；改良的苯酚品红溶液可使染色体着色；卡诺氏液可固定细胞形态（杀死细胞）；解离液使组织中的细胞互相分离开2 试剂：改良的苯酚品红溶液，卡诺氏液，解离液（15%HCl+95%酒精）3 步骤： 洋葱根尖培养：装入清水长不定根至1cm，放入低温室（4）诱导培养36h

28、取材：剪取根尖0.5-1cm，放入卡诺氏液0.5-1h，用95%酒精洗2次 制片：解离漂洗染色制片 观察：先低后高54.孟德尔分离定律的发现（假说演绎法）1 原理：将纯合高茎矮茎豌豆亲本杂交得到的F1 与隐形纯合子（矮茎）测交，预测后代高：矮=1:1，如图2 步骤： 选材：豌豆自花传粉，闭花授粉，自然状态下一般为纯种，实验结果可靠，易分析 杂交：去雄套袋人工授粉套袋 记录F2 形状比例，验证分离定律55.孟德尔自由组合定律的发现（假说演绎法）1 原理：两对相对性状的测交实验，如图 2 步骤：同上3 注意事项：.用玉米作杂交试验时，不用去雄，因为玉米是单性花，直接给雌花套袋 .验证遗传定律的方法

29、：自交法、测交法、花粉鉴定法、单倍体育种法（花药离体培养，秋水仙素处理单倍体幼苗）56.探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度1 原理：生长素（类似物）对植物的作用具有两重性，浓度过高抑制生长，较低促进生长2 试剂：生长素类似物（NAA、2,4D、IPA、IBA、生根粉等）、蒸馏水3 步骤：a) 选材：生长旺盛的一年生枝条b) 设置一定浓度梯度（梯度较大，以进行预实验）的等量生长素类似物c) 用生长素类似物和等量蒸馏水处理插条：.浸泡法（要求溶液浓度较低）：把插条的基部浸泡在配制好的溶液中，深约3cm，处理几小时至一天 .沾蘸法：把插条基部在浓度较高的药液中蘸一下（约5s），深约1.5cm即可

30、d) 分别放入中培养（相同时间，相同且适宜条件）e) 一段时间后，取出各组枝条，记录各枝条生根数并求各组生根数的平均值，并绘制曲线图f) 在生根数最多的几组枝条所处的浓度间设置浓度梯度更小的生长素类似物，重复，找出枝条数最多的一组，其所处的生长素类似物浓度大致为最适浓度。4 相关概念：预实验：为进一步的实验摸索条件，也可以检验实验设计的科学性和可行性而进行的 实验，在本实验中便于了解最适浓度的大致范围57.植物组织培养1 原理：植物体细胞具有全能性2 步骤：离体植物组织（脱分化）愈伤组织（再分化）长出丛芽（再分化）生根（移栽）植株3 相关概念：脱分化：将体细胞经诱导后失去其特有的结构和功能而转

31、变成未分化细胞；愈伤组织：细胞排列疏松无规则，高度液泡化，无固定形态的薄壁细胞4 影响因素：离体材料、营养（矿质元素）、pH、温度、光照、无菌操作、激素（细胞分裂素、生长素）浓度、配比（生细，利根抑芽；生细，利芽抑根；生细，形成愈伤组织）、使用顺序（先生后细，利于分裂，不分化；先细后生，分裂分化；同时，分化频率提高）58.胡萝卜的组织培养 原理：植物体的根、茎、叶细胞_一定的营养和激素等条件_脱分化_愈伤组织_转接到含有不同激素成分的培养基_再分化_胚状体或丛芽小植株。植物组织培养的全过程，证明了分化的植物细胞，仍具有形成完整植株所需要的全部基因2 试剂：体积分数为70%的酒精、体积分数为20

32、%的次氯酸钠溶液、无菌水3 步骤：a) 选材：胡萝卜根（或烟草叶片、小麦花药、菊花花瓣）b) 将胡萝卜根用自来水充分洗净、削去外皮、切成段（约10cm）。用酒精棉球擦手消毒c) 在超净工作台（或接种箱）上将胡萝卜段用酒精溶液消毒30s后，立即用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次d) 用无菌的滤纸吸去胡萝卜段表面的水分。在消毒瓷砖上，用无菌解剖刀将胡萝卜段切成1cm厚的横切片，再选取有形成层的部位（分化程度低），切取1cm3左右的小块e) 接种：将胡萝卜组织块接种在培养基上，用锡箔纸封盖瓶口，并用橡皮筋扎紧。贴标签，写明材料名称、接种日期、小组编号f)

33、 培养：23-26恒温避光条件。4d后，检查污染情况；14d后，观察愈伤组织的生长状况。然后继续恒温避光培养，定期观察和记录愈伤组织的生长状况g) 移栽：一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到分化培养基上培养一段时间，诱导出试管苗，将其移栽到大田，培养成正常植株4 注意事项：无菌操作59.基因工程中将目的基因导入植物细胞 农杆菌转化法（用于双子叶植物和裸子植物） 花粉管通道法 基因枪法（单子叶植物）60.菊花的组织培养步骤： 制备MS固体培养基：.配制母液 .配制培养基（菊花茎段培养较易，不必添加植物激素） .高压蒸汽灭菌 外植体消毒：冲洗刷洗冲洗吸干酒洗（消毒，体积分数为70%的酒精）清洗吸

34、干汞洗清洗 接种（切割）：酒精灯附近进行 培养：无菌箱，温度18-22，日光灯光照12h/d 移栽 栽培61.月季的花药培养 原理：花粉是单倍体的生殖细胞。被子植物花粉发育：小孢子四分体时期单核期双核期。果实果皮随母本，种子随受精卵，花、被子植物花粉发育、花药培养产生花粉植株途径如图；植物种类、生理状况、花期、培养基组成、生长条件、材料的低温预处理、接种密度影响诱导成功率，单核靠边期成功率最高 步骤： 选材：选择适宜发育期（醋酸洋红法，焙花青铬矾法） 消毒（同菊花的组织培养） 接种和培养62.单倍体育种 原理：选取适宜亲本杂交F1花药离体培养幼苗秋水仙素植株筛选所需植株63.多倍体育种（三倍体

35、无籽西瓜的培育）原理：如图 64.用样方法调查双子叶植物种群密度 原理：样方法随机选取计数平均值估计值；单子叶植物难以辨别是一株还是多株，双子叶植物容易辨别个体数目2 步骤： 准备：大致观察地形 确定调查对象 确定样方的多少、大小（随个体大小而定）和取样方法（随机取样，有五点取样法和等距取样法） 计数：“两边夹一角”+样方内个体数 计算种群密度十二、性状分离比模拟实验65.原理：两个小桶代表雌雄生殖器官，桶内彩球代表雌雄配子，不同彩球的随机组合代表雌雄配子的随机组合66.用具：2个小桶（编号甲、乙），两种不同颜色的彩球各20个，一种编号D，一种编号d67.步骤： 2桶分别放入两小球各10个 摇

36、动小桶，充分混匀 随机抓取组合 放回小球摇匀，重复抽取，记录每次编号组合68.注意事项：步骤2个桶可不放相同数量的球，但每个桶内的不同种球数量相同，因为在实际中雄配子一般多于雌配子十三、基因工程69.获取目的基因 基因文库法：基因组文库将某生物体的DNA全部提取出来，用限制酶切成一定范围大小的DNA片段，分别于载体连接起来，导入受体菌的群体中储存；cDNA文库将某生物某发育时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA（cDNA）片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。DNA合成仪人工合成PCR技术扩增：70.基因表达载体的构建（核心） 组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因71.目的基因导入受体

37、细胞 导入植物细胞（略） 导入动物细胞显微注射法：表达载体提纯取卵（受精卵）显微注射含目的基因的受精卵发育成新性状个体 导入微生物细胞Ca2+处理使之处于能够吸收环境中DNA分子的感受态将含载体DNA分子的缓冲液与感受态细胞混合，使细胞吸收DNA分子72.目的基因的检测与鉴定 检测DNADNA分子杂交技术：用探针（用放射性同位素等标记的一段含有目的基因的DNA片段）与转基因生物的DNA作用，若出现放射性，则目的基因已与宿主DNA重组 mRNA的检测分子杂交技术：与上类似，不同在于提取的是转基因生物的mRNA 蛋白质检测抗原抗体杂交 个体生物学水平鉴定：抗性、活性测试等十四、摩尔根果蝇杂交实验7

38、3.探究方法：假说演绎法、正交与反交法74.过程： 选材：果蝇易饲养、繁殖快、染色体数量少且形态上存在明显差别（3对常染色体+XY/XX） 观察现象：红眼果蝇中出现白眼雄果蝇突变体；红×白F1全红F2红（、）3:1白（） 提出问题：白眼性状与性别有关，为什么？ 分析问题：白眼基因在X染色体上？ 提出假说：基因在X染色体上，同时Y染色体上不存在等位基因 演绎推理：将红眼雌性纯合子（W）与白眼雄性纯合子（w）杂交，如图 实验验证：杂交实验、测交实验 得出结论十五、人类遗传病的调查75.调查发病率：广大人群随机抽样，最好选择单基因遗传病，如红绿色盲（伴X隐）、白化病（常隐）、高度近视76.

39、调查发病方式：患者家系调查十六、促胰液素的发现史77.实验过程78.实验对比十七、调查种群密度的方法79.样方法（适用于双子叶植物和活动能力弱、活动范围小的动物）80.标志重捕法（适用于活动能力强、活动范围大的动物） 公式：（种群数量）N=初次捕获数×重捕数重捕标志数2 前提：调查期间数量稳定；标志个体均匀分布在全部个体之中；标志操作不影响动物的行为和死亡3 步骤：略4 注意事项：.随机取样 .多次试验取平均值 . 对生物的标记不能对其正常生命活动及其行为产生任何干扰十八、土壤中小动物类群丰富度的研究81.原理：土壤动物活动能力强，且身体微小，不适于用样方法或标志重捕法，而用取样器取

40、样的方法进行采集调查，通过调查样本中小动物的种类和数量来推测某一区域内土壤动物的丰富度。丰富度的统计方法有记名计算法（在一定面积的样地中，直接数出各种群的个体数目，用于个体较大、种群数量有限的群落）、目测估计法（暗预先确定的多度等级类估计单位面积上个体数量的多少，等级划分有“非常多、多、较多、较少、少、很少、”）82.步骤： 准备：.制作取样器：直径为5cm的铝罐，在高度为5cm处剪断，使取样器容积约为100mL .记录调查地点地形和环境情况。 取样：选择取样地点，将表土上的落叶轻轻拨开，用手来回旋转罐子，将其按入土中，按压到罐底与地表几乎齐平，用花铲将罐内的土连同罐子一起挖出。将罐子中的土壤

41、倒入塑料袋中，标明取样的地点、时间 采集小动物：根据其趋暗趋湿避高温特点采用诱虫器或吸虫器（体型较小的）采集，如图 观察和分类：放大镜、实体镜观察 统计和分析十九、土壤微生物的分解作用83.落叶的腐烂与土壤微生物的关系 思路：材料：带有落叶的土壤（含微生物） 对照组：土壤不做处理（自然状态） 实验组：尽可能排除土壤微生物的作用，同时尽可能避免土壤理化性质的改变（如将土壤用塑料袋包好，放在60恒温箱中1h灭菌）84.探究土壤微生物对淀粉的分解作用步骤： 将取得的土壤放入垫有厚纱布的烧杯中，加水搅拌，然后将纱布连同土壤一起取出。将留在烧杯中的土壤浸出液静置一段时间备用。 另取两烧杯编号A、B，放入

42、等量淀粉糊。在A烧杯中加入30mL土壤浸出液，B烧杯加入等量蒸馏水 在室温（20左右）下放置7天后，分别取A、B烧杯中的溶液20mL，各放入两试管中，分别编号为A1、A2、B1、B2 在A1、B1中加入碘液，在A2、B2中加入斐林试剂（加热） 观察溶液颜色变化，记录实验结果二十、生态缸实验85.原理：在有限的空间内，依据生态系统原理，将生态系统具有的基本成分进行组织，构建一个人工微生态系统是可能的。要使其正常运转，在设计时还要考虑系统内不同营养级生物之间的合适比例。人工生态系统的稳定性是有条件的，也可能是短暂的。86.材料：分解者：蚯蚓8-10条；消费者：蜗牛5-7个，小乌龟2-3只；生产者：

43、浮萍、水草、蕨类植物和一些低矮杂草，仙人掌或仙人球2-3株。玻璃板4-5，粘胶足量；沙土8-10kg，含腐殖质（已死的生物体在土壤中经微生物分解而形成的有机物质）较多的花土40-50kg，自来水足量87.步骤： 按100cm×70cm×50cm的标准制作生态缸框架 构建生态缸：.底部铺垫沙土和花土，花土在下，一边高一边低；沙土在上，厚5-10cm .在低处倒水 .放置动植物：浮萍、水草、小乌龟放水中；仙人掌或仙人球移植到沙土上、蕨类植物和杂草移植到花土上，蚯蚓与蜗牛放在花土上 封盖，置于室内通风、光线良好的地方，避免阳光直射二十一、运用假说演绎法的实验88.孟德尔一对相对性

44、状的豌豆杂交实验分离定律89.孟德尔两对相对性状的豌豆杂交实验自由组合定律90.摩尔根果蝇杂交实验证明基因在（X）染色体上91.探究DNA半保留复制92.格里菲斯（观察现象、提出问题）、艾弗里（提出假设及其他步骤）肺炎双球菌转化实验DNA是遗传物质二十二、与酶有关的实验93.比较过氧化氢酶与Fe3+的催化效率 原理：新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶，Fe3+是一种无机催化剂，它们都可以催化过氧化氢分解成水和氧。分别用一定数量的过氧化氢酶和Fe3+催化过氧化氢分解成水和氧，可以比较两者的催化效率。可通过卫生香燃烧程度比较 材料：新鲜肝脏研磨液、质量分数为3.5%氯化铁溶液、3%的过氧化氢溶液、卫生香、

45、火柴 步骤：如图 注意事项：.在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。. 选用较粗的试管，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。. 其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代新鲜肝脏。. 研磨液增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积，增大反应速率. 滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，不可共用同一支吸管，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。94. 探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用原理：淀粉和蔗糖都是非还原糖。它们在酶的催化作用下都能水解成还原糖。还原糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色沉淀。用淀粉酶分别催化淀粉溶液和蔗糖溶液，再用斐林试剂鉴定溶液

46、中有无还原糖，就可以看出淀粉酶是否能催化这两种化学反应。试剂：质量分数为2的新鲜的淀粉酶溶液、质量分数为3的可溶性淀粉溶液、质量分数为3的蔗糖溶液、斐林试剂、热水步骤： 取两支洁净试管编号1、2，在试管1中注入可溶性淀粉溶液2ml，再注入淀粉酶溶液2ml，振荡；在试管2中注入蔗糖溶液2ml，再注入淀粉酶2ml，振荡 在两试管分别放入盛有相同温度（温度适合）热水的大烧杯中水浴加热（使淀粉酶发挥催化效应）5min5 取出试管，各加2ml斐林试剂，振荡，放入盛有相同温度热水的大烧杯中水浴加热1min 观察溶液颜色变化95.探究温度对酶活性的影响原理：淀粉+碘液蓝色；淀粉+淀粉酶麦芽糖+碘液不变蓝；温

47、度影响酶的活性，从而影响淀粉的水解，滴加碘液，根据是否出现蓝色或蓝色的深浅来判断酶的活性步骤： 取三支洁净试管编号1、2、3，分别加入2mL的可溶性淀粉溶液 将三支试管分别放入盛有60热水、沸水、冰块的大烧杯中5min 分别向另外三支试管中加1mL的新鲜淀粉酶溶液分别放入盛有60热水、沸水、冰块的大烧杯中5min（以保证溶液与酶接触时的温度是试管本身的温度，而不引起温度改变） 将三种温度下的淀粉酶溶液分别倒入相应温度下的3支试管中，摇匀后，维持各自的温度5min 在3支试管中各滴入1滴碘液，摇匀，观察其颜色变化注意事项：.若对淀粉酶溶液不进行相应温度的水浴加热，则加入的都是常温的淀粉酶溶液，会使溶液的温度瞬间改变，而酶具有高效性，使三支试管中的淀粉都水解，三支试管