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文档简介
1、课题2用纸层析法分离用纸层析法分离fefe3+3+和和cucu2+2+一、色谱分析法色谱分析法:1 1、简介:简介:基于混合物各组分在体系中两相的物理、化学性基于混合物各组分在体系中两相的物理、化学性能差异(如吸附、分配差异等)而进行分离和分析的方法。能差异(如吸附、分配差异等)而进行分离和分析的方法。国际公认俄国国际公认俄国m.c.m.c.茨维特为色谱法的创始人。茨维特为色谱法的创始人。 色谱法体系中的两相作相对运色谱法体系中的两相作相对运动时,通常其中一个相是固定不动时,通常其中一个相是固定不动的,称为动的,称为固定相固定相;另一相是移;另一相是移动的,称为动的,称为流动相流动相; ;滤纸
2、或其它滤纸或其它载体作为载体作为惰性支撑物惰性支撑物菠菜的叶绿体中色素的提取和分离菠菜的叶绿体中色素的提取和分离 2、色谱法的应用展示:、色谱法的应用展示:(1)按流动相和固定相的不同,色谱法分为)按流动相和固定相的不同,色谱法分为气相色谱法气相色谱法和和液相色液相色谱法谱法。气相色谱法的流动相是气体,液相色谱法的流动相是液体。气相色谱法的流动相是气体,液相色谱法的流动相是液体(2)按吸附剂及其使用形式可分为)按吸附剂及其使用形式可分为柱色谱、纸色谱和薄层色谱柱色谱、纸色谱和薄层色谱。(3)按吸附力可分为)按吸附力可分为吸附色谱、离子交换色谱、分配色谱吸附色谱、离子交换色谱、分配色谱(4)按色
3、谱操作终止的方法可分为)按色谱操作终止的方法可分为展开色谱和洗脱色谱展开色谱和洗脱色谱。(5)按进样方法可分为)按进样方法可分为区带色谱、迎头色谱和顶替色谱。区带色谱、迎头色谱和顶替色谱。u纸色谱纸色谱,以滤纸为载体,是以滤纸纤维及其结合水作为固定以滤纸为载体,是以滤纸纤维及其结合水作为固定相,以有机溶剂作为流动相的分配色谱分离。纸上色谱分离具相,以有机溶剂作为流动相的分配色谱分离。纸上色谱分离具有设备简单、操作方便、分离效率高、所需样品量少等优点,有设备简单、操作方便、分离效率高、所需样品量少等优点,但分离量少、回收困难,分离速度慢等;但分离量少、回收困难,分离速度慢等;柱色谱柱色谱,具有进
4、样量大,回收容具有进样量大,回收容易等优点,但其分辨率不如纸上色易等优点,但其分辨率不如纸上色谱和薄层色谱高;谱和薄层色谱高;薄层色谱分离薄层色谱分离 ,将固定相在玻璃平板上铺成薄层而进将固定相在玻璃平板上铺成薄层而进行分离的一种分离技术。薄层色谱是柱色谱和纸上色行分离的一种分离技术。薄层色谱是柱色谱和纸上色谱两者的结合。谱两者的结合。二、实验原理二、实验原理 含有含有cucu2 2和和fefe3 3的溶液的溶液涂涂在滤纸一端,丙酮作展在滤纸一端,丙酮作展开剂,在滤纸的开剂,在滤纸的毛细作用毛细作用下,展开剂携带下,展开剂携带cucu2 2和和fefe3 3沿滤纸纤维向上移动沿滤纸纤维向上移动
5、因为速度不同(吸附和溶因为速度不同(吸附和溶解能力的不同),一段时解能力的不同),一段时间后,间后,cucu2 2和和fefe3 3距起点距起点的距离会不同,从而达到的距离会不同,从而达到分离的目的。分离的目的。三、实验操作要点及主要实验现象三、实验操作要点及主要实验现象 1操作要点(1)裁纸 (2)点样 (3)展开 (4)显色 (5) 分离四:实验方案设计四:实验方案设计装置制作装置制作点层析试样点层析试样配展开剂配展开剂层析操作层析操作显色反应显色反应操作步骤:操作步骤:操作要点:操作要点:滤纸剪成约滤纸剪成约1cm1cm宽,宽,10cm10cm长长( (保证下端能浸入展开剂中保证下端能浸
6、入展开剂中1cm)1cm)的滤纸条,一端固定在橡胶塞上,在距滤纸条一的滤纸条,一端固定在橡胶塞上,在距滤纸条一端端2cm2cm处用铅笔画一小圆点。处用铅笔画一小圆点。配试样后,用毛细管蘸取试样在配试样后,用毛细管蘸取试样在“原点原点”处点直径处点直径0.3-0.3-0.5cm0.5cm的斑点,晾干后再点。重复的斑点,晾干后再点。重复3-53-5次。也在滤纸下方次。也在滤纸下方距离底边距离底边2cm2cm处画出混合液细线代替点样。处画出混合液细线代替点样。用丙酮用丙酮9 9mlml,6mol/l,6mol/l盐酸盐酸1 1mlml配成展开剂。配成展开剂。展开剂不可沾到试管壁,点样后的滤纸条不可接
7、触试展开剂不可沾到试管壁,点样后的滤纸条不可接触试管内壁,滤纸条下端浸入展开剂中管内壁,滤纸条下端浸入展开剂中1cm,1cm,注意不要让试注意不要让试样点触及展开剂。样点触及展开剂。注意观察滤纸条上色带的变化,滤纸条取下后用注意观察滤纸条上色带的变化,滤纸条取下后用氨气熏,观察颜色变化;氨熏应在通风橱中进行氨气熏,观察颜色变化;氨熏应在通风橱中进行(1)层析过程中的实验现象(2)氨熏后的实验现象五、实验操作要点及主要实验现象五、实验操作要点及主要实验现象 用小烧杯代替大试用小烧杯代替大试管。用铁丝横穿过滤纸,管。用铁丝横穿过滤纸,架在烧杯上方(如图)。架在烧杯上方(如图)。调节完滤纸高度后,盖
8、调节完滤纸高度后,盖上培养皿形成气室。上培养皿形成气室。 氯化铁层,颜色较深氯化铁层,颜色较深 硫酸铜层,颜色稍浅硫酸铜层,颜色稍浅 用纸层析法分离铁离子和铜离子用纸层析法分离铁离子和铜离子 六、实验注意事项六、实验注意事项1 1、为防止水解,饱和、为防止水解,饱和feclfecl3 3和和cusocuso4 4可加少可加少量量hclhcl或或h h2 2soso4 4酸化,不影响实验效果。酸化,不影响实验效果。2 2、氨熏需在通风实验室内进行。、氨熏需在通风实验室内进行。3 3、层析速度开始较快,后逐渐减慢,大约、层析速度开始较快,后逐渐减慢,大约1010分钟即可分离完全。分钟即可分离完全。第一课时完成2008.4.11拓展课题拓展课题1 12 2菠菜的叶绿体中色素的提取和分离菠菜的叶绿体中色素的提取和分离 1 1、药品准备:、药品准备:菠菜叶菠菜叶4 45 5克;石英砂克;石英砂1 1克(可用细砂代替);克(可用细砂代替);丙酮丙酮; ;层析液按石油醚层析液按石油醚9 9份、丙酮份、丙酮1 1份(体积比)配制,也可用份(体积比)配制,也可用2020份石油醚、份石油醚、2 2份丙酮、份丙酮、1 1份苯
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