上海交通大学果蝇杂交实验方案-下午一组

1、果蝇杂交实验方案下午一组黃士豪uh亘英李思思许迪i实验的目的：1.1验证基因伴性遗传的规律1. 2验证基因连锁与交换规律并计算重组值2. 实验材料：2. 1 黑腹果蝇，drosophila me 1 anogas ter果蝇是双翅目昆虫，屈果蝇屈，约冇2500个种。通常作遗传学实验材料 的是黑腹果蝇。2. 2黑腹果蝇生活史果蝇的生活周期长短与温度冇密切的关系。一般來说，30°c以上的温度能使果蝇不育或死亡，低温能使周期延长，生活力卜降，饲养杲蝇的最适温度为20-25 °c o生活周期长短与饲养温度的关系10°c15°c20°c25°c

2、丽幼虫57天48天8天5天幼虫f成虫6天4天果蝇在25°c时，从卵到成虫需要十天左右，成虫可活26-33天。果蝇的 生活史如下：雌蝇f诚数分裂f卵受精雄蝇f减数分裂f精子产第一批卵第一批成虫羽化（第八天） （可活2633天）第二次蚊皮（第二天）第一次蚊皮第一批卵孵化（第一天）果蝇牛活周期和各阶段经过的时间2. 3黑腹果蝇的饲养方法丙酸的作用是抑制霉菌污染，用量参照附表，每200毫升饲料约加1毫升左 右。如无酵母粉，也可用酵母液代替，但用法不同。若用酵母菌液则在饲料分 装到培养瓶中以后再加入，每瓶加数滴。培养果蝇用的饲料瓶可用牛奶瓶，或大、屮型指管，用纱布包的棉花球作瓶 塞。实验室中保

3、存原种以及杂交实验以中指管为宜。培养瓶用前要消毒，而后 再装饲料（每瓶2厘米厚即可），待饲料冷却后，用酒精棉花擦瓶的内壁，然 后插入消毒过的吸水纸，作幼虫化蛹时的干燥场所。2. 4研究的性状及显隐性伴性遗传：野生型，红眼（+ ）突变型，白眼（w）连锁与交换：野生型，红眼、氏翅、直刚毛（+、+、+）突变型，白眼、小翅、卷刚毛（ww、mm> snsn）3. 实验技术流程3.1亲本的纯种培养：挑选两品系雌雄果蝇分别培养8天 t 挑处女蝇3. 2杂交亲本的确定麻醉野生型品系，挑出10只雄果蝇，放入突变处女蝇培养瓶中，朵交25°c 培养。杂交组合雌性为突变型，雄性为野生型。3. 3杂交遗

4、传式3. 3. 1伴性遗传 本实验使月18号号生型果疑与発合白眼杲疑杂交，其中白眼相对亍红眼是隐性性状, 白眼基因位亍x染色体上。正交反交18$ x w sxvp x$ x 18 £px 乂$红眼jxwy8白眼lwxw£白眼ix*y 2红眼fi：x*x*yfi：x+xwxwy:x1mx，x 亠yx vyf2： x fx亠yx衣'$红眼9红眼8红眼8白眼?红眼伞白眼$红眼 8白眼1:1:1 : 11:1:1 : 1伴性遗传图解3. 3.2三点测交本实脸使冋6号统合白眼、寿刚毛、小翅杲疑与18号弩生型杲疑杂交，義得b代后吾 自由交死即可获得具有8种麦型的测交巳代。白眼、

5、卷刚毛、小翅均为x染色体上的 隐性性浓up 6 号辛(wnm/wnm) x 18 号 £ (+/y)白卷小红直fi： 9(+/wsnm)cf(wsnm/y)3.4后代的彳|3. 4. 1伴性遗传实验记录表： 正交：亲木1： 亲本2： 杂交日期：杂交后代表现f1代果蝇表现型及数口统计h期f2代果蝇表现型及数口雌白眼雌红眼雄白眼雄红眼总数比例1： 2： 杂交日期：杂交后代表现f1代果蝇表现型及数目统计f1期f2代果蝇表现型及数目雌白眼雌红眼雄白眼雄红眼总数比例3. 4. 2连锁与交换实验记录表: 三点测交结果统计：f2表型数量比例重组发生在基因w-snsnrmw-m+ + +w sn m

6、+ + mw sn + sn mw + + sn +w + m总计交换值图距理论值w-msn-mw-sn并发率干扰4. 实验的步骤4. 1亲本的纯种培养4. 1. 1亲本饲养瓶的准备4.1.2果蝇的麻醉与转瓶4.2杂交1 （伴性遗传的观察）4.2. 1杂交用饲养瓶的准备第一天，将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选，其中在野生型中挑出 3-4对，突变型中挑h! 7-8对，分别培养，25°c培养8天。4. 2. 2亲本处女蝇的挑选第九天，7:00,将孵化的突变型成蝇麻醉后分出雌蝇，至另一培养瓶，培 养处女蝇待用。19:00,继续挑选雌雄蝇，放入处女蝇培养瓶中，以后每隔12 小时挑选一次，一

7、直至挑出10只处女果蝇。4. 2. 3雄性果蝇的挑选麻醉野生型品系，挑出10只雄果蝇，放入突变处女蝇培养瓶中，朵交25°c 培养。4. 2. 4 f1代生长情况的观察上述杂交果蝇培养8天以后，将亲代果蝇麻醉弃去。观察新长出的子一代 果蝇性状，并记录。4.2.5 f1代性状的观察记录及统计4.3杂交2 （伴性遗传的进一步观察以及连锁与交换的观察）4. 3.1杂交用饲养瓶的准备4. 3. 2朵交亲本的挑选与转瓶子一代瓶中收集30对果蝇（不必再挑处女蝇），转移至3个新的培养瓶屮, 每瓶10对，25°c继续培养。4. 3. 3 f2代生长情况的观察8天以后，麻醉子一代果蝇，弃去。新生长的果蝇是子二代果蝇，观察性 状并记录。4. 3.4 f2代性状的观察记录