艾滋病筛查实验室规范化建设和质量管理

1、1全国艾滋病检测工作全国艾滋病检测工作管理办法管理办法中华人民共和国卫生部中华人民共和国卫生部二六年六月二六年六月234参参 比比确确 证证筛筛 查查5（1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验，根据需要）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。可开展其他艾滋病检测工作。（2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。证实验室。（3）定期汇总艾滋病检测资料，上报当地艾滋病）定期汇总艾滋病检测资料，上报当地艾滋病筛查中心实验室或者艾滋病检测确证实验室。

2、筛查中心实验室或者艾滋病检测确证实验室。（4）对自愿咨询检测工作提供技术支持。）对自愿咨询检测工作提供技术支持。6（1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。（2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。心实验室。（3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验。滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验。（4）开展艾滋病自愿咨询检测工作。）开展艾滋病自愿咨询检测工作。 不具备艾滋病检测实验

3、室条件，但尚需开展艾滋病病毒抗体检测工不具备艾滋病检测实验室条件，但尚需开展艾滋病病毒抗体检测工作单位。作单位。71人员条件人员条件 至少由至少由3名医技人员组成，具有中级卫生技术职称人名医技人员组成，具有中级卫生技术职称人员至少员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级或省级以上病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级或省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。2建筑条件建筑条件 实验室或检测区域实验室或检测区域应分为应分为清洁区，半污染区和污染清洁区，半污染区和

4、污染区区，应符合二级生物安全实验室（，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。）要求。3仪器设备条件仪器设备条件 配备艾滋病抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标配备艾滋病抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、加样器（仪）、普通冰箱、低温冰箱、读数仪、洗板机、加样器（仪）、普通冰箱、低温冰箱、离心机、温箱或水浴箱、消毒与污物处理设备、实验室恒离心机、温箱或水浴箱、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。温设备、安全防护用品和生物安全柜。8检测设备检测设备安全设备安全设备设备条件设备条件 酶标读数仪酶标读数仪 洗板机洗板机 加样器（仪）加样器（仪） 普通冰箱普通

5、冰箱 低温冰箱低温冰箱 离心机离心机 温箱或水浴箱温箱或水浴箱 实验室恒温设备（空调）实验室恒温设备（空调） 一次性安全防护用品一次性安全防护用品 生物安全柜生物安全柜 高压灭菌器高压灭菌器 紧急洗眼装置紧急洗眼装置 紫外线灯紫外线灯 感应水龙头感应水龙头 消毒剂（含已配制）消毒剂（含已配制） 医疗废物桶（配黄色胶袋）医疗废物桶（配黄色胶袋） 应急小药箱应急小药箱 生物危险标志（重要地方）生物危险标志（重要地方）9 艾滋病筛查实验室布局：艾滋病筛查实验室布局： - 独立式独立式 - 混合式混合式- 开放式开放式 （掌握原则、灵活运用、发挥资源、联合检测）（掌握原则、灵活运用、发挥资源、联合检测

6、）10生物安全柜生物安全柜应应急急门门紧急撤离路线紧急撤离路线紧急撤离路线紧急撤离路线清洁实验物品柜清洁实验物品柜水槽水槽高压灭菌器高压灭菌器污染白大衣挂放处污染白大衣挂放处11生生物物安安全全柜柜应应急急门门紧急撤离路线紧急撤离路线紧急撤离路线紧急撤离路线清洁实验物品柜清洁实验物品柜水槽水槽高压灭菌器高压灭菌器污染白大衣挂放处污染白大衣挂放处细菌室细菌室生化实生化实验区域验区域免疫免疫实验实验区域区域121. 人员条件人员条件 至少由至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。的专业人员组成。2. 建筑条件建筑条件 需有艾滋病检测区域或

7、专用实验台，能开展简便、快需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。速检测。3. 设备条件设备条件 需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。 131. 相关制度的建立相关制度的建立 实验室管理制度实验室管理制度 检测操作流程检测操作流程（方法和试剂选择、初筛和复核、实验原始记录）（方法和试剂选择、初筛和复核、实验原始记录） 样本处理制度样本处理制度（采集处理、接收登记、阳性样本送检）（采集处理、接收登记、阳性样本送检） 结果报告制度结果报告制度

8、（结果报告、疫情报告、咨询、保密、随访）（结果报告、疫情报告、咨询、保密、随访） 安全制度安全制度（安全防护、消毒处理、人员健康监护、职业暴露处理程（安全防护、消毒处理、人员健康监护、职业暴露处理程序序) 质量控制制度质量控制制度（人员、设备、环境、（人员、设备、环境、 外部对照质控血清外部对照质控血清) 资料管理制度资料管理制度（标本记录、实验原始记录、阳性者资料）（标本记录、实验原始记录、阳性者资料）142. 相关表格的设定相关表格的设定 检测检测 检测标本登记记录、实验原始记录、质控记录、检测差错记录、阳性送检单检测标本登记记录、实验原始记录、质控记录、检测差错记录、阳性送检单 仪器设备

9、使用和维护仪器设备使用和维护 酶标仪使用和维护记录、生物安全柜使用和维护记录、高压灭菌器使用和维酶标仪使用和维护记录、生物安全柜使用和维护记录、高压灭菌器使用和维护记录护记录 温度监控温度监控 实验环境温湿度监控记录、冰箱温度监控记录实验环境温湿度监控记录、冰箱温度监控记录 人员健康监护记录人员健康监护记录 事故记录事故记录 实验事故登记记录、职业暴露个案登记表实验事故登记记录、职业暴露个案登记表 废弃物处理记录废弃物处理记录15第七条第七条 开展艾滋病检测工作的实验室要经过技术开展艾滋病检测工作的实验室要经过技术和条件验收，未经验收或验收不合格的实验室不和条件验收，未经验收或验收不合格的实验

10、室不得开展艾滋病检测工作。得开展艾滋病检测工作。 第十条第十条 迁移艾滋病检测实验室或变更艾滋病检测迁移艾滋病检测实验室或变更艾滋病检测实验室的类别，按本办法上述规定重新申请验收。实验室的类别，按本办法上述规定重新申请验收。 16 17第十三条第十三条 艾滋病检测实验室技术人员需要经过相关的业务培艾滋病检测实验室技术人员需要经过相关的业务培训，经考核合格者由相关机构发给培训证书，持证上岗。训，经考核合格者由相关机构发给培训证书，持证上岗。非卫生专业技术人员不得从事艾滋病检测工作。非卫生专业技术人员不得从事艾滋病检测工作。 第十五条第十五条 艾滋病检测实验室中使用的检测试剂必须是经国家艾滋病检测

11、实验室中使用的检测试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册、且符合相关要求的试剂。食品药品监督管理局注册、且符合相关要求的试剂。 第十六条第十六条 艾滋病检测筛查实验室发现艾滋病病毒抗体筛查呈艾滋病检测筛查实验室发现艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品必须及时送艾滋病检测确证实验室，不得阳性反应的样品必须及时送艾滋病检测确证实验室，不得擅自处理。擅自处理。 第十七条第十七条 艾滋病检测确证实验室出具的艾滋病病毒抗体确证艾滋病检测确证实验室出具的艾滋病病毒抗体确证报告应以保密方式发送。艾滋病病毒抗体确证试验结果应报告应以保密方式发送。艾滋病病毒抗体确证试验结果应当告知本人；本人为无行为能力人或者限制

12、行为能力人的，当告知本人；本人为无行为能力人或者限制行为能力人的，应当告知其监护人。应当告知其监护人。 第二十条第二十条 艾滋病检测实验室工作人员不得泄露艾滋病病人或艾滋病检测实验室工作人员不得泄露艾滋病病人或感染者的姓名、住址、检测结果等有关情况。感染者的姓名、住址、检测结果等有关情况。 18第二十六条第二十六条 艾滋病检测实验室应建立健全实验室质艾滋病检测实验室应建立健全实验室质量保证和质量控制体系，并有专人负责质量体系量保证和质量控制体系，并有专人负责质量体系的正常运转。的正常运转。第二十七条第二十七条 艾滋病检测筛查实验室必须参加省级以艾滋病检测筛查实验室必须参加省级以上实验室能力验证

13、；艾滋病检测确证实验室必须上实验室能力验证；艾滋病检测确证实验室必须参加中国疾病预防控制中心组织的实验室能力验参加中国疾病预防控制中心组织的实验室能力验证。艾滋病检测实验室能力验证结果由组织者定证。艾滋病检测实验室能力验证结果由组织者定期公开发布。期公开发布。 192021 常用样品为血液，包括血清、血浆和全血常用样品为血液，包括血清、血浆和全血 核对样品与送检单是否相符核对样品与送检单是否相符 检查样品状况检查样品状况 登记样品资料登记样品资料22 HIV-1/2混合型；混合型； 经国家食品药品监督管理局注册批准，批经国家食品药品监督管理局注册批准，批批检合格，并在有效期内；批检合格，并在有

14、效期内； 具有高敏感性和特异性；具有高敏感性和特异性； 每年国家试剂临床评估质量均为优良；每年国家试剂临床评估质量均为优良； 备两种以上试剂。备两种以上试剂。23酶联免疫吸附法（酶联免疫吸附法（ELISA） 第三代或第四代第三代或第四代发光方法发光方法快速方法快速方法 明胶颗粒凝集法（明胶颗粒凝集法（PA） 金标法金标法 硒标法硒标法24样品样品重复检测重复检测阳性反应阳性反应原有试剂加另外一种筛查试剂原有试剂加另外一种筛查试剂阴性反应阴性反应均阳性反应均阳性反应均阴性反应均阴性反应一阴一阳一阴一阳报告阴性报告阴性送确认实验室确认送确认实验室确认初筛检测初筛检测筛查试剂筛查试剂25 室内质控室

15、内质控 ELISA检测，每次实验必须加入外部对照质控检测，每次实验必须加入外部对照质控 实验记录实验记录 ELISA检测原始记录检测原始记录 PA检测原始记录检测原始记录 金标法检测原始记录金标法检测原始记录 硒标法检测原始记录硒标法检测原始记录26 阳性阳性(+)或或一阴一阳一阴一阳()结果结果发出发出“HIV抗体待复查抗体待复查”报报告告样品送广州市样品送广州市HIV抗体确证抗体确证 实验室确证实验室确证注：注：1、筛查检测呈筛查检测呈“阳性阳性”或或“一阴一阳一阴一阳”的结果不能出具阳的结果不能出具阳性报性报 告，不可告知受检者阳性结果。告，不可告知受检者阳性结果。 2、不可将受检者的检

16、测情况告知任何无关人员或单位。不可将受检者的检测情况告知任何无关人员或单位。阴性（阴性（-）结果结果发出发出“HIV抗体阴抗体阴 性性”报告报告27A、重新采集受检者的血样，、重新采集受检者的血样，二份血样二份血样一并上送。一并上送。 B、全血容量、全血容量35ml，血清或血浆容量，血清或血浆容量0.30.5ml，最好上送血，最好上送血清或血浆。清或血浆。 C、上送的血样、上送的血样标记病人姓名标记病人姓名，带盖，保持直立，路途远或天气炎，带盖，保持直立，路途远或天气炎热，容器内加冰块。热，容器内加冰块。 D、广州市、广州市HIV抗体阳性送检单抗体阳性送检单双面双面均必须填写完整，送检单均必须

17、填写完整，送检单与血样分开放置。与血样分开放置。 E、专人送样。、专人送样。 F、送样人领取样品受理单，仔细阅读，确认无误后方可离去。、送样人领取样品受理单，仔细阅读，确认无误后方可离去。 注：艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品必须及时送艾滋病检测确证注：艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品必须及时送艾滋病检测确证实验室，不得擅自处理。实验室，不得擅自处理。 28服务时间服务时间周周一一上上午午周周一一下下午午周周二二上上午午周周二二下下午午周周三三上上午午周周三三下下午午周周四四上上午午周周四四下下午午周周五五上上午午周周五五下下午午医院送样医院送样领取领取HIVHIV结结果果29广广 州州

18、市市 疾疾 病病 预预 防防 控控 制制 中中 心心（广（广 州州 市市 卫卫 生生 检检 验验 中中 心）心）艾滋病防制科常规样品受理单艾滋病防制科常规样品受理单共共 页页 第第 页页受理编号受理编号受检者姓名受检者姓名性别性别年龄年龄受检者住址受检者住址送检单位送检单位（个人）（个人）送检单位地址送检单位地址样品类别样品类别全血全血 血清血清样品数量样品数量样品状况样品状况正常正常 异常异常检测项目检测项目HIV抗体抗体送样人送样人送样日期送样日期 年年 月月 日日收样人收样人收样日期收样日期 年年 月月 日日交费情况交费情况 免费免费 已交费已交费 未交费未交费结果查询和报结果查询和报告

19、情况告情况1、结果在周二和周五下午凭受理编号和受检者姓名电话结果在周二和周五下午凭受理编号和受检者姓名电话查询，其它时间不受理查询。查询，其它时间不受理查询。2、书面报告可在上班时间到检测咨询门诊领取。、书面报告可在上班时间到检测咨询门诊领取。 查询电话查询电话83802426或或838241031110 本单位地址本单位地址广州市中山三路广州市中山三路23号号备注备注30 凭凭受理编号和病人姓名受理编号和病人姓名电话查询结果。电话查询结果。 凭凭受理单原件受理单原件领取领取HIV抗体筛查报告或抗体筛查报告或 HIV抗抗体确认检测报告。体确认检测报告。 注：注：已领取报告的单位不可再领取第二份

20、报告。已领取报告的单位不可再领取第二份报告。 过往已确认过的病例可领取既往检测查询报过往已确认过的病例可领取既往检测查询报 告。告。31 检测后咨询随访检测后咨询随访 对初筛阴性和阳性者均做好检测后咨询。对初筛阴性和阳性者均做好检测后咨询。 对阳性者做好个案调查、登记等工作。对阳性者做好个案调查、登记等工作。 对确认结果对确认结果“HIV抗体不确定抗体不确定”者和年龄小于者和年龄小于18个月的个月的HIV抗体阳性婴幼儿做好随访工作。抗体阳性婴幼儿做好随访工作。 疫情报告疫情报告 领取确认结果阳性报告后，检验科、预防保健科及临领取确认结果阳性报告后，检验科、预防保健科及临床科室等有关科室要共同配

21、合，做好疫情报告工作床科室等有关科室要共同配合，做好疫情报告工作 。 检测量月报检测量月报 每月每月10日前将上月检测量经疫情网络上报。日前将上月检测量经疫情网络上报。3233 定义：对确定和达到质量要求所需的定义：对确定和达到质量要求所需的职能和活动的管理。是制定和实施质职能和活动的管理。是制定和实施质量方针的一系列管理职能，通过量方针的一系列管理职能，通过来实现质量管理。来实现质量管理。 实验室质量体系文件应覆盖检测前、检测、检测后整个过程，实验室质量体系文件应覆盖检测前、检测、检测后整个过程， 包括质量手册、程序文件、标准操作规程（包括质量手册、程序文件、标准操作规程（SOP）和记录。）

22、和记录。3435 定义定义: : 质量保证是指从接收检验标本质量保证是指从接收检验标本起，到实验室发出报告止，为确保实起，到实验室发出报告止，为确保实验室最终报告结果的正确性所进行的验室最终报告结果的正确性所进行的全过程，包括采取各种行政和技术上全过程，包括采取各种行政和技术上的措施和方法。的措施和方法。 36 质量保证是确保实验结果质量的基本质量保证是确保实验结果质量的基本条件，其实施程度直接影响试验结果和最条件，其实施程度直接影响试验结果和最后报告的每个参数。质量保证取决于良好后报告的每个参数。质量保证取决于良好的的，并经良好的，并经良好的加以鉴定。因此，要求所有的实验室工加以鉴定。因此，

23、要求所有的实验室工作人员有责任时刻注意解决影响实验结果作人员有责任时刻注意解决影响实验结果的每个环节上可能出现的问题。的每个环节上可能出现的问题。 37 HIV HIV筛查实验室的质量保证是整个艾筛查实验室的质量保证是整个艾滋病检测工作的组成部分。滋病检测工作的组成部分。1. 1. 合理的组织结构，明确的职责分工。合理的组织结构，明确的职责分工。2. 2. 保证实验室主要负责人和检测人员相对保证实验室主要负责人和检测人员相对 稳定。稳定。3. 3. 给予人力和物力的支持。给予人力和物力的支持。38 HIVHIV筛查实验室和确证实验室的设置及其建筛查实验室和确证实验室的设置及其建筑、设施、设备必

24、须符合筑、设施、设备必须符合“管理办法管理办法”要求。要求。 有独立的实验用房（或至少有专用的检测台），污染有独立的实验用房（或至少有专用的检测台），污染区和清洁区要分开。区和清洁区要分开。 检测器材，包括酶标读数仪和洗板机、精确的移液器、检测器材，包括酶标读数仪和洗板机、精确的移液器、专用的普通冰箱、低温冰箱、离心机以及各种消毒与污物专用的普通冰箱、低温冰箱、离心机以及各种消毒与污物处理设施、安全防护用品和恒温设施。处理设施、安全防护用品和恒温设施。 可在医院或乡镇（中心）卫生院内，有一间可在医院或乡镇（中心）卫生院内，有一间实验室或在检验科内设一个专台，并可存放试剂、试验器实验室或在检验科

25、内设一个专台，并可存放试剂、试验器材和登记本、档案等专用物品。材和登记本、档案等专用物品。39 实验室人员必须接受实验室人员必须接受HIV HIV 抗体检测技术班抗体检测技术班培训并获得合格证书才能上岗操作。培训并获得合格证书才能上岗操作。应该通过定期和不定期的业务学习和在岗培训，从应该通过定期和不定期的业务学习和在岗培训，从不同渠道不断地提高自己的检验水平。不同渠道不断地提高自己的检验水平。都应对质控的重要性、基础知识和一般方法都应对质控的重要性、基础知识和一般方法有较充分的了解，并在质控的实际过程中不断进行培训提高。有较充分的了解，并在质控的实际过程中不断进行培训提高。必须具有较高的质量意

26、识，领导整个实验室工作必须具有较高的质量意识，领导整个实验室工作人员参与质量管理工作，并对实验室检验人员定期作出评价，包人员参与质量管理工作，并对实验室检验人员定期作出评价，包括工作的准确性、工作效率、执行安全条例和规章制度、职业道括工作的准确性、工作效率、执行安全条例和规章制度、职业道德、出勤率以及上岗资格等。德、出勤率以及上岗资格等。40 检测技术检测技术 质量控制和质量管理质量控制和质量管理 生物安全生物安全 生物安全知识培训至少生物安全知识培训至少1次次/年（以记录为证）年（以记录为证） 新进人员培训（以记录为证）新进人员培训（以记录为证）培训内容培训内容41424 4设备维修与校准设

27、备维修与校准 实验室中的设备必须定期进行维护与校准，并制定设备维实验室中的设备必须定期进行维护与校准，并制定设备维护与校准的制度。护与校准的制度。 主要仪器设备包括：酶标仪、洗板机、生物安全柜、移液器主要仪器设备包括：酶标仪、洗板机、生物安全柜、移液器（加样枪）、温湿度计。（加样枪）、温湿度计。 43（1 1）ELISA ELISA 洗板机与酶标仪洗板机与酶标仪 ： 一年至少应该校准一年至少应该校准1 1次。次。每天：每次操作要按要求设立对照。核对酶标仪滤光片波长，检查洗板机管道是否通 畅，是否有漏液现象。每周：清洁仪器表面，保护光学零件，不沾灰尘。 每月：洗涤时检查各孔是否与相应的冲洗头对位

28、良好，负压是否符合规定要求，这是 保证各孔洗涤均衡一致的前提。每年：检查、清洗滤光片，如果滤光片出现破裂或霉点则要更换，根据仪器内具有 的校准程序或使用校准板，对滤光片的所用波长光密度的精密度进行校验， 测 定20次，计算精密度。精密度应该控制在厂家说明书中所规定的范围 ( 建议请 厂方代表校验 )。校验结果要有记录，保留测定原始结果。 根据实际使用情况更换主要设备（如洗板机、全自动免疫分析系统）内的所有 液体装置和管子(要求厂方代表维修 )。44 （2 2）移液器）移液器 ： 一年至少应该标定或校准一年至少应该标定或校准1 1次，若发现移液器有异常情次，若发现移液器有异常情 况，应该立即进行

29、校准。况，应该立即进行校准。 移液器标定方法包括吸取有色溶液进行光谱分析、吸取移液器标定方法包括吸取有色溶液进行光谱分析、吸取 蒸馏水称量校准、吸取放射性同位素计数校准，以及使蒸馏水称量校准、吸取放射性同位素计数校准，以及使 用配套校准盒等等。用配套校准盒等等。 推荐在检测过程中，每个加样工序使用专用的移液器。推荐在检测过程中，每个加样工序使用专用的移液器。 45（3）生物安全柜）生物安全柜 1年至少校准年至少校准1次。次。（4）温湿度计）温湿度计 1年至少校准年至少校准1次。次。46 仪器使用记录仪器使用记录 酶标仪、洗板机、生物安全柜、高压灭菌器每次使酶标仪、洗板机、生物安全柜、高压灭菌器

30、每次使用后，使用人必须登记使用情况。用后，使用人必须登记使用情况。 温度监控温度监控 每天检查和记录冰箱、孵育箱温度。每天检查和记录冰箱、孵育箱温度。47 （一）操作规程和操作手册（一）操作规程和操作手册 每个实验都应有操作规程或操作手每个实验都应有操作规程或操作手册，要准确、规范，妥善保管，每个检册，要准确、规范，妥善保管，每个检验人员都能随时查阅。验人员都能随时查阅。48质量手册质量手册程序文件程序文件标准操作规程（标准操作规程（SOPSOP）和记录）和记录纲领性文件纲领性文件指导性文件指导性文件实施性文件实施性文件49广州市疾病预防控制中心广州市疾病预防控制中心（广州市卫生检验中心）（广

31、州市卫生检验中心）Guangzhou center for disease Guangzhou center for disease prevention and control prevention and control (guangzhou hygienic examination (guangzhou hygienic examination center)center)质量手册质量手册Quality manualQuality manual第第3 3版版 （第（第0 0次修订）次修订）3nd edition3nd edition文件编号文件编号20062006年年6 6月月1 1日日

32、广州市疾病预防控制中心广州市疾病预防控制中心（广州市卫生检验中心）（广州市卫生检验中心）Guangzhou center for disease Guangzhou center for disease prevention and control prevention and control (guangzhou hygienic examination (guangzhou hygienic examination center)center)程序文件程序文件Program fileProgram file第第3 3版版 （第（第0 0次修订）次修订）3nd edition3nd edit

33、ion20062006年年6 6月月1 1日日广州市疾病预防控制中心广州市疾病预防控制中心（广州市卫生检验中心）（广州市卫生检验中心）作业指导书作业指导书标题：艾滋病病毒操作危害风险评估标题：艾滋病病毒操作危害风险评估文件编号：GZCDC/WDAD29版号：第1版编写：审核：批准： 年 月 日 年 月 日 年 月 日修改页码修改内容修改人批准人生效日期修改记录50 SOP SOP 是书面质量体系中的一个很重要的部分。是书面质量体系中的一个很重要的部分。SOPSOP是指导完成检测工作的一整套书面操作指南，以避免或是指导完成检测工作的一整套书面操作指南，以避免或减少因不同的操作者所引起的误差。减少

34、因不同的操作者所引起的误差。 SOP SOP 由各岗位工作人员起草，实验室负责人审定。由各岗位工作人员起草，实验室负责人审定。 每年至少修订一次每年至少修订一次, ,修订后的修订后的SOPSOP按审批程序批准后使用。按审批程序批准后使用。 SOPSOPSOPSOPSOPSOPSOPSOP5152需上墙的规范：需上墙的规范： 实验室工作制度实验室工作制度 安全工作守则或制度安全工作守则或制度 初筛试验流程图初筛试验流程图 职业暴露处理流程图职业暴露处理流程图 53安全防护情况安全防护情况 实验人员个人防护：实验人员个人防护： 防护服防护服 ；防护帽；防护帽 ； 口罩口罩 ；防护手套；鞋套或实验用

35、鞋；防护手套；鞋套或实验用鞋 。 实验人员安全操作：实验人员安全操作： 有限制进入实验室标识有限制进入实验室标识 ；实验区域内不可存放个人物品；实验区域内不可存放个人物品 ；进出实；进出实验室路径要规范验室路径要规范 ；穿着过的污染防护服处理要规范；穿着过的污染防护服处理要规范 ；样品运送要放置；样品运送要放置于密闭容器内于密闭容器内 ；试剂和血样冰箱要分开。；试剂和血样冰箱要分开。 废弃物收集处理情况废弃物收集处理情况 化学消毒剂有效期内使用；废弃物盛装容器要符合防渗、防漏、防化学消毒剂有效期内使用；废弃物盛装容器要符合防渗、防漏、防穿刺等安全要求。穿刺等安全要求。 消毒处理方法：消毒处理方

36、法： 实验室内高压灭菌、实验室内化学消毒、单位集中消毒处理；消毒实验室内高压灭菌、实验室内化学消毒、单位集中消毒处理；消毒处理记录处理记录 。54封面封面（1 1）标题）标题（2 2）编写、审核、批准人及相应日期）编写、审核、批准人及相应日期（3 3）修改内容、修改日期、修改批准人）修改内容、修改日期、修改批准人正文正文（1 1）标题和编号）标题和编号（2 2）目的、应用范围和方法或程序）目的、应用范围和方法或程序（3 3）支持性文件）支持性文件（4 4）相应记录）相应记录（5 5）附录，包括相关的附加文件如）附录，包括相关的附加文件如记录记录表格、设备和试剂盒说明书表格、设备和试剂盒说明书

37、等。等。 SOPSOPSOPSOPSOPSOPSOPSOP55 作作 业业 指指 导导 书书 目目 录录 编号编号 标题标题GZCDC/WDAD01 GZCDC/WDAD01 艾滋病病毒抗体酶联免疫吸附法（艾滋病病毒抗体酶联免疫吸附法（ELISAELISA）检测细则）检测细则GZCDC/WDAD02 GZCDC/WDAD02 艾滋病病毒抗体明胶凝集法（艾滋病病毒抗体明胶凝集法（PAPA）检测细则）检测细则GZCDC/WDAD03 GZCDC/WDAD03 梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附法（梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附法（ELISAELISA）检测细则）检测细则GZCDC/WDAD04 GZCDC/W

38、DAD04 艾滋病类样品的管理制度艾滋病类样品的管理制度GZCDC/WDAD05 DENLEY-DRAGON (MK-2)GZCDC/WDAD05 DENLEY-DRAGON (MK-2)全自动酶标仪操作规程全自动酶标仪操作规程GZCDC/WDAD06 GZCDC/WDAD06 艾滋病类样品采集、收检程序艾滋病类样品采集、收检程序GZCDC/WDAD07 GZCDC/WDAD07 科室安全防护和内务管理程序科室安全防护和内务管理程序GZCDC/WDAD08 GZCDC/WDAD08 艾滋病实验室生物安全防护艾滋病实验室生物安全防护GZCDC/WDAD09 HIVGZCDC/WDAD09 HIV

39、职业暴露后预防职业暴露后预防GZCDC/WDAD10 GZCDC/WDAD10 艾滋病病毒抗体酶联免疫吸附法（艾滋病病毒抗体酶联免疫吸附法（ELISAELISA）检测细则）检测细则 （国产）（国产）GZCDC/WDAD11 GZCDC/WDAD11 艾滋病病毒艾滋病病毒1+21+2型抗体免疫印迹试验型抗体免疫印迹试验(HIV1+2 Western (HIV1+2 Western Blot) Blot)GZCDC/WDAD12 Forma class B2GZCDC/WDAD12 Forma class B2生物安全柜操作规程生物安全柜操作规程56广州市疾病预防控制中心广州市疾病预防控制中心（广

40、州市卫生检验中心）（广州市卫生检验中心）作业指导书作业指导书 标题：艾滋病病毒操作危害风险评估标题：艾滋病病毒操作危害风险评估文件编号：GZCDC/WDAD29版号：第1版编写：审核：批准： 年 月 日 年 月 日 年 月 日修改页码修改内容修改人批准人生效日期修改记录57广州市疾病预防控制中心作业指导书广州市疾病预防控制中心作业指导书 文件编号：文件编号：GZCDC/WDAD29GZCDC/WDAD29标题：艾滋病病毒操作危害风险评估标题：艾滋病病毒操作危害风险评估 版号：第版号：第 1 1 页页 共共 2 2 页页1.1.目的目的明确艾滋病病毒操作危害风险，避免发生生物安全事故。2.2.使

41、用范围使用范围本操作规程适用于本实验室危害风险评估及事故处理。3.3.职责职责操作人员：按照相关危害风险评估及事故处理进行正确实验操作。质量监督员：负责监督实验是否按危害风险评估及事故处理原则进行。科室负责人：负责综合管理。4.4.危害风险评估危害风险评估按照实验室生物安全通用要求（GB 194892004），艾滋病病毒属于危害等级病原微生物，艾滋病病毒主要通过血液传播、性接触传播、母婴传播三种途径传播，一般不通过气溶胶传播。根据标本中艾滋病病毒含量和操作危险性评估本实验室危害风险。4.1 艾滋病血清学检测：艾滋病病毒含量较低、操作危险性较低，在BSL2级实验室内，在普通操作台或生物安全柜内操

42、作，实验人员做好个人防护。4.2 HIV感染者淋巴细胞分离：艾滋病病毒含量较高、操作危险性较高，在BSL2级实验室内，在生物安全柜内操作，实验人员做好个人防护。4.3 HIV感染者CD4T淋巴细胞检测：艾滋病病毒含量较高、操作危险性较高，在BSL2级实验室内，标本前处理部分须在生物安全柜内操作，实验人员做好个人防护。4.4 艾滋病病毒核酸提取：艾滋病病毒含量较高、操作危险性较高，在BSL2级实验室内，标本前处理部分须在生物安全柜内操作，实验人员做好个人防护。4.5 艾滋病病毒分离：艾滋病病毒含量较高、操作危险性较高，在BSL3级实验室操作，实验人员做好个人防护。4.6 根据危害风险评估制定相应

43、实验的操作规程。4.7 实验人员严格按相应操作规程进行操作。4.8 制定紧急事故处理办法。58广州市疾病预防控制中心作业指导书广州市疾病预防控制中心作业指导书 文件编号：文件编号：GZCDC/WDAD29GZCDC/WDAD29标题：艾滋病病毒操作危害风险评估标题：艾滋病病毒操作危害风险评估 版号：第版号：第 2 2 页页 共共 2 2 页页5.5.事故处理事故处理51 建立标本种丢失、破坏或实验室偶发事故应急处理办法，制定相应记录。52 实验室内备有75%酒精、高效氯等消毒剂。53 制定事故登记表及事故上报程序。6.6.支持性文件支持性文件6.1 科室安全防护和内务管理程序 （文件编号：GZ

44、CDC/WDAD07）6.2 中华人民共和国传染病防治法实施办法6.3 实验室生物安全通用要求（GB 194892004）6.4 全国艾滋病检测技术规范7.7.附录附录71 艾滋病防制科生物危害评估表59艾滋病防制科生物危害评估表艾滋病防制科生物危害评估表微生物种类来源传播途径致病性稳定性预防治疗实验项目生物危害评估实验项目生物危害评估GZCDC/WDAD29-0160 （1） 记录是为已完成的活动或得到的结果提供客观证据的文件。记录是为已完成的活动或得到的结果提供客观证据的文件。 （2） 记录有一定格式，相应的表格经过实践和评审使之完善。记录有一定格式，相应的表格经过实践和评审使之完善。 （

45、3） 实验室工作人员不但应注重试验，而且应重视记录。实验室工作人员不但应注重试验，而且应重视记录。记录实验室温度、试剂厂名称和批号。记录实验室温度、试剂厂名称和批号。详细的记录是分析、统计、总结的基础。详细的记录是分析、统计、总结的基础。 （4） 资料的可追查性资料的可追查性当报警信号发出后，可以追查原始资料和原始操作记录。当报警信号发出后，可以追查原始资料和原始操作记录。完整资料将为科研和法律诉讼提供可靠的证据。完整资料将为科研和法律诉讼提供可靠的证据。 （5） 更改数据或文字更改数据或文字按规则进行按规则进行6162 1. 文件和试验记录存档，一般应至少文件和试验记录存档，一般应至少10年

46、期限。年期限。最好同时使用计算机最好同时使用计算机 保存各种文件和记录。保存各种文件和记录。内含病人姓名的所有工作记录一定要保密。内含病人姓名的所有工作记录一定要保密。 2. 存档的资料不应随便堆放，应按一定方式编号，便于查询。查询不存档的资料不应随便堆放，应按一定方式编号，便于查询。查询不 到的存档资料等于没有存档。到的存档资料等于没有存档。 3. 资料的存档制度、查询制度、借阅制度、保密制度应健全。资料的存档制度、查询制度、借阅制度、保密制度应健全。 4. 资料是实验室的公有财产，即使是一个人做的实验，做的记录，不资料是实验室的公有财产，即使是一个人做的实验，做的记录，不 可以任意将资料带

47、走、借走、丢失、不归还或更改。可以任意将资料带走、借走、丢失、不归还或更改。 5. 实验室应有人专职或兼职任资料保管员，以便查询。查不到的资料实验室应有人专职或兼职任资料保管员，以便查询。查不到的资料 等于没有做记录，也等于没有做前面的一切有关工作，因此，检验等于没有做记录，也等于没有做前面的一切有关工作，因此，检验 人员必须重视记录和存档工作。人员必须重视记录和存档工作。 63 定义定义 质量控制是指为确保实验工作正常进行而在每一次质量控制是指为确保实验工作正常进行而在每一次实验过程中必须采取的各种措施。实验过程中必须采取的各种措施。 64 实验前质量控制实验前质量控制 采集标本前病人的准备

48、；采集标本前病人的准备；正确的标本采集方法；正确的标本采集方法；准确及时的运送标本；准确及时的运送标本；实验前正确地处理和保存标本实验前正确地处理和保存标本。 实验中质量控制实验中质量控制 质控品的准备；质控品的准备；试剂盒的评价；试剂盒的评价；开展开展Levey-Jennings 质控图质控（或质控图质控（或“即刻法即刻法”质质控）。控）。 实验后质量控制实验后质量控制 实验后准确填写检验结果；实验后准确填写检验结果；及时发出报告；及时发出报告；正确地解释检验结果的临床意义。正确地解释检验结果的临床意义。 651 1试剂种类试剂种类 必须使用经中国药品监督管理局批准，经过中国药品生物制品检定

49、所批批检定合格的国产或进口HIV 抗体初筛和确认检测试剂。初筛用的HIV 检测试剂必须是HIV1/2 混合型。2 2必须使用在有效期内且保存条件符合要求的诊断试剂必须使用在有效期内且保存条件符合要求的诊断试剂3 3必须按照必须按照SOP SOP 中规定的要求进行操作中规定的要求进行操作 包括进行检测的实验条件如阳性对照和阴性对照的设置、试剂、标本加样量、孵育时间、反应温度、洗涤程序和次数等。4 4标本质量标本质量 在实验前必须检查所有待检标本的质量，如有脂血、溶血或污染的标本原则上不能使用，必须重新采集标本。5 5标本使用标本使用 冰冻的标本待全部融化后必须充分摇匀。66 1 1内部对照质控血

50、清内部对照质控血清 内部对照质控血清是指每个试剂盒内厂方提 供的一套阴性和阳性对照。 2 2外部对照质控血清外部对照质控血清 外部对照质控血清是各级实验室为了监控每 次检测的重复性和稳定性以及检验试剂盒批间差 异而设置的一套阴性和阳性对照血清。设立外部 对照还可以提示标本处于临界值状态时的检验操 作情况。 67 理想的外部对照应该包括阳性对照、弱阳理想的外部对照应该包括阳性对照、弱阳性对照、临界值对照和阴性对照。在每次实验时性对照、临界值对照和阴性对照。在每次实验时应设置一个单一浓度水平的质控品即弱阳性对照。应设置一个单一浓度水平的质控品即弱阳性对照。这个弱阳性对照的值以设定在该试剂盒临界值这

51、个弱阳性对照的值以设定在该试剂盒临界值 2 23 3倍倍为宜。为宜。681 1）通过向有关机构购买获得通过向有关机构购买获得2 2）通过实验室制备获得）通过实验室制备获得 ( ( 比较经济的方法比较经济的方法 ) ) 混合试剂盒内部对照血清，等量分装。 混合HIV 抗体阳性或阴性人血清，3000转/分钟离心15分钟，用0.2m 生物滤膜过滤除菌后再进行56 30分钟加热灭活处理。弱阳性对照可以通过使用HIV抗体阴性的正常人血清梯度稀释HIV抗体强阳性血清并经标定后得到。691 1）外部对照血清或血浆的一次制备量应该足够本实验室）外部对照血清或血浆的一次制备量应该足够本实验室 一年使用。一年使用

52、。2 2）外部对照血清应该均一、无菌。）外部对照血清应该均一、无菌。3 3）外部对照血清标定后应该）外部对照血清标定后应该等量分装等量分装，每个分装的量应，每个分装的量应 足够一周使用。足够一周使用。4 4）外部对照应该分类作好标记，使用不同颜色的标签。）外部对照应该分类作好标记，使用不同颜色的标签。5 5）外部对照血清应该存放在）外部对照血清应该存放在70 70 ，如无条件则存放，如无条件则存放 在非自动除霜的在非自动除霜的20 20 冰箱。冰箱。6 6）外部对照血清一旦融解以后应该存放在）外部对照血清一旦融解以后应该存放在 2 28 8 ，一，一 周后必须弃去，不能重新冻存。周后必须弃去，

53、不能重新冻存。70 原则上每一次实验必须使用外部对照质控血原则上每一次实验必须使用外部对照质控血清，建立质控图，以便监控实验操作的一致性和清，建立质控图，以便监控实验操作的一致性和结果的准确性。同时可以了解各批试剂盒之间的结果的准确性。同时可以了解各批试剂盒之间的误差误差( (批间差异批间差异) )。71 对对HIVHIV抗体检测抗体检测(ELISA)(ELISA)外部对照质控血清的评价采用外部对照质控血清的评价采用多次测定的多次测定的ODOD值的均值上下各两个标准差的范围，即外部对值的均值上下各两个标准差的范围，即外部对照照ODOD值的值的9595可信限为可信限为 x x 2 2s s。各个

54、外部对照的标定即确。各个外部对照的标定即确定外部对照的均值和可信限，可用几个统计学参数如均值定外部对照的均值和可信限，可用几个统计学参数如均值( ( x x ) )、标准差、标准差( (s s) )以及变异系数以及变异系数( (cvcv) )来确定可信限。来确定可信限。 算术平均值算术平均值( ( x x ) )代表一组代表一组ODOD值数的平均值。值数的平均值。 标准差标准差( (s s) ) 变异系数变异系数( (cvcv) )，72次数次数质控血清质控血清ODODCut-offCut-off值值ODODS/COS/CO值值1 10.1800.1800.1050.1051.711.712

55、20.1900.1900.1050.1051.811.813 30.2000.2000.1050.1051.901.904 40.2280.2280.1050.1051.811.815 50.1370.1370.1050.1051.091.096 60.2210.2210.1050.1052.102.107 70.1500.1500.1050.1051.431.438 80.1700.1700.1050.1051.621.629 90.1800.1800.1050.1052.142.1410100.1500.1500.1050.1051.431.4311110.2000.2000.1050.1

56、051.901.9012120.1420.1420.1050.1051.351.3513130.2100.2100.1050.1052.002.0014140.2210.2210.1050.1051.521.5215150.1800.1800.1050.1051.711.7116160.1900.1900.1050.1051.811.8117170.1600.1600.1050.1051.521.5218180.2210.2210.1050.1052.102.1019190.2100.2100.1050.1052.002.0020200.1500.1500.1050.1051.431.43范例

57、：参考郑怀竞主编免疫学检验室间质评与室内质控，范例：参考郑怀竞主编免疫学检验室间质评与室内质控，19971997年出版。年出版。73 x x 计算公式为：计算公式为： x x x x = = N N s s 计算公式为：计算公式为： ( ( x xn n - - x x ) )2 2 s s = = N N cvcv 计算公式为：计算公式为： s s cvcv = x 100 % = x 100 % x x 74通过上表，计算通过上表，计算S/COS/CO值的均值（值的均值（x x），标准差（），标准差（s s）和变异系数（）和变异系数（cvcv） x x =1.72 =1.72 s s =0

58、.29 =0.29 cvcv =16.9% =16.9% 根据以上数据绘制室内质控框架图根据以上数据绘制室内质控框架图, , 开始质量控制开始质量控制次数次数日期日期质控血清质控血清ODODCut-offCut-off值值 S/CO S/CO值值21217.47.40.1600.1600.1050.1051.521.5222227.77.70.1900.1900.1050.1051.811.8123237.87.80.2000.2000.1050.1051.901.9024247.117.110.2280.2280.1050.1051.811.8125257.127.120.1390.1390

59、.1050.1051.101.1026267.157.150.2210.2210.1050.1052.102.1027277.167.160.1500.1500.1050.1051.431.4328287.187.180.1700.1700.1050.1051.621.6229297.197.190.2250.2250.1050.1052.142.14750.81.11.41.722.32.62021222324252627282930次数76 如果检验进入质控状态时，质控对照值超出如果检验进入质控状态时，质控对照值超出 2 2s s，则本次实验结果不能被接受则本次实验结果不能被接受( ( 失

60、控失控 ) )。 位移：位移：如果几个连续质控对照值如果几个连续质控对照值 (3-5 (3-5次次) ) 都落在均值都落在均值( (中心线中心线) )的一边则称之为位移，通常表示存在大的变化的一边则称之为位移，通常表示存在大的变化 ( ( 失控失控 ) )。 引起位移的原因有使用新批号的试剂盒、使用新试剂、实验员的更引起位移的原因有使用新批号的试剂盒、使用新试剂、实验员的更换、孵育温度的改变、仪器换、孵育温度的改变、仪器 ( ( 移液器移液器 ) ) 故障等。故障等。 趋势：趋势：当几个连续质控对照值当几个连续质控对照值(5-7(5-7个个) )几乎按一个方向几乎按一个方向分布时称之为趋势分布