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文档简介
1、1会计学FISH技术临床应用技术临床应用 基本原理:应用荧光染料标记探针基本原理:应用荧光染料标记探针DNADNA,变性成,变性成单链后与变性后的染色体或细胞核靶单链后与变性后的染色体或细胞核靶DNADNA杂交,杂交,在荧光显微镜下观察并记录结果。在荧光显微镜下观察并记录结果。生命科学中的生命科学中的“钓鱼钓鱼” 技术技术 制片制片预处理预处理FISHFISH结果分析结果分析 破坏细胞膜利于探针破坏细胞膜利于探针 杂交。杂交。 蛋白酶消化、蛋白酶消化、HCl处理处理 变性变性 杂交杂交 洗涤洗涤 复染复染 制备的质量制备的质量 新鲜程度新鲜程度操作流程简图操作流程简图结结 果果 判判 断断FI
2、SH技术的临床应用技术的临床应用赵荣赵荣 骨髓象骨髓象(CML)赵荣赵荣 血象血象 (CML)覃长江血象覃长江血象(MD/MPD)覃长江骨髓象覃长江骨髓象 (MD/MPD) BCR/ABL阴性阴性(图片来自覃长江) MD/MPDBCR/ABL阳性阳性(图片来自赵荣) CML陆晓逸骨髓象(陆晓逸骨髓象(CLL)D13S25/P53基因阴性基因阴性 (来自陆晓逸) CSP12基因阴性基因阴性 (来自陆晓逸)PML/RARa阴性阴性(图片来自彭志新)卜丽敏骨髓象卜丽敏骨髓象13+GLP13/GLP21阴性阴性概 述概 述疾病名称检测探针标记颜色探针定位探针名称患者中常见异常类型膀胱癌GLP P16/
3、CSP17 红/绿P16:9p21CSP17:17p11.1-q11.1 P16:细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子2ACSP17:17号染色体着丝粒 P16缺失;17号染色体非整倍性 临床意义 随着对膀胱癌遗传学改变的深入研究,人们发现9号染色体部分(如p16位点)或全部丢失是最常见遗传学改变,且这一改变与膀胱癌的早期发生密切相关。P16为抑癌基因,通过CDK4对细胞增殖分裂起负调控作用,CDK4与cyclin D形成复合物促进细胞从G1-S转换,促进细胞有丝分裂,P16基因异常在膀胱癌发生早期出现.膀胱癌膀胱癌FISH 探针组探针组( (一一) )疾病名称检测探针标记颜色探针定位探针名称患者中
4、常见异常类型膀胱癌CSP 7/CSP3 红/绿CSP7: 7p11.1-q11.1 CSP 3: 3p11.1-q11.13 、7号染色体着丝粒3、7号染色体非整倍性 临床意义膀胱癌的发展与染色体不稳定性紧密相连,特别是与3号、7号及17号染色体的非整倍性密切相关。3、7、17 染色体的不稳定性与肿瘤的浸润行为有关 ,3,7,17改变在病程发展中出现。膀胱癌膀胱癌FISH 探针组探针组(二二)CSP 7/CSP3阴性阴性 CSP7/CSP3阳性阳性临床检测方法临床检测方法方方 法法特异性()特异性()敏感性()敏感性()形态学检测形态学检测909055-8055-80HPVHPV检测检测646
5、4959584-10084-100FISHFISH90909090三种检测方法比较三种检测方法比较宫颈癌宫颈癌 & TERC基因基因GLPTERC/CSP3阴性阴性 GLPTERC/CSP3阳性阳性 谢谢谢谢!陆晓逸骨髓象(陆晓逸骨髓象(CLL)D13S25/P53基因阴性基因阴性 (来自陆晓逸) CSP12基因阴性基因阴性 (来自陆晓逸)PML/RARa阴性阴性(图片来自彭志新)13+GLP13/GLP21阴性阴性疾病名称检测探针标记颜色探针定位探针名称患者中常见异常类型膀胱癌CSP 7/CSP3 红/绿CSP7: 7p11.1-q11.1 CSP 3: 3p11.1-q11.13 、7号染色体着丝粒3、7号染色体非整倍性 临床意义膀胱癌的发展与染色体不稳定性紧密相连,特别是与3号、7号及
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