P53基因与癌症与衰老相关性的概述

1、P53基因与癌症和衰老相关性的概述摘要：p53基因抑制肿瘤是众所周知的，但可能也影响与肿瘤抑制无关的衰老过程。p53对各种应激做出反应，诱导细胞凋亡或阻滞细胞周期，以抑制肿瘤的发展。然而，在非癌衰老过程中p53的作用是复杂的。一方面，p53基因能诱导细胞衰老或凋亡来抑制癌症，但其后果就是加快了衰老。另一面，P53可以减缓生长和减少与生长有关的应激使细胞存活，最终延缓衰老。要想阐明其在衰老过程中的作用，并针对P53或P53转录靶点来治疗癌症和改善衰老，就必须更好地了解p53功能的多样化。关键词：DNA损伤，细胞生长；细胞衰老；细胞凋亡，无氧酵解引言：p53基因是一种转录因子，其在哺乳动物中抑制肿

2、瘤的发生已经得到了广泛研究（13），但越来越多的证据表明，p53基因也影响衰老过程。但是，p53究竟是怎样影响衰老的还不是很清楚。p53调控大量有致癌作用的基因的转录，包括细胞周期阻滞（P21，GADD45，14-3-3s，RPRM），细胞凋亡（Scotin，killer，FAS，BBC3，PERP，53BP1，BAX，LRDD，PMAIP1），抑制有氧糖酵解（GLUT1，TIGAR，己糖激酶，磷酸甘油酸变位酶），促进氧化磷酸化（OXPHOS）（SCO2，AIF），细胞生长（PTEN，AMPK测试，TSC2，IGF-BP3）（4），以及蛋白质的翻译（sestrins）（5）。P53还具有与转录

3、无关的其他作用，包括调节微RNA加工（6），DNA修复（7），线粒体蛋白存活（8）和核糖体合成（9,10）。因此，p53是维持基因组完整性，调节细胞生长和细胞增殖的关键，是抑制肿瘤的核心（11）。同时，p53通过一个非癌症相关的机制影响寿命，这个机制来源于线虫p53基因（CEP-1）的敲除实验，延长了寿命（12）。此外，人类流行病学研究显示，p53蛋白密码子72（精氨酸-脯氨酸）中氨基酸变化产生的多态性减少潜在的细胞凋亡（13），并导致癌症风险增加。但是，这恰恰增加了对p53介导的细胞凋亡预防癌症并且影响衰老这一观点的支持（13-15）。所以，设计和实验能够增强肿瘤p53的功能的相关治疗方法，

4、对改善或延缓衰老可能是有用的。1、p53和细胞衰老的关系改变了p53活性的小鼠模型论证了，除了在肿瘤抑制方面，p53基因还影响衰老和寿命。这些模型包括p53基因中简单无效突变的同源或杂交小鼠到能够破坏p53的某些生化功能的点突变的小鼠。综述了在生物体中p53基因功能的复杂性。1.1相比于p53基因的缺失，BAC中p53基因的过度表达能够降低癌症水平而不影响衰老（16）。此外，Arf和p53的过度表达进一步降低癌症水平，延长寿命（17）。类似地，减少MDM2（负调节p53基因），提高p53水平降低癌症的发病率而不影响衰老（18）。因此，增加野生型p53的水平显然能降低癌症的发病率，而不影响衰老。

5、从理论上讲，单纯提高p53水平并不会导致正常细胞中p53活性的增强。只有当那些控制p53活性的蛋白超出正常水平时提高p53水平才是有害的。1.2 p53基因的多种亚型及p53相关的家族成员（p63和p73）是由使用不同启动子、选择性剪接和翻译起始位点产生的（19,20）。它们影响癌症的方式可能不同，其差异并不清楚（21）。除了具有独特的功能，p53的亚型还可与全长的p53相互作用并调节其活性。亚型比例的差异可能会影响发育，细胞增殖，应激反应，以及癌症和衰老。因此，不同亚型的p53可能对肿瘤的形成有独特的活性。 1.3 N-末端截断的p53基因亚型能够加速衰老，过表达可以降低癌症（23,24）。

6、另外，N-末端截断的p53亚型的过度表达降低了组织的功能和再生，这表明干细胞和祖细胞有缺陷（26）。为了支持这一观点，在老年小鼠中，一个p53基因副本的缺失增加了增殖造血干细胞和祖细胞的数量，而N-末端截断的p53基因表达活性增加的小鼠并没有显示出这种增加（27）。为了在表达截断的p53基因的小鼠中实现早衰表型，还需要全长的野生型p53，这表明截断亚型与全长p53基因四聚体相关。N-末端截断的p53亚型中的一个被发现与全长p53基因相互作用，即使没有应激的情况下也能增加稳定性和核定位（28），在Mdm2的存在下另一种亚型稳固p53（29）。因此，一个特定的p53亚型的过表达可能影响其它亚型和整

7、体p53的功能。 1.4有一半的人类癌症中发现了p53的基因突变，还有一些则发现了p53通路的其它部分被改变。这些突变使肿瘤细胞能够逃避细胞周期检查，避免细胞凋亡，衰老，并且能够在低于正常细胞扩散的条件下扩散。大多数肿瘤相关的p53基因突变是在DNA结合结构域内。不同程度的影响了p53结合靶基因的能力，因此可能会改变整个蛋白构象。 1.5很难识别影响衰老的相似基因突变，因为他们不会以相同的方式被选择。然而，最近在人群中发现的多态性表明，p53蛋白的微小变化也可以影响长寿和衰老。密码子72中的脯氨酸简单替换为精氨酸阻碍了p53基因诱导细胞凋亡的能力，并导致增加癌症的风险。但是，这种多态性集中在老

8、年人口并与长寿相关。我们预测，会发现更多这样的影响衰老过程而与癌症无关的基因突变和多态性。2、p53活性与癌症的调节机制2.1 p53基因受到多种机制的严格调控，调控其活性，稳定性和定位。因此，增强的p53调控可以导致癌症。针对p53的相关调控，能有效地激活癌症中的p53基因。MDM2（鼠双微体2）和MDM4（a.k.a.MDMX）调节p53，它们的过表达能有效的抑制p53的功能，提高了患癌症的风险。MDM2蛋白是一种导致p53降解的泛素连接酶。当MDM2蛋白处于高水平，P53能够多聚泛素化并通过蛋白酶体靶向降解。MDM2也能够直接抑制p53活性。当p53基因被激活时，MDM2的水平升高，然后

9、降低P53，这就建立了一个负反馈通路。MDM4不是p53的泛素连接酶，但通过与MDM2 形成杂络物增强p53的泛素化。MDM2和MDM4的异二聚体在胚胎发育过程中（但不是在成年小鼠）调节p53是很重要的（30）。细胞凋亡和细胞周期阻滞引起的MDM2和MDM4突变能够导致胚胎死亡。此外，似乎MDM2调节p53的稳定性，而MDM4调节p53的活性（31）。在P53调节中MDM2和MDM4还有组织特异性（32）。因此，MDM2和MDM4相互且独立地调节p53。2.2至少有一半的肿瘤是由p53突变引起的，而许多与野生型p53有关的肿瘤因为MDM2的过表达明显使p53功能性失调。因此，与MDM2/p53

10、结合的小分子可以有效地恢复p53活性而不会造成基因毒性应激。这一方法对于那些含有野生型p53的小儿癌症特别有效（33）。MDM2和MDM4有一个互补模式，所以MDM4也是一个增强p53功能的潜在靶目标（34）。重要的是，在缺失MDM4的情况下,p53功能的恢复提高了肿瘤小鼠的寿命（35）,并且p53的暂时性恢复不是致命的。到目前为止，还没发现能够扰乱MDM4和P53相互作用的化合物。因此，全身性的MDM4抑制是恢复肿瘤中p53功能的一种方法，并有可能比MDM2的抑制的毒性更小。2.3除了小分子Nutlin，有几种化合物似乎能够通过改变其构象来激活p53（36）。在包含一些p53突变的肿瘤细胞中

11、，小分子CP-31398通过阻断泛素化能恢复p53的活性，而不干扰MDM2蛋白的相互作用。CP-31398也有可能激活p53家族成员p73和p63，促进抗肿瘤作用。最近，化学药品PRIMA-1（p53激活并诱导大量细胞凋亡）已证明在表达突变型p53的肿瘤细胞中介导p53依赖的细胞凋亡是很有前景的（37）。PRIMA-1的衍生物APR-246能够激活未折叠的野生型p53及突变型p53基因;表明它可能在有或没有p53基因突变的肿瘤中起作用。在任何情况下，激活p53的肿瘤抑制效应似乎是一种很有前景的治疗策略，未来可能会降低高毒性化疗药物的使用（38）。3、 P53基因的转录后修饰与细胞衰老除了泛素化

12、，p53翻译后修饰还包括磷酸化，乙酰化，类泛素化修饰，SUMO蛋白质修饰和甲基化，所有这些都是调节p53活性所必需的。p53蛋白是一种抑制细胞增殖或者诱导细胞凋亡或衰老的高度调节蛋白，对各种细胞应激做出应答，包括DNA损伤，氧化应激，缺氧，和致癌信号。在没有应激的正常细胞中，p53蛋白的水平和活性都非常低。当细胞受到刺激，p53蛋白的水平增加，p53的转录活性被激活。p53活性有可能阶段性的进行调节，p53的不同活性，无疑是通过不同的修饰进行不同的调节。这些修饰很大地影响着p53的肿瘤抑制活性，并有可能影响到p53对衰老的作用。3.1 p53蛋白具有多个丝氨酸/苏氨酸残基作为许多蛋白激酶的磷酸

13、化位点。这些位点的磷酸化状态随着应激信号而改变。许多重要的调控位点都集中在N-末端的激活结构域，有一些也存在于C端调节结构域。有些位点可以通过多种激酶磷酸化而有些激酶可磷酸化多个位点。其中有两个重要的位点是丝氨酸15（在小鼠p53蛋白中是丝氨酸18）和丝氨酸20（在小鼠中是丝氨酸23）。这些位点通过ATM和其他激酶磷酸化对DNA损伤反应做出应答。当这些丝氨酸都被磷酸化时，与负调控MDM2的相互作用就会被削弱，稳定p53并允许其与辅（共）激活因子相互作用，激活转录。这些位点中丝氨酸和丙氨酸突变的突变小鼠（不能磷酸化）中增加了p53的稳定性和转录。然而，表现型有组织特异性，并且没有组织培养实验预测

14、的那么严重，这表明磷酸化不是控制p53的唯一手段。有趣的是，通过敲入丝氨酸18基因的小鼠产生变异（丝氨酸到丙氨酸），加速衰老，这表明激活p53对DNA损伤做出应答来防止衰老（39）。已经敲入基因，模拟磷酸化的组成和p53的激活的小鼠模型也已经产生，并展现出惊人的衰老表现型（40）。这些小鼠的多种器官中大量的干细胞凋亡，影响正常组织更新。促凋亡p53靶PUMA的枯竭导致小鼠的干细胞得以存活，延缓衰老的加速。这表明，控制细胞凋亡和干细胞的增殖能力，也许才是p53基因影响衰老的真正机制。3.2 乙酰化是调节p53活性的一个重要机制。P53上多种赖氨酸残基能够被乙酰化；同时许多这种赖氨酸也是泛素相关酶

15、MDM2的目标。因此，这些氨酸残基的乙酰化避免了它们的泛素化，稳定了p53活性。而且，乙酰化可以抑制p53和MDM2之间的相互作用。乙酰化负责p53蛋白的修饰，包括p300,CBP,PCAF,TIP60,和hMOF。在组织培养试验中，乙酰化可以对抗泛素，因此能够稳定p53并加强其活性。在DNA结合域的两个乙酰化位点（其中大多数肿瘤相关的基因突变发生）可能更为重要。被TIP60乙酰化的K120在激活基因编码蛋白质中是非常必要的，在细胞凋亡中很重要，但在细胞阻滞中意义不大。因此，这个位点的修饰对于靶基因对于特定信号应答的选择是很重要的。相反，K164的乙酰化对于大多数p53的靶基因的活化是十分必要

16、的。如果K120和K124连同6 C-末端赖氨酸都突变，以至于它们不能被乙酰化，p53引起细胞周期阻滞或者细胞凋亡的能力就不能被激活。脱乙酰基酶也作用于p53以对抗乙酰基酶活性。尤其是SIT1对K382的作用以及对促凋亡基因上p53的负调控作用。白藜芦醇能够激活SIRT1，在衰老过程中控制p53的活性，这是一种有前途的手段。然而，SITR1是促进肿瘤还是抑制肿瘤，这取决于条件，所以必须要小心，以避免SIRT1的增强所产生的不利影响。3.3还有其它可以修饰p53的方法。在精氨酸和赖氨酸中可以通过几种不同的甲基化酶使p53甲基化，是激活还是抑制p53的活性，主要取决于哪个位点被甲基化和添加甲基基团

17、的数目。在赖氨酸残基中通过两个泛素类小分子修饰p53，这个两个小分子是SUMO（小泛素类修饰物）和MEDD8（神经前体细胞表达发育下调蛋白8）。目前为止，这些有关修饰方面的研究比起泛素化的研究还是较少的，即使他们可以通过实验调节p53的活性。仍然要观察这些修饰对衰老的影响有哪些。很明显，p53的活性可以被不同类型的翻译后修饰改变。一个给定的p53蛋白分子的总体活性，取决于任意时间不同数量和不同修饰的组合。一些修饰可能会影响其它的修饰，尤其是那些针对相同的p53的氨基酸残基。可以通过改变数量，时间和蛋白质修饰的特异性影响p53的活性，进一步影响衰老，这是一个非常有前景的途径。4、P53和核糖体的

18、合成核糖体合成是指核糖RNA的合成和组装。核糖体蛋白能够多样性表达和翻译后修饰，所以假设选择性翻译mRNA的特定核糖体存在。而有缺陷的核糖体合成可改变蛋白质的表达，从而引起核糖体病变（ribosomopathies）。癌细胞可上调核糖体合成和核糖体蛋白基因的突变，这意味着上调可能引起癌变。没有DNA损伤的有缺陷的核糖体合成可以稳定p53。因为核糖体蛋白（rp）L11，L5，L23和MDM2的相互作用，从而稳定p53。核糖体应激产生细胞凋亡，这在小鼠中主要取决于其多能造血干细胞的rpL11和p53。此外，癌蛋白c-Myc能够稳定p53，主要通过rpL11介导的HDM2的抑制和ASK1/p38激酶

19、通过丝氨酸15和23的磷酸化激活p53两方面。然而，稳定p53需要rp5,rpL11,and rp23，而不是磷酸化的丝氨酸15。核糖体合成与细胞周期调节相联系，因为p53通过rpL11来监控18S和28S的合成。因此，核糖体应激(有或没有DNA损伤)可产生p53应答。5、p53和mTORC1人们普遍认为，P53基因的过度表达导致G1期停滞的细胞从静止期（仍然保留增殖能力）发展到衰老期。但过了G1期停滞，p53基因就不能诱导细胞衰老，所以它诱导衰老的作用尚不清楚（41）。P53在某些条件下其实还可能抑制细胞衰老（42）。为了证实这种可能性，在细胞的静止期p53基因常过度表达，否则将因为p21基

20、因的过度表达而经历衰老（43）。此外，雷帕霉素复合物1（mTORC1）的促增长机制的靶标可能有助于p21表达的细胞中诱导衰老（42）。为了证实这种可能性，在静止期细胞，mTORC1的过度表达（通过TSC2敲除）引起由nutlin-3a介导的生长停滞之后进入衰老（44）。而mTORC1的抑制剂雷帕霉素能够逆转这种过程。同理，mTORC1的负调控因子TSC1维持幼稚T细胞处于静止状态（45）。因此，在诱导细胞衰老中，p53基因与mTORC1的合作很重要。mTOR是磷脂酰肌醇3-蛋白激酶（PI3K）相关家族中的一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（46-49），是在一种复合物中（mTOR复合物1，mTORC1

21、，）发现的，这种复合物存在于多种生物中，从酵母到哺乳动物。mTORC1调节细胞生长（质量）和增殖（细胞分裂），以适应周围环境。生长因子，如IGF-1，结合酪氨酸激酶受体，如IGF-1R，在细胞膜激活PI3蛋白激酶导致PIP3的磷酸化（磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸），是细胞膜上的第二信使。肿瘤抑制因子PTEN（人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因）通过PIP3的去磷酸化衰减这一通路。PIP3激活AKT，AKT能抑制TSC1/TSC2（结节性硬化症），这反过来又充当mTORC1的一个负调控（50,51）。已激活的mTORC1上调mRNA的翻译，以提高蛋白质合成。mTORC1直接磷酸化

22、S6K1（S6激酶1）来诱导核糖体合成和翻译（47,48）。此外，mTORC1磷酸化4E-BPs（elF4E结合蛋白）终止与elF4E的结合。雷帕霉素与需要mTORC1活性（53）的FKBP12（一种折叠的分子伴侣）结合，来特异性抑制mTORC1（52）。因此，在高营养/能量水平和低应激的情况下，mTORC1能够促进细胞生长应答有丝分裂信号（41）。雷帕霉素对寿命和非癌症相关的衰老的部分效应是通过间接减少p53的应激反应来实现的。6、p53和糖代谢葡萄糖是ATP生成的主要能量来源,糖酵解能够将葡萄糖转化为丙酮酸，产生ATP和NADH。丙酮酸再进入三羧酸（TCA）循环通过氧化磷酸化产生ATP。跟

23、正常细胞相反，癌细胞主要通过有氧糖酵解生成能量（ATP），以增加合成代谢和延续肿瘤的生长，被称为沃伯格Warburg效应（54）。这些癌症表现为有氧糖酵解和氧化磷酸化受损。这表明，生成能量方式的变化能导致肿瘤发生。p53能够抑制从氧化磷酸化到有氧糖酵解产生ATP等代谢的转变（55），这是抑制肿瘤的一个重要方面。p53通过多种机制负调控糖酵解。首先p53减少葡萄糖载体的表达（56）并且阻遏胰岛素受体启动子（57）。通过控制蛋白质稳定性（58），反式激活TP53诱导的糖酵解和调节细胞凋亡（TIGAR）（59），P53能够负调控磷酸变位酶（PGM）；从而减少糖酵解，转移糖酵解中间产物到戊糖磷酸途径（

24、PPG）。P53还可以抑制碳水化合物反应元件结合蛋白（ChREBP），其能够支持有氧糖酵解（60）。此外，p53基因通过细胞色素c氧化酶2(SCO2)转录靶的合成（61,62）和线粒体凋亡诱导因子蛋白（AIF）（分别对于复合物IV和复合物1很重要）（63，,64）上调有氧呼吸，促进氧化磷酸化。因此，p53调节代谢抑制有氧糖酵解和增强氧化磷酸化。7、p53和热量限制限制食物摄入量或热量限制（CR）是一种很有特点的干预措施，以延长各种生物的寿命和改善生理衰老。CR能够引起跟寿命延长相关的许多变化（65,66）。一、有人提出p53能够连接mTORC1和SIRT1来影响细胞的存活以适应CR（67）。二

25、、白藜芦醇（3,5,4'-三羟基）能够激活沉默调节蛋白和SIRT1（68），并且延长高热量饮食小鼠的寿命（69），这表明白藜芦醇可以模拟一些CR的有利影响而无需实际限制卡路里（人为干预的一个好处）。三、AMPK/p53抑制mTORC1可能是CR延长寿命的作用的部分原因。为了适应CR，p53基因相关蛋白（p63和p73）代替p53这种可能性依然存在。另外，在CR中的重要靶点也许就位于p53基因的下游。8、结论p53影响细胞代谢和DNA的完整性，导致细胞周期阻滞，细胞衰老和细胞死亡等。虽然在肿瘤抑制中对p53的研究比较多，但最近数据表明，p53基因也影响衰老。有多种针对p53基因的疗法作为

26、抗癌治疗。而针对p53基因抑制衰老表型，很难考虑到细胞阻滞，衰老和凋亡之间的微妙平衡。当细胞应激时,p53基因诱导细胞G1期阻滞以保护细胞，但不直接诱导细胞衰老。相反促生长的途径却使阻滞细胞进入衰老状态。最新数据表明，p53能够使细胞在丝氨酸耗尽的情况下存活，具有保护作用（70）。这些结果意味着特殊和狭窄的干预措施调节p53的活性可能对癌症有效，但对于衰老无效。相反，广泛的干预措施，减缓生长（雷帕霉素，华润，白藜芦醇），或模拟延缓生长（二甲双胍，AICAR），可能会成为改变P53在改善或减缓衰老中的功能的最佳方法。参考文献：1. Levine A J. p53, the cellular ga

27、tekeeper for growth and divisionJ. cell, 1997, 88(3): 323-331.2. Shangary S, Wang S. Targeting the MDM2-p53 interaction for cancer therapyJ. Clinical Cancer Research, 2008, 14(17): 5318-5324.3. Muller P A J, Vousden K H, Norman J C. p53 and its mutants in tumor cell migration and invasionJ. The Jour

28、nal of cell biology, 2011, 192(2): 209-218.4. Feng Z, Hu W, De Stanchina E, et al. The regulation of AMPK 1, TSC2, and PTEN expression by p53: stress, cell and tissue specificity, and the role of these gene products in modulating the IGF-1-AKT-mTOR pathwaysJ. Cancer research, 2007, 67(7): 3043-3053.

29、5. Budanov A V, Karin M. p53 target genes sestrin1 and sestrin2 connect genotoxic stress and mTOR signalingJ. Cell, 2008, 134(3): 451-460.6. Suzuki H I, Miyazono K. p53 actions on microRNA expression and maturation pathwayM/p53 Protocols. Humana Press, 2013: 165-181.7. Sengupta S, Harris C C. p53: t

30、raffic cop at the crossroads of DNA repair and recombinationJ. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 2005, 6(1): 44-55.8. Moll U M, Wolff S, Speidel D, et al. Transcription-independent pro-apoptotic functions of p53J. Current opinion in cell biology, 2005, 17(6): 631-636.9. Fontoura B M, Atienza C

31、A, Sorokina E A, et al. Cytoplasmic p53 polypeptide is associated with ribosomesJ. Molecular and cellular biology, 1997, 17(6): 3146-3154.10. Fontoura B M, Sorokina E A, David E, et al. p53 is covalently linked to 5.8 S rRNAJ. Molecular and cellular biology, 1992, 12(11): 5145-5151.11. Brown C J, Ch

32、eok C F, Verma C S, et al. Reactivation of p53: from peptides to small moleculesJ. Trends in pharmacological sciences, 2011, 32(1): 53-62.12. Tavernarakis N, Pasparaki A, Tasdemir E, et al. The effects of p53 on whole organism longevity are mediated by autophagyJ. Autophagy, 2008, 4(7): 870-873.13.

33、Dumont P, Leu J I J, Della Pietra A C, et al. The codon 72 polymorphic variants of p53 have markedly different apoptotic potentialJ. Nature genetics, 2003, 33(3): 357-365.14. Bojesen S E, Nordestgaard B G. The common germline Arg72Pro polymorphism of p53 and increased longevity in humansJ. CELL CYCL

34、E-LANDES BIOSCIENCE-, 2008, 7(2): 158.15. van Heemst D, Mooijaart S P, Beekman M, et al. Variation in the human< i> TP53</i> gene affects old age survival and cancer mortalityJ. Experimental gerontology, 2005, 40(1): 11-15.16. GarcíaCao I, GarcíaCao M, MartínCaballero J, e

35、t al. Super p53 mice exhibit enhanced DNA damage response, are tumor resistant and age normallyJ. The EMBO journal, 2002, 21(22): 6225-6235.17. Matheu A, Maraver A, Klatt P, et al. Delayed ageing through damage protection by the Arf/p53 pathwayJ. Nature, 2007, 448(7151): 375-379.18. Mendrysa S M, O&

36、#39;Leary K A, McElwee M K, et al. Tumor suppression and normal aging in mice with constitutively high p53 activityJ. Genes & development, 2006, 20(1): 16-21.19. Bourdon J C, Fernandes K, Murray-Zmijewski F, et al. p53 isoforms can regulate p53 transcriptional activityJ. Genes & development,

37、 2005, 19(18): 2122-2137.20. Scrable H, Sasaki T, Maier B. 年p53 or p44: priming the p53 pumpJ. The international journal of biochemistry & cell biology, 2005, 37(5): 913-919.21. Murray-Zmijewski F, Lane D P, Bourdon J C. p53/p63/p73 isoforms: an orchestra of isoforms to harmonise cell differenti

38、ation and response to stressJ. Cell Death & Differentiation, 2006, 13(6): 962-972.22. Khoury M P, Bourdon J C. p53 Isoforms An Intracellular Microprocessor?J. Genes & cancer, 2011, 2(4): 453-465.23. Tyner S D, Venkatachalam S, Choi J, et al. p53 mutant mice that display early ageing-associat

39、ed phenotypesJ. Nature, 2002, 415(6867): 45-53.24. Maier B, Gluba W, Bernier B, et al. Modulation of mammalian life span by the short isoform of p53J. Genes & development, 2004, 18(3): 306-319.25. Hasty P, Campisi J, Hoeijmakers J, et al. Aging and genome maintenance: lessons from the mouse?J. S

40、cience, 2003, 299(5611): 1355-1359.26. DUMBLE M, GATZA C, TYNER S, et al. Insights into aging obtained from p53 mutant mouse modelsJ. Annals of the New York Academy of Sciences, 2004, 1019(1): 171-177.27. Dumble M, Moore L, Chambers S M, et al. The impact of altered p53 dosage on hematopoietic stem

41、cell dynamics during agingJ. Blood, 2007, 109(4): 1736-1742.28. Moore L, Lu X, Ghebranious N, et al. Aging-associated truncated form of p53 interacts with wild-type p53 and alters p53 stability, localization, and activityJ. Mechanisms of ageing and development, 2007, 128(11): 717-730.29. Yin Y, Step

42、hen C W, Luciani M G, et al. p53 Stability and activity is regulated by Mdm2-mediated induction of alternative p53 translation productsJ. Nature cell biology, 2002, 4(6): 462-467.30. Pant V, Xiong S, Iwakuma T, et al. Heterodimerization of Mdm2 and Mdm4 is critical for regulating p53 activity during

43、 embryogenesis but dispensable for p53 and Mdm2 stabilityJ. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2011, 108(29): 11995-12000.31. Toledo F, Krummel K A, Lee C J, et al. A mouse p53 mutant lacking the proline-rich domain rescues Mdm4 deficiency and provides insight into the Mdm2-Mdm4-p53 re

44、gulatory networkJ. Cancer cell, 2006, 9(4): 273-285.32. Grier J D, Xiong S, Elizondo-Fraire A C, et al. Tissue-specific differences of p53 inhibition by Mdm2 and Mdm4J. Molecular and cellular biology, 2006, 26(1): 192-198.33. Tisato V, Norcio A, Voltan R, et al. MDM2 non-genotoxic inhibitors as inno

45、vative therapeutic approaches for the treatment of pediatric malignanciesJ. Current medicinal chemistry, 2013, 20(17): 2226-2236.34. Zak K, Pecak A, Rys B, et al. Mdm2 and MdmX inhibitors for the treatment of cancer: a patent review (2011-present)J. Expert opinion on therapeutic patents, 2013, 23(4)

46、: 425-448.35. Garcia D, Warr M R, Martins C P, et al. Validation of MdmX as a therapeutic target for reactivating p53 in tumorsJ. Genes & development, 2011, 25(16): 1746-1757.36. Wang W, El-Deiry W S. Restoration of p53 to limit tumor growthJ. Current opinion in oncology, 2008, 20(1): 90-96.37.

47、Bao W, Chen M, Zhao X, et al. PRIMA-1Met/APR-246 induces wild-type p53-dependent suppression of malignant melanoma tumor growth in 3D culture and in vivoJ. Cell Cycle, 2011, 10(2): 301-307.38. Wiman K G. Restoration of WildType p53 Function in Human Tumors: Strategies for Efficient Cancer TherapyJ.

48、Advances in cancer research, 2007, 97: 321-338.39. Armata H L, Garlick D S, Sluss H K. The Ataxia TelangiectasiaMutated Target Site Ser18 Is Required for p53-Mediated Tumor SuppressionJ. Cancer research, 2007, 67(24): 11696-11703.40. Liu D, Ou L, Clemenson Jr G D, et al. Puma is required for p53-ind

49、uced depletion of adult stem cellsJ. Nature cell biology, 2010, 12(10): 993-998.41. Hasty P, Sharp Z D, Curiel T J, et al. mTORC1 and p53J. Cell Cycle, 2013, 12(1): 20-25.42. Blagosklonny M V. Tumor suppression by p53 without apoptosis and senescence: conundrum or rapalog-like gerosuppression?J. Agi

50、ng (Albany NY), 2012, 4(7): 450.43. Demidenko Z N, Korotchkina L G, Gudkov A V, et al. Paradoxical suppression of cellular senescence by p53J. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2010, 107(21): 9660-9664.44. Korotchkina L G, Leontieva O V, Bukreeva E I, et al. The choice between p53-ind

51、uced senescence and quiescence is determined in part by the mTOR pathwayJ. Aging (Albany NY), 2010, 2(6): 344.45. Yang K, Neale G, Green D R, et al. The tumor suppressor Tsc1 enforces quiescence of naive T cells to promote immune homeostasis and functionJ. Nature immunology, 2011, 12(9): 888-897.46.

52、 Laplante M, Sabatini D M. mTOR signaling in growth control and diseaseJ. Cell, 2012, 149(2): 274-293.47. Ma X M, Blenis J. Molecular mechanisms of mTOR-mediated translational controlJ. Nature reviews Molecular cell biology, 2009, 10(5): 307-318.48. Tsang C K, Qi H, Liu L F, et al. Targeting mammali

53、an target of rapamycin (mTOR) for health and diseasesJ. Drug discovery today, 2007, 12(3): 112-124.49. Reiling J H, Sabatini D M. Stress and mTORture signalingJ. Oncogene, 2006, 25(48): 6373-6383.50. Zhang Y, Gao X, Saucedo L J, et al. Rheb is a direct target of the tuberous sclerosis tumour suppres

54、sor proteinsJ. Nature cell biology, 2003, 5(6): 578-581.51. Sato T, Nakashima A, Guo L, et al. Specific activation of mTORC1 by Rheb G-protein in vitro involves enhanced recruitment of its substrate proteinJ. Journal of biological chemistry, 2009, 284(19): 12783-12791.52. Brown E J, Albers M W, Shin

55、 T B, et al. A mammalian protein targeted by G1-arresting rapamycin-receptor complexJ. Nature, 1994, 369(6483): 756-758.53. Koser P L, Eng W K, Bossard M J, et al. The tyrosine< sup> 89</sup> residue of yeast FKBP12 is required for rapamycin bindingJ. Gene, 1993, 129(2): 159-165.54. Vand

56、er Heiden M G, Cantley L C, Thompson C B. Understanding the Warburg effect: the metabolic requirements of cell proliferationJ. science, 2009, 324(5930): 1029-1033.55. Maddocks O D K, Vousden K H. Metabolic regulation by p53J. Journal of molecular medicine, 2011, 89(3): 237-245.56. Schwartzenberg-Bar

57、-Yoseph F, Armoni M, Karnieli E. The tumor suppressor p53 down-regulates glucose transporters GLUT1 and GLUT4 gene expressionJ. Cancer Research, 2004, 64(7): 2627-2633.57. Webster N J G, Resnik J L, Reichart D B, et al. Repression of the insulin receptor promoter by the tumor suppressor gene product p53: a possible mechanism for receptor overexpression in breast cancerJ. Cancer research, 1996, 56(12): 2781-2788.58. Kondoh H, Lleonart M E, Gil J, et al. Glycolytic enzymes can modulate cellular life spanJ. Cancer