结晶罐清洗验证方案

1、2004年新车间两性霉素B结晶罐清洗验证方案2006年一车间超滤浓缩液贮罐硫酸双氢链霉素清洗验证方案文件编号：浓缩液贮罐清洗AmB-PV-F1 目的通过清洗验证，验证超滤浓缩液贮罐清洗操作的适用性及有效性，确认按照清洗操作规程操作，设备上硫酸双氢链霉素的残留达到了规定的清洁限度要求，不会对下批或更换品种后的生产造成交叉污染。2 系统简介取样阀氮气阀排气阀物料阀上清液抽取阀物料精滤器DMF三乙胺丙酮注射用水纯蒸汽去三合一设备结晶罐是将两性霉素B脱色液进行结晶的主要设备。以脱色前所加的工业乙醇量为基础，计算出脱色液中乙醇含量达到80%所需补加的水的体积。检查并确认其他岗位不使用注射用水，以注射用水

2、贮罐液位计量，将注射用水冷却后加入结晶罐，搅拌均匀。调节结晶罐冷盐水阀，使罐内料液温度处于2530。检查并确认结晶罐搅拌转速在所需位置。在搅拌状态下，经过精滤器缓慢加入已配好的三乙胺80%乙醇溶液并不断检测pH，调pH至5.05.2，停止搅拌，静置1018小时。抽掉上清液，打开搅拌，将结晶液压入过滤洗涤干燥机中。结晶罐为河北天工化工机械制造有限公司生产的不锈钢制立式容器。内壁、搅拌及内接管采用SUS316L不锈钢制作，夹套采用SUS304不锈钢制作。电机、减速机、机架、联轴器为长城减速机厂产品，保证了传动系统的稳定性。机械密封采用约翰克兰（天津）有限公司生产的带碎片井结构的密封，避免了机械密封

3、碎片对产品的污染。结晶罐为容积3m3，公称直径1500mm的内外抛光设备。焊接采用电弧焊，设备内表面内电解抛光，内表面Ra0.3，外表面Ra0.6。结晶罐内有变频锚式搅拌，排气口安装有过滤精度为0.2µm的呼吸器，进罐溶媒通过0.2µm的过滤器。管路全部由不锈钢管道连接，设计和安装时避免了死角、盲管。采用两个喷淋球对设备的清洁，以达到彻底清洗的目的。两性霉素B在生产过程中容易附着在结晶罐的内壁、搅拌桨等部位上。在批号结束时，需要将这些残留在设备上的两性霉素B清洗干净才能进行下一批的生产。两性霉素B不易溶于水，所以采用人工擦拭与三乙胺的乙醇溶液浸泡的方法，用注射用水进行最后的

4、冲洗。结晶罐每批清洗一次。3 范围本验证是对两性霉素B结晶罐的清洗方法的验证。4 可接受的标准4.1.1注射用水序号检测项目名称标 准1性状无色澄明液体、无臭、无味2电导率1.1µs/cm3TOC500ppb4细菌内毒素0.25EU/ml5微生物限度10CFU/100ml4.1.2清洗水样序 号检测项目名称标 准1两性霉素B允许残留浓度10ppm2DMF允许残留浓度10ppm3乙醇允许残留浓度10ppm4三乙胺允许残留浓度10ppm4.1.3表面擦拭样0.1%其中：3000g为试生产以来的最小投料量。5 验证小组姓 名部 门职 责王冬燕三车间负责起草验证方案，编写验证报告。郑明质量保

5、证部负责验证工作的组织及协调边晓丽三车间负责清洗验证方案的实施。赵延芹质量保证部负责两性霉素B回收率验证王艳稳质量保证部负责两性霉素B及其它残留物质的检验杨海青二车间负责仪表仪器的校验。6 验证方案6.1 仪器仪表检测a） HPLC仪b） 气相色谱仪6.2 清洗方法打开结晶罐注射用水阀及两个清洗球阀，冲洗过滤器及结晶罐510分钟。期间开搅拌、罐底排水阀。清洗结束后，排净结晶罐中的水后关闭排水阀。打开结晶罐人孔盖，操作人员进入结晶罐内，用纯化水润湿洁净抹布，擦拭罐壁、搅拌桨及搅拌轴等部位，直至目测无可见污物。操作人从罐中出来后关闭人孔盖。打开结晶罐注射用水阀及两个清洗球阀，冲洗结晶罐510分钟。

6、期间开搅拌、罐底排水阀。清洗结束后，排干净结晶罐中的水后关闭排水阀。确认已配好2mol/L三乙胺80%乙醇溶液（体积比为16：34）4060L并加好压。打开结晶罐三乙胺乙醇阀及两个清洗球阀，冲洗结晶罐至三乙胺乙醇溶液压完，期间开搅拌。溶液压完后搅拌1015分钟。清洗结束后，检查并确认过滤洗涤干燥机可以加三乙胺乙醇溶液，关闭结晶罐排气阀，打开氮气阀将罐内溶液压到过滤洗涤干燥机中。打开结晶罐注射用水阀及两个清洗球阀，冲洗过滤器及结晶罐1520分钟。期间开搅拌、罐底排水阀。清洗结束后，排净结晶罐中的水后关闭排水阀。检查并确认过滤洗涤干燥机可以加水，向结晶罐中加注射用水至没过搅拌桨中部。用氮气将罐内水

7、压到过滤洗涤干燥机中，冲洗管道。6.3 取样方法6.3.1清洗水样在注射用水清洗过程中，取第5，10分钟的清洗水样各20ml；在清洗结束后，打开注射用水阀23分钟，由罐底排水处取最终淋洗水样20ml于洁净取样瓶中，标明名称、编号及取样日期。6.3.2 表面擦拭样6.3.2.1清洗结束后，用DMSO润湿棉签，并将其靠在溶剂瓶上挤压除去多余的DMSO，擦拭设备的指定部位A、B、C点（见设备简图）。6.3.2.2将棉签头按在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面。擦拭过程应覆盖整个表面，翻转棉签，将棉签的另一面也在取样表面上擦拭，但与前次擦拭方向垂直（见下图）。擦拭区域约为10cm&#

8、215;10cm，每擦拭一个区域，换一根棉签。6.3.2.4擦拭完毕后将棉签放入盛有5mlDMSO的试管中，加塞，标识次序。放置10min钟使两性霉素B溶出，挤干棉签，用5mlDMSO润洗三次，测定DMSO溶液中两性霉素B的含量。6.3.2.5 制备对照样品：按照6.3.2.2相关内容，湿润棉签，将棉签直接放入试管并加塞。6.3.2.6 在试管上标明名称、位置、编号及取样日期。6.3.3 取样方法验证6.3.3.1 准备一块500×500mm的不锈钢板，平整即可。6.3.3.2 用钢锥划出400×400mm的区域，每搁100mm划线，形成16个100×100mm的

9、方块。6.3.3.3 精密称取0.0080g两性霉素B，DMSO溶解后用乙醇定容至50ml。6.3.3.4 用微量移液器准确移取0.625ml上述溶液，分五次移至100×100mm的方块中，使其均匀分布。6.3.3.5 根据实际转移的溶液体积计算单位面积的两性霉素B的含量（约1µg/cm2）。6.3.3.6 自然干燥或用电吹风温和地吹干表面。6.3.3.7 按照6.3.2.2擦拭表面，每擦一个方块（100cm2）换一根擦拭棒，共擦6个方块。6.3.3.8擦拭完成后，将棉签放入盛有5mlDMSO的试管中，加塞。放置10min钟使两性霉素B溶出，挤干棉签，用5mlDMSO润洗三

10、次，测定DMSO溶液中两性霉素B的含量。6.3.3.9 计算回收率和回收率的RSD。6.3.3.10 可接受的标准取样回收率大于70%，体现重现性多次取样回收率的RSD小于20%。6.4 检查方法6.4.1 污物目测人工擦拭后，检查结晶罐罐壁、罐底、搅拌桨及搅拌轴处，无明显的目测污物。6.4.2 HPLC法表面擦拭样用HPLC法测定。6.4.2气相色谱法最终淋洗水样用气相色谱法测定。6.5 检查频率全面检查设备的清洗效果3次，连续检查3批。7 验证记录8 数据分析对检验数据进行统计分析，记录偏差及处理情况。9 偏差分析对验证实施中出现的偏差及处理情况进行评价，确认偏差级别。10 验证小结11

11、附录回收率验证记录年 AmB-QX-01电子天平仪器型号: 仪器编号: 校验有效期:1.0.016%两性霉素B溶液的配制:两性霉素B批号两性霉素B用量g称 量 人DMSO批号乙 醇 批 号配置体积ml配 置 日 期 月 日2.回收率验证:微量移液器规格仪器编号擦 拭 时 间 月 日 :擦 拭 人取 样 点123456取样时间 月 日 : 月 日 : 月 日 :取 样 人两性霉素B含量(g/ml)回收率1.2.3.4.5.6.回收率的RSD结晶罐清洗检查记录年 AmB-QX-02上次生产产品批号 第 次验证清洗步骤注射用水冲洗人工擦拭注射用水冲洗三乙胺的乙醇溶液注射用水冲洗开始清洗时间:结束清洗时间:清洗人污物目测检查罐 壁罐 底搅拌桨搅拌轴检 查 人上次生产产品批号 第 次验证清洗步骤注射用水冲洗人工擦拭注射用水冲洗三乙胺的乙醇溶液注射用水冲洗开始清洗时间:结束清洗时间:清洗人污物目测检查罐 壁罐 底搅拌桨搅拌轴检 查 人上次生产产品批号 第 次验证清洗步骤注射用水冲洗人工擦拭注射用水冲洗三乙胺的乙醇溶液注射用水冲洗开始清洗时间:结束清洗时间:清洗人污物目测检查罐 壁罐 底搅拌桨搅拌轴检 查 人结晶罐清洗验证检验记录