Morris水迷宫检测大鼠记忆力方法的探讨

1、Morris水迷宫检测大鼠记忆力方法的探讨作者：罗小泉，骆利平，陈海芳，涂明珠，黎艳刚，袁金斌，杨武亮【摘要】 目的探求一种合理的检测大鼠记忆力的方法。方法连续4天对痴呆模型组大鼠和假手术组大鼠进行Morris水迷宫定位航行实验，每天训练4次，每次随机选择一个象限入水。实验数据采用SPSS10.0软件分析，然后对每天不同入水象限、每天4次不同次序之间成绩进行比较分析。结果通过对不同入水象限的比较，发现在平台象限入水，其逃避潜伏期较其他象限短，由远离平台的象限入水，其逃避潜伏期较其他象限长;从不同入水次序进行比较，发现逃避潜伏期会随着当天的训练次数的增加而缩短。结论第一次从远离目标的象限入水其成

2、绩能更好地反映出大鼠记忆力。 【关键词】 Morris水迷宫;象限;次序;方法;记忆力Abstract：Objective To find out a method for testing memory capacity in rats.MethodsWater maze navigation experiment was carrid out in model group and sham-operated group for four days, four times a day,each time a quadrant was chased to put into water at ra

3、ndom.The result was analyzed by SPSS10.0 .ResultsEscape latency was the shortest in platform quadrant because it was far away from the platform. According to the different order of dropping into the water, escape lateacy was declined,opposite to the training times.ConclusionQuadrant far away from th

4、e platform can reflect the memory capacity of rats .Key words：Water maze;Quadrant;Order;Method;Faculty of memoryMorris水迷宫(MWM)是英国心理学家Morris于20世纪80年代初设计的用于研究大鼠空间学习记忆的装置1。该方法主要应用于学习记忆、老年痴呆、缺血性痴呆、智力与衰老、行为生物学等方面的研究。通过该实验所得到的丰富的实验参数进行分析，从而对影响学习记忆效果的相关药物效果及疾病相关模型的判断进行评价。现在检测大鼠记忆力的Morris水迷宫的指标有很多，其中最常用的评价指

5、标是定位航行实验的“逃避潜伏期”2。然而在统计分析时，Morris水迷宫的实验数据较为复杂，其统计分析难度也较大，尤其是对大鼠在定位航行中所测得的逃避潜伏期如何进行统计学分析存在的问题一直较多。为此，我们对不同入水象限，不同入水次序对成绩的影响分别进行了考察并对Morris水迷宫实验数据的统计方法进行探讨，以求寻找到一种合理可行的检测方法。1材料雄性SD大鼠20只，体质量(19020)g，SPF级(湖南斯莱克实验动物有限公司,许可证号:SCXK(湘)202009-0004); 水合氯醛,上海青析化工有限公司提供;Morris水迷宫为直径160 cm，高50 cm的圆形水池，水池内壁被漆为黑色，

6、池内水深25 cm，水温保持在(222) ，房间内光照恒定，无光线直射在水池内。池壁上以4个等距离点将水池分为4个象限，在目标象限(设为第3象限)内距离池壁35 cm处放有直径为12 cm，高23 cm的圆形黑色站台，站台位于水面下2 cm。池壁内侧贴有不同形状的标记物。迷宫上方安置连接显示系统的摄像机，同步记录大鼠运动轨迹。采用北京天鸣宏远科技发展有限公司研制开发的Morris水迷宫视频分析系统进行信息处理。2方法2.1动物模型的制备 将大鼠用水合氯醛(350 mg/kg ,腹腔注射) 麻醉后,仰卧固定在手术板上,常规消毒,颈正中切口,分离双侧颈总动脉,将痴呆模型组的大鼠两侧颈动脉结扎，缝合

7、伤口,放回笼中保温(26) 饲养并连续3 d肌注20万u青霉素钠。假手术组的麻醉及手术过程与痴呆模型组相同,但不结扎颈总动脉。2.2Morris水迷宫实验 手术造模20天后开始进行水迷宫训练，实验前将大鼠置于站台上适应10 s，随后将大鼠随机从不同象限面壁置入池内，大鼠登上站台5 s后终止记录，最长记录时间为120 s，若大鼠在120 s内不能上台，引导其登上站台适应10 s，最后将大鼠擦干放入鼠笼。如此将大鼠置入游泳池，每天4次，每次间隔1h，定位航行训练需要4 d。测量平台逃避潜伏期，以评判大鼠的空间记忆能力。2.3 统计分析方法2.3.1入水象限的比较 将每天的实验数据按不同入水象限进行

8、统计，实验结果用20只大鼠总体的平均逃避潜伏期()表示，比较不同入水象限的结果。2.3.2入水次序的比较 将每天的实验数据按入水的次序进行统计，实验结果用20只大鼠总体的平均逃避潜伏期()表示，比较不同入水次序的结果。2.3.3两种评价方法的比较 方法1：采用每天第一次的水迷宫训练数据作为评价两组大鼠记忆力的指标，统计结果用(s)表示，采用SPSS10.0软件进行t检验分析。方法二：采用每天4次水迷宫训练的数据平均值作为评价两组大鼠记忆力的指标，统计结果用s表示，采用SPSS10.0软件进行t检验分析。3结果3.1不同入水象限的比较结果结果见表1。表1每天不同入水象限的平均逃避潜伏期由表1可以

9、看出每天从第3象限(目标象限)入水的平均逃避潜伏期都要比当天其他象限短，第1象限(远离目标的象限)入水的逃避潜伏期都要比其他象限长，说明大鼠在第3象限入水找到平台的几率更大，而从第1象限入水找到平台的随机性较小。3.2不同入水次序的比较结果结果见表2。由表2可以看出随着当天训练次序的增加，逃避潜伏期有逐渐缩短的趋势。说明随着当天训练次数的增加，大鼠的瞬时记忆会不断加强，而入水次序较末的成绩反应出的只是临时记忆不是短时或是长时记忆，只有每天第1次的成绩反应的才不是瞬时记忆。表2每天不同入水次序平均逃避潜伏期3.3 两种评价方法的比较方法一采用每天第1次的水迷宫训练数据作为评价两组大鼠记忆力的指标

10、，统计结果用s表示，采用SPSS10.0软件进行t检验分析。结果见表3。表3大鼠每天第1次定位航行实验的逃避潜伏期结果方法二：采用每天4次水迷宫训练的数据平均值作为评价两组大鼠记忆力的指标，统计结果用s表示，采用SPSS10.0软件进行t检验分析。结果见表4。表4大鼠每天4次定位航行实验的逃避潜伏期结果由表3可以看出，假手术组与双侧结扎组的逃避潜伏期比较有显著的差异;表4中的两组数据相比较，虽然有假手术组比痴呆模型组记忆好的趋势，但后3天的两组成绩没有显著的差异。4讨论本实验结果表明，不同的入水象限，不同的入水次序对Morris水迷宫的检测大鼠记忆力都有影响。选择合适的实验方法和统计方法对Mo

11、rris水迷宫用于检测大鼠记忆力起着关键的作用。从目标象限入水，其找到平台的随机性大;而从远离目标象限入水， 其找到平台的随机性小。因此，在Morris水迷宫实验过程中尽量避免采用目标象限的入水成绩作为评价大鼠记忆力的指标，建议采用远离目标的象限入水成绩作为评价大鼠记忆力的指标。大鼠随着当天训练次数的增加，其瞬时记忆会不断加强。因此，随着当天训练次数的增加，其成绩所反映出大鼠的短时或长时记忆力就越少，建议采用每天第1次训练的成绩作为评价指标，这样反映出的才是大鼠对前一天的记忆力。从表34可以看出，方法一比方法二更加能够说明两组大鼠记忆力的差异。这主要是因为方法一采用每天第1次训练的结果作为评价

12、指标，不包含大鼠的瞬时记忆能力，仅仅反映的是大鼠的短时记忆或是长时记忆，因此两组数据存在着显著的差异;而方法二采用每天4次的平均成绩作为评价大鼠记忆力的指标，仅仅反映出的是两组大鼠的记忆力有差异，而难以看出有明显的差异，这是因为取4次平均成绩作为评价指标，其很大程度上包含了大鼠的瞬时记忆力，且训练的次数较多，逃避潜伏期的波动增大，方差也会相应的增大。从上述结果看，采用第1次从远离目标的象限入水并以此成绩作为评价指标能较合理的检测出大鼠的记忆力。然而，并非只是每天进行1次训练，或是每天仅仅从远离目标的象限入水训练。Morris水迷宫定位航行实验本就是为了培养大鼠学习能力，在MWM定位航行实验中多

13、次训练大鼠寻找站台可以提高大鼠的空间学习能力3。如果每天只训练1次，会需要更多天数的训练，比较费时;如果每次都从远离目标的象限入水，大鼠可能会凭借位置或其他非记忆信息(如向右转弯)来定位站台。因此，在Morris水迷宫定位航行实验中每天至少训练3次(除目标象限外的其他3个象限分别作为1次入水点)以培养大鼠的学习能力，但建议把远离目标的象限作为第1次入水。致谢：骆利平为江西中医学院2007级中药学专业科研实践班学生。参加本实验的还有江西中医学院2007级中药班的余芬、范永花、林婷婷、江波、蓝师鹏等，在此特表感谢!【参考文献】 1Morris RGM.Spatial localization does not requi