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文档简介
问题 原因 解决策略 扩增曲线下滑 模板浓度高；基线期范围大于 降低模板浓度；减小基线终点 或断裂； Ct值； 值（小于Ct值），重新分析 数据 个别扩增曲线 反应管内留有气泡，升温时气 体系上机前离心，并仔细检查 突然骤降 泡突然破裂，导致曲线骤降 反应管内是否有气泡 扩增效率低 引物设计不当；Taq酶活性低； 降低退火/延伸温度，延长退 模板含有抑制物；··· 火/延伸时间；提高引物浓 度；添加K+；改用三步法扩 增；添加增强剂；换酶；重 新设计引物；··· 特异性差 探针，引物设计不合理，二级 提高退火/延伸温度；适当降 结构过多；探针，引物浓度 低探针，引物浓度；调整 过高；退火/延伸温度偏低； Mg2+的量；重新设计探针， ··· 引物；换酶··· 体系稳定性差 原料储存不当；体系配制时间 探针应避光；体系在冰上配制 过长；模板浓度低；模板不 ；使用合格的试剂盒制备模 纯，降解； 板，避免反复冻融； ··· 谢谢
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