HPLC法测定胃宁冲剂中丹参素的含量

1、    HPLC法测定胃宁冲剂中丹参素的含量        胃宁冲剂系由丹参、党参等12味中药用水煎煮提取浓缩制粒而成。成份复杂 ，而丹参是其主药，主要活性成份为丹参素。本文采用HPLC法对丹参素的含量进行测定，以 期能有效地控制胃宁冲剂的质量。1仪器与设备1.1美国Waters高效液相色谱仪；Waters486紫外检测器；DL-800色谱工作站。1.2丹参素钠对照品(上海医科大学)；甲醇、醋酸均为分析纯。1.3胃宁冲剂样品(江苏苏中制药厂，批号：970527，970528，

2、970529) 。2色谱分析条件色谱柱Waters C18(3.9× 150mm);流动相：甲醇-0.4%醋酸溶液(595);检测波长:281nm;柱温:室温；流速：1.2ml/mi n;按该条件测定样品中的丹参素与其它相关成分能达到基线分离，理论板数为11600,，分离 度为4.1。经多次实验，当理论板数为8000时，丹参素仍能较好分离，规定理论板数应不少 于8000。对照品及样品色谱见1。3方法及结果3.1 对照品丹参素钠的纯度测定：取丹参素钠对照品约6mg,置100ml量瓶中加水至刻度，摇匀 ，依上述条件进样100l,采样时间为1h,以峰面积归一化法计算，丹参素钠的含量为99.

3、61% 。 1对照品色谱样品色谱a-丹参素3.2对照品溶液的制备：取丹参素钠对照品(约相当于丹参素10mg), 精密称定，置10ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。3.3标准曲线的制备：分别精密吸取对照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0和1.2ml置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。依上述条件取10l注入色谱仪，记录色谱 ，以对照品浓度为横坐标，对照品峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=2.45X+1.163,r=0.9994。丹参素浓度在20120g/ml范围内峰面积积分值 与浓度呈良好的线性关系。3.4样品的测定：取样品约0.5g,精密称定

4、 ，置50ml量瓶中，加水适量，超声处理30min,取出，放冷至室温，用水稀释至刻度，摇匀， 滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。按上述条件取供试品溶液10l进行分析， 结果见表1。 表1胃宁冲剂中丹参素的含量(n=3 )批号含量(%)RSD (%)9705270.2320.839705280.2180.689705290.2811.243.5稳定性试验：取样品依本法进行处理后，每间隔1h测定一次含量， 结果表明样品中丹参素含量在24h内几乎没有变化。3.6重现性试验： 取同一批号样品5份，分别依本法处理进行测定，结果见表2。 表2重现性试验结果编号含量(%)平均含量(%)RSD( %)

5、10.23120.22330.2260.2251.5940.22250.2243.7回收率试验：精密称取已知含量的样品适量，精密加入一定量的丹 参素对照品，依本法进行含量测定并计算回收率，结果见表3。 表3回收率试验结果(n=6)样品中丹参素含量(mg) 加入丹参素量(mg)测得丹参素量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)0.6261.116100.900.6341.09498.200.5871.05799.060.6520.4801.144101.06100.541.560.6451.149102.130.5981.098101.864讨论4.1丹参为处方中主药成份，其水溶性有

6、效成份有丹参素，原儿茶醛，原儿茶酸等，据文献报道1丹参素含量较高，故选 择测定丹参素含量，作为胃宁冲剂的含量指标。丹参素的测定方法有纸层析紫外分 光光度法2、薄层扫描法3和高效液相色谱法4，5等，大多 测定的是药材、单方制剂或两味的复方制剂。胃宁冲剂成份复杂，有效成份分离比较困难， 选用本法可同时达到分离测定的目的。4.2由于丹参素钠对照品的水 溶液不够稳定，为此，在测定过程中丹参素钠对照品溶液应临用现配为好。 作者单位：陈志清姜堰 225500 江苏苏中制药厂钟克俭姜堰 225500 江 苏姜堰人民医院参考文献1倪坤仪，张国清.反相高效液相色谱测定丹参注射液的三 种有效成份.药学学报，1988，23(4)293.2何怀冰，秦芝玲，张德成，等.纸层析紫外分光 光度法测定丹参注射液中丹参素的含量.药物分析杂志，1984，4(4)212.3倪坤仪，张雨梅，于如霞，等.薄层扫描测定丹参注射剂 中水溶性成份.南京药学院学报，1986，17265.4王杰民，何怀冰，竺叶青，等.RP-HPLC法测定丹参