不同产地连翘中挥发油及其_蒎烯含量的比较研究

1、不同产地连翘中挥发油及其 -蒎烯含量的比较研究裴晓丽 , 张淑蓉 *, 王秀文 , 胡立志(山西中医学院 , 太原 030024摘要 目的 :建立连翘挥发油中 -蒎烯的毛细管气相色谱含量测定方法 , 并比较不 同产地连翘 中挥发油 及 -蒎烯的 含量。 方法 :用水蒸气蒸馏法提取连翘中的挥发油 , 毛细管气相色谱法测定 挥发油中 -蒎烯的含 量。色谱条件 :采用 H P -5(15m 0. 53mm 1. 5 m 弹性石英毛细管色谱柱 ; 载气 N2; 程 序升温 , 初始 温度 40 , 以 1 m i n -1速率升温 至 50 , 保持 1 m i n , 以 5 m i n -1升 温

2、至 70 , 保持 1m in , 最 后以 20 m in -1升温 至 205 , 保持 3m i n ; 进样 口温 度 250 ; 检 测器 (F ID 温度 280 。 结果 :在本文色谱条件下 , -蒎烯与其他组分能得到良好分离 ; -蒎烯线性范围为 0 121 8m g mL -1 (r =0 9995; 精密度、 稳定性和重复性试验的 RSD (n =6 分别为 1 3%, 1 5%, 1 2%; 平均回收率 (n =9 为 101 1%。 结论 :本方法简便、 准确 , 可用于连翘中挥发油 的提取和 -蒎烯的 含量测定。不同产地连 翘中挥发油 及 -蒎烯 的含量 , 青翘大多

3、 高于老翘 , 山西绛县的青翘又高于其他产地样品。关键词 :连翘 ; 挥发油 ; -蒎烯 ; 毛细管气相色谱法中图分类号 :R 917文献标识码 :A 文章编号 :0254-1793(2010 01-0127-03Co mparati ve st udy on t he contents of volatile oil and -pi nene of Fruct us Fors yt hiae i n differe nt ori gi nsPE I X iao-l, i Z HANG Shu-rong *, WANG X iu-w en , HU L i-zh i(Shanx iC oll

4、ege of Trad i ti ona lCh i n eseM ed ici ne , T ai yuan 030024, Ch i naAbst ract Objec tive :To estab lish a cap illary gas chro m atography(CGC m ethod for the deter m i n ation o f -p-i nene of volatile o il in Fructus Forsythiae , and to co mpare the contents o f vo latile oil and -pinene of Fruc

5、tus For -sythiae in d ifferent ori g ins . M et hods :V apour-d istilation w as e mp l o yed i n extracti n g vo latile o il of Fructus Forsy th-i ae . The contents of -pi n ene of volatile o il i n Fruct u s Forsyth i a e w ere deter m i n ed by CGC . The CGC syste m con -sisted of anH P-5cap illar

6、y co l u m n(15m 0 53mm 1 5 m , nitrogen as t h e carrier gas . Te m perature progra m w as the i n itia l te m perature w as 40 , increased te m perature at a rate of 1 m in -1to 50 and retained for 1 m in , aga i n increased at a rate of 5 m in -1to 70 and reta i n ed for 1m in , fi n a ll y at a

7、rate of 20 m i n -1to 205 and retained for 3m in . The inject te mperat u re was 250 , FI D as t h e detector at 280 . R esults : -pi n ene i n Fr uctus Forsyth i a e w as separated fro m other constituents under the chro m atograph ic condition ; The li n ear range of -pinene w as 0 12-1 8m g mL -1

8、(r =0 9995; The RSDs(n =6 of prec ision , stab ilization and reproducibility w ere 1 3%, 1 5%and 1 2%, respecti v ely Average recoveri e s(n =9 of t h e m ethod w ere 101 1%.Concl u sion :This m ethod is si m ple , accurate and su itab le for the ex tracti o n o f vo latile oil and the deter m inati

9、on of -pinene i n Fr uct u s Forsythiae . The contents of vo l a tile oil and -p i n e ne i n Q ingq iao are al m ost h i g her t h an those in Laoqiao . Q i n gqiao i n Jiangx ian Shanx i have higher contents tha n sa m ples co llected i n other ori g ins .K ey w ords :Fr uctus Forsyth iae ; volati

10、le o i; l -pinene ; capillary gas chro m atography连翘 (Fr uctus Forsyth iae 为 木 犀 科 植 物 连 翘 Forsythia s us p ens a (Thunb . Vahl的干燥果实。主 要产于山西、 陕西、 河南等地 , 秋季果实初熟尚带绿色 时采收 , 蒸熟 , 晒干 , 习称 青翘 ; 果实熟透时采收 , 晒 干 , 习称 老翘 。连翘含挥发油、 苯乙醇苷类、 木脂素 类、 三萜类、 C 6-C 2天然醇及其苷类等成分。挥发油 类成分是其抗菌、 抗病毒 1作用的主要成分之一 , 主 要有 -蒎烯 , 其他尚

11、有 -水芹烯、 对 -聚伞花烯和 芳樟醇等 2。目前 , 对连翘制剂中 -蒎烯的含量测 定已有报道 3, 但对不同产地的连翘药材中挥发油及 -蒎烯的含量比较研究尚未见报道。本试验以水蒸 气蒸馏法 4提取连翘挥发油 , 建立了测定 -蒎烯含(-i :l co量的毛细管气相色谱法 , 并用于不同产地连翘中挥发油的 -蒎烯含量测定的比较研究。 1 仪器与试药HP-4890D 气相色谱仪 ; 挥发油提取器 (密度 小于 1型 。 -蒎烯对照品 (1S -(- - -p-inene , 纯度 99%,A lta Aesar 公司生产 ; 18个连翘药 材产地分别为山西、 河南、 湖北、 江西等地 , 由

12、山西中 医学院中药鉴定教研室裴 香萍讲师鉴定均 为 F or -sy t h i a sus pens a (Thunb . Vahl 的干燥果实 ; 醋酸乙酯 等试剂均为分析纯。 2 色谱条件HP-5(15m 0 53mm 1 5 m 毛细管柱 ;程序升温 :初始温度 40 , 以 1 m in -1速率升温至 50 , 保持 1m i n , 再以 5 m in -1升温 至 70 , 保持 1m i n ; 最后以 20 m in -1升温至 205 , 保持 3m in 。进样口温度 250 , 检测器 (FI D 温度280 ; 载气 N 2, 流速 20mL m i n -1; 不

13、分流进样 ; 空气 流 速 :390mL m i n -1; 氢 气 流 速 :36mLm in -1; 尾吹 :15mL m in -1。在上述条件下 -蒎 烯的色谱峰与样品中其他成分色谱 峰达到基线分 离。 -蒎烯对照品和样品的色谱图见图 1 。图 1 -蒎烯对照品 (A 和 1号样品 (B GC 色谱图Fi g 1GC chro m atogra m s of reference sub st ance(Aand sa mp l e No . 1(B1. -蒎烯 ( -pinene 3 对照品溶液及供试品溶液的制备 3 1 对照品溶液精密称取 -蒎烯对照品适量 ,用醋酸乙酯溶解并制成浓度

14、为 6 0m g mL -1的对 照品储备液 ; 精密量取 1mL 储备液 , 置 10mL 量瓶中 度 , , 0 m g m L -1的对照品溶液。3 2 挥发油的提取 将连翘粉碎成粉末 (过 1号 筛 , 分别取 100g , 精密称定 , 置圆底烧瓶中 , 加水 1200mL 浸泡 0 5h 后 , 用水蒸气蒸馏法提取 , 连续 回流提取 5h , 收集到的挥发油用 无水硫酸钠干燥 后 , 滤过 , 精密 称定 4。不同 产地的连翘中 挥发油提取率见表 1。3 3 供试品溶 液的制备 取连翘 挥发油 8mg , 精 密称定 , 置于 10mL 量瓶中 , 用醋酸乙酯定 容至刻 度 ,

15、摇匀 , 即得供试品溶液。 4 线性范围精密量取 -蒎烯对照品储备液 0 2, 0 4, 1 0, 2 0, 3 0mL , 分别置于 10mL 的量瓶中 , 用醋酸乙酯 稀释至刻度 , 摇匀。分别精密吸取 1 L , 注入气相色 谱仪 , 按上述色谱条件测定。以进样浓度 (X 为横坐 标 , 峰面积 (Y 为纵坐标进行线性回归 , 回归方程为 :Y =2 338 104X -174 2r =0 9995-蒎烯进样浓度在 0 121 8mg mL -1范围内呈良好线性。 5 精密度试验精密吸取 -蒎烯对照品溶液 1 L 注入气相色 谱仪 , 在上述色谱条件下连续进样 6次 , 测定峰面积 ,

16、结果 RSD 为 1 3%(n =6, 表明仪器精密度良好。 6 稳定性试验取同一供试品溶液 , 分别于 0, 2, 4, 6, 8, 10h 进 样 1 L , 在上述色谱条件下测定 -蒎烯的峰面积 , RSD 为 1 5%(n =6 。试验结果表明 , 供试品溶液 在 10h 内稳定。7 重复性试验取同一批连翘药材 (批号 070601, 按 3 2 项 下方法平行取样提取 6次 , 平均出油率为 2 57%, RSD 为 1 4%; 取 同 一 批 连 翘 挥 发 油 提 取 液 , 按 3 3 项下方法平行制备 6份供试品溶液 , 分别进 样 , 在上述色谱条件下测得 -蒎烯的含量平均

17、值 为 70 07%, RSD 为 1 2%。说明该法重复性良好。 8回收率试验取 9份已知含量 ( -蒎烯 70 07% 的连翘挥 发油 4m g 共 9份 , 精密称定 , 分别置于 10mL 量瓶 中 , 平均分为 3组 , 每组再分别精密加入 -蒎烯对 照品储备液 (6 0m g mL -10 3, 0 5, 0 7m L , 用醋 酸乙酯溶解并稀释至刻度 , 摇匀。按上述色谱条件 分别进样测定 , 结果低中高 3个浓度回收率 (n =3 分别 为 100 9%(RSD =0 8%, 101 9%(RSD =; 128 药 物分析杂志 Ch i n J Phar m Ana l 201

18、0, 30(1 60706201 8175 901 37 7山西安泽老翘 (Anz e , Sh anx, i Laoqiao 0710300 9655 770 54 8山西太原青翘 (Taiyuan, Shanx, i Q i ngqiao 0804111 2761 970 79 90801121 5160 580 91 10山西长治青翘 (C hangz h , i Shanx, i Q i ngqiao 0804201 4866 230 98 110712011 3863 150 87 12山西左权青翘 (Zuoquan, Shanx , i Q i ngq i ao 0707151 5

19、765 741 03 13河南青翘 (Henan , Q i ngq i ao 0708251 8860 231 12 14河南老翘 (Henan, Laoqiao 0708251 2966 600 86 150709010 8867 020 59 16湖北青翘 (H ube, i Q ingq i ao 0708252 6654 371 44 17湖北老翘 (H ub e, i Laoq i ao 0708251 0341 030 42 18江西老翘 (Jiangx, i Laoq i ao 0710250 5636 280 2010 讨论10 1 从实验结果可以看出 , 18个不同产地不同

20、批 号连翘药材中 , 山西绛县青翘和湖北青翘的挥发油 出油率较高 , 青翘的出油率及 -蒎烯含量大多高 于老翘 ; 挥发油成分中 -蒎烯含量较高的是山西 绛县青翘和山西安泽青翘 ; 药材中 -蒎烯含量较 高的是山西绛县青翘和湖北青翘。产地不同 , 药材 中 -蒎烯的含量有很大差异。10 2 文献报道 57连翘挥发油中 -蒎烯的含量 测定均为 GC 法 , 采用 30m 0 32mm 0 25 m 或 30m 0 25mm 0 25 m 毛细管柱 ; 而本实验采 用 15m 0 53mm 1 5 m 大口径毛细管柱 , 在柱 效没有小口径毛细管柱高的情况下 , 对测试过程中 的升温程序进行反复试

21、验 , 采用 3个升温梯度 , 达到 挥发油中 -蒎烯与其他峰的分离度大于 1 5的结 果。实验结果表明采用本文试验条件最佳 , 方法较 简便 , 重现性好 , 可用于连翘质量的评价。参考文献1Z HANG H ai -yan(张海燕 . Research p rogress on ch e m ical compo -nents and t h e phar m acology of F orsyt h ia s u s p e n sa (Thunb. Vahl(连 翘化学成分 及药 理活 性的 研究 进展 . J Chin M e d M ater (中 药 , 2SH I Su -xi

22、an (石 素 贤 , H E Fu -jiang (何 富 江 . Res earch on che m i cal constit uen ts of volatile oil fro m Fors y t h i a suspe n sa (Thunb. V ah l (连翘挥发油化学成分研究 . Ch i n J Pharm Ana l (药物分析 杂志 , 1995, 15(3:103WANG X iao -li n (王 小 琳 , CH EN B i n -hua (陈 彬 华 , GAO Yu an(高 原 . Deter m i nati on of -pinene i n

23、L ianq i ao Kangb i ngdu s oft caps u les by GC (连翘抗 病毒 软胶 囊中 -蒎烯 的 GC 法测 定 . Ch i n J P har m (中国医药工业杂志 , 2007, 38(2:112 4XI AO Hu i-m i n (肖会敏 , W ANG S i-w ang(王四旺 , XIE Yan-huan (谢艳华 , et a l . C o mparati ve study on 2k i nds of technologies for extracti ng ess en tial oil fro m unri pe F orsyt h i a suspe n sa (两