HPLC法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱的含量

1、HPLC法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱的含量                                      作者：徐世芳 陈爱瑛 姜丽霞   【摘要】  目的建立高效液相色谱法测定骨质宁搽剂

2、中盐酸小檗碱(C20H18ClNO4)含量的方法。 方法C18色谱柱，流动相为乙腈50mmol·L-1NaH2PO4水溶液（磷酸调PH=2.5）（2575），流速1.0mL·min-1,室温, UV 348 nm检测。 结果盐酸小檗碱在 0.1060.530g（n=5）范围内线性关系良好（r=0.9999）；方法精密度RSD为0.7%（n=6）。4批样品盐酸小檗碱的含量分别为19.11、18.81、18.83、18.92mg/100mg。结论方法专属性强、简便、准确；为该药提供了切实可行的质控方法。 【关键词】  骨质宁搽剂;盐酸小檗碱;含量测定;HPLCAbst

3、ract:ObjectiveTo develop an HPLC method for the determination of berberine hydrochloride in GuZheNing liniment.MethodsThe chromatographic system consisted of Dimonsil C18 column and mobile phase of acetonitrile50mmol·L-1 sodium dihydrogen phosphate (adjusted PH to 2.5 with H3PO4) (2575). The fl

4、ow rate was 1.0 mL·min-1, and the detective wavelength was at 348 nm.ResultsThe calibration curve was linear in the range of 0.1060.530 g（n=5）.The method was proved to be repeatable with RSD 0.7%（n=6）.4 batches of sample were analyzed and the Berberine Hydrochloride contents were 19.11, 18.81,

5、18.83, 18.92mg/100mg, respectively.ConclusionThe method is selective, simple and accurate, and could be used for the quality control of this preparation.Key words: GuZhiNing , Berberine Hydrochloride, assay, HPLC     盐酸小檗碱有较强的抗菌等药理作用，为黄连、黄柏、功劳木等中药材中的主要有效成分，在中药成方制剂质量标准中较多的选用为含量控制指标1。骨质

6、宁搽剂是由云母石、黄连、枯矾组成的中药成方制剂，其已有国家标准（标准编号：WS3B394598）的含量测定项是采用薄层色谱扫描法。在此标准的基础上我们进行了本注册药品的系列质量研究，并建立了用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量，方法专属性强、操作简便、灵敏、准确。为该药提供了切实可行的质控方法。1  仪器与试药    美国WATERS 高效液相色谱仪，510泵，484紫外检测器；N2000色谱工作站（浙江大学）；盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所：供含量测定用，批号110713200208）。骨质宁搽剂：规格为每瓶50mL；乙腈为色谱纯，水为重蒸水

7、，其它试剂均为分析纯。2  实验方法2.1  色谱条件及系统适用性试验    色谱柱：Dimonsil C18，5m，4.6mm×150mm，室温；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH至2.5）（25：75）；流速为1.0mL·min-1；理论板数以盐酸小檗碱计算为7000；主峰与前相邻峰的分离度为2.4；UV检测波长为348 nm；对照品溶液进样10L, 供试品溶液进样510L，外标法定量。2.2  溶液的制备3  方法学考察    &#

8、160;                        表1  回收率测定结果（略）4  样品测定结果    按所拟定的方法测定了四个批号(041102、041219、041222、041225)的样品，平行取样2份，测定，结果（mg/100mL）分别为：19.11、18.81、18.83、18.92，平均为18.9

9、mg/100mL。对照和样品的HPLC图见图1B和图1C。图1  阴性样品（A），对照品（B）与样品（C）HPLC图（略）1.盐酸小檗碱（berberine hydrochloride，13.9 min）5  讨论5.1  检测波长  用本流动相溶解的盐酸小檗碱对照品溶液作紫外扫描，显示于228、264、348、425 nm波长处有最大吸收。于348nm处检测阴性样品无干扰且主峰灵敏度理想，遂选择348nm为检测波长。5.2  柱效要求 曾采用Inertsil C18色谱柱，主峰与前相邻峰的分离度可达1.8，但理论板数以盐酸小檗碱计算仅为2800；后改用Dimonsil C18，理论板数