DNA修复基因RAD52遗传变异与小细胞肺癌铂类药物化疗疗效的关系要点

1、 临床研究 修复基因 遗传变异与小细胞肺癌 铂类药物化疗疗效的关系李洪敏 袁芃 于典科 马飞 谭文乐 封婷 杨洁 黄莹 林东昕 徐兵河 谭文国家癌症中心 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病因及癌变研究室癌发生及预防分子机理北京市重点实验室 （李洪敏 于典科 谭文乐 封婷 杨洁 黄莹 林东昕 谭文 ）；肿瘤内科 （袁芃 马飞 徐兵河 ）通信作者 ：谭文 ，：；徐兵河 ，： 摘要 目的 探讨 双链断裂修复基因 遗传变异与小细胞肺癌 （）患者铂类药物化疗疗效及预后的关系 方法 采用 平台检测 例接受铂类药物化疗患者 基因 个标签单核苷酸多态 （）位点的基因型 ，分析其与患者化疗疗效和总生存时间的

2、关系 采用 回归分析和 比例风险模型分析影响 患者疗效和预后的独立因素 结果 例患者中 ，采用 方案 （足叶乙甙 顺铂 ）化疗 例 （），采用 方案 （卡铂 足叶乙甙 ）化疗 例 （），其中有效 例 ，无效 例 ，有效率为 全组患者死亡 例 ，生存 例 ，中位生存时间为 个月 位于 基因 近基因区 位点与铂类药物化疗疗效有关 （），与携带 基因型患者比较 ，携带 或 基因型的患者化疗有效率降低（）卡氏体力状态 （）评分 分患者的化疗有效率高于 评分 分患者 （）广泛期患者的化疗有效率低于局限期患者 （）个 与患者铂类药物化疗后的预后均无关 （均 ）年龄 岁 评分 分 局限期 化疗有效和放射治疗

3、可延长患者的总生存时间 （均 ）结论 修复基因 遗传变异位点 为影响 患者铂类药物化疗疗效的独立因素 ，可能成为预测 患者铂类药物化疗疗效的遗传标志和 个体化治疗的重要标志物 主题词 小细胞肺癌 ；多态性 ，单核苷酸 ；基因 ；铂类化疗 ；疗效基金项目 ：国家高技术研究发展计划 （计划 ）（），（，）；，（，）：，：；，： （）， （），（）（），（） ，（） 年 月第 卷第 期 ，（），（） （）（）（），（） ， ； ，； ； ；：（） 肺癌是我国常见的恶性肿瘤 ，其发病率及死亡 率一直居于前列 根据肺癌组织类型的不同 ，将 肺癌分为小细胞肺癌 （，）和非小 细 胞 肺 癌 约 占 全 部

4、 肺 癌 的 ，是一种恶性度极高的神经内分泌肿瘤 以 卡铂或顺铂加足叶乙甙联合治疗一直是 的一 线治疗方案 ，临床治疗客观缓解率可达 有研究表明 ，患者铂类药物化疗疗效和化疗后 的生存时间存在较大的个体差异 ，遗传背景的不同 可能影响药物化疗疗效和患者的预后 基因编码的蛋白是参与 双链断裂损伤的同源 重组修复过程中的关键分子 ，在保持基因组稳定性 及阻止 损伤细胞发生癌变方面发挥重要作用 基因遗传多态与肺癌 肝癌和卵巢癌等多种 肿瘤 的 易 感 性 有 关 虽 然 基 因 作 为 修复通路中的关键基因在肿瘤的发生发展中 发挥了重要的作用 ，但其遗传变异与铂类药物化疗 疗效及预后的相关研究罕见报

5、道 我们收集了在我 院确诊并首次接受铂类药物化疗的 例 患 者的外周血和临床资料 ，分析患者 基因 个 标 签 单 核 苷 酸 多 态 位 点 （，）的基因型 ，探讨其遗传变异与 患者铂 类药物化疗疗效和预后的关系 ，旨在为 的铂 类药物化疗提供依据 资料与方法研究对象 ：收集 年 月至 年 月 于我院确诊 接受铂类药物化疗的资料完整的 患者 例 ，患者主要来自北京和周边地区 入组 标准 ：（）经细胞学或病理确诊为 ；（）不合并 第二原发肿瘤 ；（）在我院接受首程铂类药物化疗 （总化疗周期 个 ）；（）未接受手术治疗 ；（）入 组患者之间没有直系亲属关系 采用卡氏体力状态 评分 （，）对患者身

6、体 状态进 行 评 估 例 患 者 中 ，男 例 ，女 例 ；年龄 岁 ，中位年龄 岁 ；有吸烟史 例 ，无吸烟史 例 ；评分 分 例 ，评分 分 例 治疗方法 ：全组患者均采用铂类药物化疗 采用 方 案 （足 叶 乙 甙 顺 铂 ）化 疗 例 （），采用 方案 （卡铂 足叶乙甙 ）化疗 例 （）例患者采用单纯化疗 ，例患者 采用化疗后放疗 （）化疗 ：全组患者的化疗方案 主要为 方案 （顺铂 ，第 天 ；足叶乙 甙 ，第 天 ）和 方案 （卡铂 ，第 天 ；足叶乙甙 ，第 天 ）（）胸部放疗 ：采用普通放疗或三维适形放疗 ，放疗的总 剂量为 ，均采用常规分割 次 ，次 放疗靶区包括原发病灶

7、肺门及纵隔淋巴 结 纵隔和 （或 ）锁骨上区 分期及化疗疗效评价 ：（）分期标准 ：采用美 国退伍军人医院的分期方法将 分为局限期和 广泛期 病变局限在一侧胸腔 纵隔 前斜角肌和锁 骨上淋巴结 ，无明显上腔静脉压迫声带麻痹和胸腔 积液定义为局限期 ；病变超过上述范围为广泛期 （）化疗疗效评价标准 ：根据实体瘤疗效评价标准 （版 ），将 化 疗 疗 效 分 为 完 全 缓 解 （，）部分缓解 （，）病 情稳定 （，）和病情进展 （，）其中将 和 定义为化疗有效 ，和 定义为化疗无效 患者化疗 个周期评 价近期疗效 中华肿瘤杂志 年 月第 卷第 期 ，随访情况 ：通过病案查询和电话进行随访 ，随访

8、截至 年 月 日 全组患者的随访时间 为 个月 ，中位随访时间为 个月 例 患者获得有效随访 ，失访率为 的筛选及基因分型 ：本研究以 及千人基因组计划中的中国汉族北京人群基因组数 据为依据 ，对 基因多态位点进行 筛 选 筛选标准 ：次要等位基因频率 ， 相关系数 ， 最终确定 个 （表 ）入组患者治疗 前均抽取外周静脉血 ，采用酚 氯仿方法提取基 因组 ，应用 平台检测基 因型 表 基因 个候选 的基本信息位点变异类型 位置非翻译区 非翻译区 非翻译区 非翻译区 近基因区 近基因区 近基因区 非翻译区 内含子 注 ：标签单核苷酸多态 ；：次要等位基因频率 统计学方法 ：采用 统计软件进行统

9、 计学分析 多 因 素 分 析 采 用 回 归 模 型 和 比例风险回归模型 ，检验水准为 结 果近期化疗疗效和生存情况 ：全组 例患者均采用 铂 类 药 物 化 疗 ，接 受 方 案 化 疗 例 （），接受 方案化疗 例 （），其中 化 疗 有 效 例 （例 ，例 ），无 效 例 （例 ，例 ），有效率为 死亡例 ，生存 例 ，中位生存时间 个月 基 因 遗 传 变 异 和 临 床 病 理 特 征 与患者近期化疗疗效的关系 ：化疗有效的患者 中 ，位点 和 基 因 型 分 别 为例 （）例 （）和 例 （）化疗无效的患者中 ，位点 和 基因型分别为 例 （）例 （）和 例 （）与携带 等位基

10、因患者比 较 ，携带 等位基因的患者化疗疗效降低 （，为 ，）；其他 个位 点遗传变异与 患者近期化疗疗效均无关 （均 ；表 ）表 基因 个 位点影响小细胞肺癌患者化疗疗效的 多因素回归分析结果位点 有效 （）基因型 基因型 基因型 无效 （）基因型 基因型 基因型（）值 （）（）（）（）（）（）（ ）（）（）（）（）（）（）（ ）（）（）（）（）（）（）（ ）（）（）（）（）（）（）（ ）（）（）（）（）（）（）（ ）（）（）（）（）（）（）（ ）（）（）（）（）（）（）（ ）（）（）（）（）（）（）（ ）（）（）（）（）（）（）（ ） 注 ：标签单核苷酸多态 ；：主要等位基因纯合型 ；：杂

11、合基因型 ；：次要等位基因纯合型 ；有缺失数据 ；（）内为 例患者的 位点成功分型 ，其中 例患者 评分 分 ，化疗有效 例 ，无 效 例 ，有效率 ；例患者 评分 分 ，有效 例 ，无效 例 ，有效率 ，差异有 统计学意义 （，为 ，）例局限期患者中 ，化疗有效 例 ，无效 例 ，有效率 ；例广泛期患者中 ，化疗 有效 例 ，无效 例 ，有效率 ，差异有统 计学意 义 （，为 ，）患者的性别 年龄 吸烟情况和化疗 方案与化疗疗效均无关 ，差异均无统计学意义 （均 ）与携带 基因型患者比较 ，携带 或 基因型的患者化疗疗效降低 （，为 ，；表 ）基 因 遗 传 变 异 和 临 床 病 理 特

12、征 与 患者预后的关系 ：年龄 岁和年龄 岁 患者的中位生存时间分别为 个月和 个月 ，差 异有统计学意义 （，为 ，） 评分 分和 评分 分患 年 月第 卷第 期 ，表 小细胞肺癌患者化疗疗效影响因素的 多因素回归分析结果因素 例数 化疗疗效 有效 无效（）值性别 男 女 （ ）年龄 （岁 ） （ ）吸烟情况 无 有（ ）评分 （分 ） （ ）肿瘤分期 局限期 广泛期 （ ）化疗方案 方案 方案 （ ）基因型 （ ） （ ）（ ） 注 ：卡氏体力状态评分 ；方案 ：足叶乙甙 顺铂 ；方案 ：卡铂 足叶乙甙者的中位生存时间分别为 个月和 个月 ，差异 有统计学意义 （，为 ，）局限期和广泛期患

13、者的中位生存时间分别 为 个 月 和 个 月 ，差 异 有 统 计 学 意 义 （，为 ，）化疗有效和化疗无效患者的中位生存时间分别为 个月和 个月 ，差异有统计学意义 （，为 ，）未接受放射治疗和接受放射治疗患者的中位生存时间分别 个月和 个月 ，差异 有 统 计 学 意 义 （，为 ，表 基因 个 位点影响小细胞肺癌患者总生存时间的 多因素回归分析结果位点基因型 基因型 基因型 （）值（）（）（）（ ）（）（）（）（ ）（）（）（）（ ）（）（）（）（ ）（）（）（）（ ）（）（）（）（ ）（）（）（）（ ）（）（）（）（ ）（）（）（）（ ） 注 ：标签单核苷酸多态 ；：主要等位基因纯合

14、型 ；：杂合基因型 ；：次要等位基因纯合型 ；有缺失数据 ；（）内为 ；表 ）个 位点遗传变异与患者铂 类药物化疗后的总生存时间均无关 （均 ，表 ）表 小细胞肺癌患者预后影响因素的 多因素 回归分析结果因素 例数 死亡 例数 中位生存 时间 （月 ）（）值性别 男 女 （ ）年龄 （岁 ） （ ）吸烟情况 无 有（ ）评分 （分 ） （ ）肿瘤分期 局限期 广泛期 （ ）化疗方案 方案 方案（ ）化疗疗效 有效 无效 （ ）放射治疗 无 有 （ ） 注 ：卡氏体力状态评分 ；方案 ：足叶乙甙 顺铂 ；方案 ：卡铂 足叶乙甙讨 论本研 究 显 示 ，基 因 近 基 因 区 的位点遗传变异与 患

15、者铂类药物化 疗疗效有关 与携带 基因型患者比 较 ，携带 或 基因型的患者化疗疗效显著降 低 ，但并未发现该位点遗传变异与患者的预后有关 ， 中华肿瘤杂志 年 月第 卷第 期 ，考虑存在多种混杂因素而抵消了该遗传因素对于患 者预后的影响 ，提示该位点可能作为潜在预测 患者铂类药物化疗疗效的分子标志物 等 对 例宫颈癌组织标本进行体外药 敏检测 ，结果显示 ，和 遗传变异 蛋白表达与铂类药物化疗敏感性 有关 本研究结果显示 ，接受铂类药物化疗的 患者中 ，位点与 铂类药物化疗疗 效有关 ，位点与铂类药物化疗疗效无关 ，考虑可能是在不同类型肿瘤中研究方法和样本量差 异所致 该位点遗传变异与铂类药

16、物化疗疗效的相 关性有待更多研究验证 等 报道 基 因遗传变异与 患者预后的关系 ，在 例美 洲白种人群中 ，发现位于 基因内含子区的 位点遗传变异与 患者预后有关 在本研究中 ，位点与 位点高度 连锁 ，但与患者的预后无关 ，考虑存在人群差异 治 疗方案不同以及样本量的限制 ，有待于进一步深入 探讨 基因位于人类基因组 区 域 ，全长 ，编码具有 个氨基酸的 蛋白 该蛋白可结合于单链 末端 ，促进互补的 双链 形成 ，从而介导 双链断裂损伤的同 源重组修复 有研究显示 ，亦可在 缺失的肿瘤细胞中 ，替代 与 相互作 用 ，促进其下游通路激活 ，发挥 修复作用 遗传变异与肺癌和乳腺癌等多种肿瘤

17、的发 生发展有关 修复通路关键基因的遗传 变异与肺癌铂类药物化疗疗效和预后有关 ，和 参与顺铂或卡铂引起的 损伤修复过 程 ，基因 和 基因 多态与晚期非小细胞肺癌铂类药物化疗敏感性相 关 核苷酸切除修复交叉互补组 基因启动子 区 多态与局限期 铂类联合化疗患 者生存有关 本研究结果显示 ，与铂类药物化疗 疗效相关的 基因 遗传变异位于 基因上游的调控区 ，可能通过与转录因子结合而影 响基因的表达 ，进一步影响 的修复过程从而引 起化疗疗效的差异 有研究表明 ，评分和肿瘤分期与患者的化 疗疗效有关 本研究显示 ，评分 分患者 的化疗有效率高于 分患者 ，局限期患者的 化疗有效率高于广泛期患者 （均 P ）考虑 评分 分和局限期的患者化疗耐受性更好 ， 较 一 般 状 况 差 的 患 者 更 能 从 化 疗 中 获 益 位点的遗传变异可与患者 评分及 肿瘤分期共同作为铂类药物化疗疗效的预测指标 本研究还显示 ，年龄 岁 评分 分 局限 期 化疗有效和放射治疗都能够延长患者的总生存 时间 张文珏等 对局限期 患者放化综合 治疗的疗效和预后影响因素进行分析 ，其结果与本 研究结果一致 ，采用化疗和