甲亢患者治疗前后血清E-选择素、sICAM-1水平的变化及意义

1、甲亢患者治疗前后血清E-选择素、sICAM-1水平的变化及意义他巴唑（MMI）与丙基硫氧嘧啶（PTU） 治疗甲亢的比较和选择【摘要】目的测定甲亢患者血清中可溶性细胞间粘附分子( sICAM-1)、可溶性E-选择素(E-selectin)水平,探讨 sICAM-1、E-选择素与甲亢病情的关系。方法用酶联免疫分析法(ELISA)检测22例甲亢患者治疗前后 sICAM-1、 E-选择素水平。结果甲亢患者治疗前血清 sICAM-1、 E-选择素水平明显高于甲亢患者治疗后血清中的水平(P<0.05)。结论sICAM-1及E-选择素参与甲亢发病过程, sICAM-1及 E-选择素可作为判断病情严重性

2、的指标。【关键词】甲亢; sICAM-1;E选择素Patients with hyperthyroidism before and after treatment the changes and significance of serum E- selection, sICAM-1 level Abstract Objective Determination of sICAM -1 and soluble E- selectin (E- selectin) level in serum of patients with hyperthyroidism ，to investigate the (

3、sICAM -1) and E- selectin corrdation in serum of patients. Methods Detection of sICAM -1 and E- selectin levels in serum of 22 patients with hyperthyroidism before and after treatment with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). results sICAM -1 and E- selectin were significantly higher than pre-

4、treatment serum levels after treatment ( P<0.05) in serum. Conclusion sICAM -1 and soluble E- selectin involved in the pathogenesis , sICAM -1 and soluble E- selectin as criteria for judged the severity of hyperhtyrodism 【关键词】 甲亢;细胞粘附分子;E选择素keyword hyperthyroidism; sICAM -1; E selectin甲状腺功能亢进症（hy

5、perthyroidism，简称甲亢）是甲状腺腺体本身功能亢进，合成和分泌甲状腺激素增加所导致的甲状腺毒症。是一种伴甲状腺激素增多的器官特异性自身免疫性疾病，由于甲状腺激素过多，可以引起循环、消化、神经等系统兴奋性增高和代谢亢进等临床表现，其病因和发病机制尚不完全清楚。本文通过检测连云港市第二人民医院甲亢初诊和复诊患者的E-选择素、可溶性细胞间粘附分子-1的指标的水平，探讨其在甲亢的发生、发展过程中的作用。1 资料与方法1.1一般资料 22例甲亢患者均来自于本院门诊及住院病人，符合甲亢的诊断标准。其中男5例，女17例，年龄 15-56岁，平均(39.5±12.37)岁。1.2方法 患

6、者血清样本均于清晨空腹采静脉血4ml，3000r/min离心10min，取上层血清于-70低温冰箱中保存待测。血清E-选择素、可溶性细胞间粘附分子-1测定均采用酶联免疫吸附试验（ELISA）。试剂盒由深圳晶美生物技术公司提供。由美国GeneMay公司生产。严格按说明书操作。将标准品用稀释液定比稀释，混合均匀。将酶标板各孔依次编号，然后加入不同浓度标准品或标本 50 l 于相应反应孔内，立刻加入生物素标记抗体工作液 50 l。用封板胶纸封住反应孔，轻轻震荡均匀，37 孵箱孵育 60 min。甩去孔内液体，每孔再加入洗涤液洗板 3 次，在每孔中加入 80 l 的亲和链霉素-HRP，轻轻震荡均匀，3

7、7 孵箱孵育 30 min。再洗板 3 次同上。每孔加入底物 A、B 各50 l，轻轻震荡均匀，37 避光孵育 10 min。迅速加入 50 l 终止液，酶标仪 450 nm 处读数，在 5 min 内测定各孔吸光度值( OD 值) ，根据定比稀释标准品的 OD 值绘制标准曲线，根据样品 OD 值和标准曲线，算出标本中的含量。1.3统计学方法 检测数据用X±s表示，应用SPSS13.0软件进行t检验。2 结果 甲亢患者治疗前后，血清E-选择素、sICAM-1差异有显著性,见下表。甲亢治疗前后血清sICAM-1、Eselectin、白细胞变化hyperthyroidism before

8、 and after treatment, serum sICAM-1 Eselectin, white blood cell changes项目n治疗前(ng/ml)治疗后(ng/ml)sICAM-1E-selectin2222140.5±30.9100.38±50.58122.5±17.6*67.91±45.58*与治疗前比较: P<0.053 讨论 细胞间黏附分子-1( ICAM-1) 属免疫球蛋白超家族黏附分子成员，体内分布广泛。ICAM-1能介导效应器官内浸润淋巴细胞和靶细胞之间的相互作用，导致淋巴细胞向效应部位聚集、定位、抗原呈递、抗原

9、识别、淋巴细胞增殖和细胞毒等一系列反应。ICAM-1 广泛表达于成纤维细胞、白细胞表面，正常内皮细胞表达很少，是 T 淋巴细胞激活共刺激分子，在白细胞黏附和炎症应答蔓延中起关键作用。sICAM-1 是 ICAM-1 经蛋白水解后存在于体液中脱落部分，其反映局部黏附分子的表达和代谢状况【1】。它能介导效应器官内浸润淋巴细胞和靶细胞之间的相互作用与疾病免疫活动存在相关性。E-选择素是诱导性黏附分子,介导白细胞在炎症和组织损伤区域的滚动,TNF-、IL-1或脂多糖均可刺激内皮细胞合成E-选择素。【2】其最主要的作用是介导内皮细胞与中性粒细胞的黏附。静息时，内皮细胞上的E-选择素含量甚微，当受到炎性因

10、子IL-l，TNF-a，内毒素(LPS)等刺激后，则表达大大增加，于4 h左右达高峰，可维持24-48 h，然后从胞膜上脱落进人血液，成为可溶性E-选择素在血浆中测出，并且在随后的一周内血浆水平达到稳定【3】。检测其水平可反映细胞膜上E-选择素的表达状况，并作为内皮细胞受损的分子标志。以往对E-选择素的研究一般集中在炎症早期的粘附过程中的作用机制,发现选择蛋白作为早期粘附分子参与炎症反应, 当内皮细胞受到细胞因子( 如 TNF-B, VLA- 4 等) 或内毒素的刺激时迅速合成 E-选择素并转移到血管内皮细胞表面【4】, 与其配体促发第一轮白细胞- 内皮细胞反应, 而 ß2整合蛋白与

11、内皮细胞 ICAM-1 相互作用引发第二轮白细胞-内皮细胞反应, 前者是后者白细胞牢固附着和透过内皮游走的先决条件。但E-选择素是否也参与炎症的后期病理改变还不清楚。Kaplanski 等【5】认为E-选择素不仅参与了早期血管内皮细胞的激活和白细胞的移行, 而且参与后期内皮细胞形态变化, 并促进白细胞对周围组织的作用。E- 选择素来源于内皮细胞，在静止内皮细胞上并无表达，只在内毒素、IL-1 等因子刺激后才有表达。它们分别与各自的配体结合，使白细胞得以在内皮细胞表面黏附、翻滚，并进而发生跨内皮迁移和呼吸爆发，释放氧自由基和溶酶体酶，引起内皮细胞损伤和周围组织的炎症反应。 甲状腺功能亢进症为自身

12、免疫性疾病，在其发病机制中，淋巴细胞的活化、黏附、迁移等都与黏附分子密切相关。研究结果表明，治疗前的甲亢患者血清 sICAM-1、E- 选择素含量均见增高，并随病情的好转逐步下降。故血清 sICAM-1、E- 选择素含量基本上可反映内皮细胞与白细胞的激活状态和患者病情程度。表明甲状腺功能亢进症与血清sICAM-1、E- 选择素引起的炎性反应有关。血清 sICAM-1 与E-选择素结合能够较为全面的了解甲亢患者的免疫及细胞凋亡的状态，对于监测甲亢患者病程进展有较好的临床意义，并为治疗方案提供依据。参考文献1褚俏梅,李方都.131I治疗后Graves眼病血清TNF-、sTNFR和sICAM-1的相

13、关性研究J. 临床眼科杂志, 2011,19(4) :316-319.Zhu Qiaomei, Li Fang.131I correlation of J. clinical department of Ophthalmology magazine Graves eye serum TNF- , sTNFR II and sICAM-1 after treatment, 2011,19 (4): 316-3192 付丽梅，孙青. E-选择素的研究进展J.医学综述，2008,14（2）：185-187.3 Vestweber D，Blanks JEMechanisms that regulate the function of the selectins and their ligandsJPhysiol Rev，1999，79(1)：181-2134 Abbassi O, K ishimoto TK, McIntire LV, Anderson DC,Smith CW. E-select in support s neutrophil rolling in vitro under conditions of flow J . J Clin