西洋参皂苷的分离和提纯

1、西洋参皂苷的提取及纯化西洋参皂苷的提取及纯化 衣洁菡目录前言前言1 11目的和意义目的和意义2国内外的研究现状国内外的研究现状3人参皂苷的分类人参皂苷的分类4实验方法及步骤实验方法及步骤5本项实验的创新点本项实验的创新点67前言前言 西洋参是人参的一种，又称花旗参，西洋参是人参的一种，又称花旗参，两者虽然同种，但因为气候影响，前者两者虽然同种，但因为气候影响，前者的参面横纹比后者更明显，有效成分含的参面横纹比后者更明显，有效成分含量也较高。量也较高。人参皂苷为西洋参的主要有效成分，人参皂苷为西洋参的主要有效成分，它具有西洋参根的主要生理活性，是由它具有西洋参根的主要生理活性，是由皂苷元和糖相连

2、构成的糖苷类化合物。皂苷元和糖相连构成的糖苷类化合物。目的和意义目的和意义 由于人参皂苷尚未由于人参皂苷尚未实现全化学合成，实现全化学合成，其单体皂苷只能从其单体皂苷只能从西洋参的根、茎等西洋参的根、茎等部位提取总皂苷后，部位提取总皂苷后，经加工、分离及纯经加工、分离及纯化得到。化得到。各种皂苷的含量、存各种皂苷的含量、存在部位不尽相同，且在部位不尽相同，且药理作用有的相似、药理作用有的相似、有的相反、有的具有有的相反、有的具有独特的药理作用。为独特的药理作用。为了充分发挥各单体的了充分发挥各单体的生物活性，有望进一生物活性，有望进一步对各单体进行制备，步对各单体进行制备，应用于新药开发领域。

3、应用于新药开发领域。故对总皂苷的提取、故对总皂苷的提取、人参皂苷人参皂苷Rb1和和Re的的分离和纯化进行了实分离和纯化进行了实验研究。验研究。人参各单体皂苷普遍具人参各单体皂苷普遍具有调节免疫系统、降低有调节免疫系统、降低血清中胆固醇含量、防血清中胆固醇含量、防止心血管疾病、消炎、止心血管疾病、消炎、解毒等生理功效。解毒等生理功效。firstthenfinally国内外的研究现状国内外的研究现状 人参皂苷的研究始于1854年，美国学者首先从西洋参中提取分离出了总皂苷，1962年藤田等人从人参根中分离得到了人参皂苷及苷元，70年代初，研究得到了多种人参皂苷单体。 我国学者也对人参皂苷成分进行了深

4、入的研究，从1981年到目前，匡学海、蔡培列、陈英杰等人已从人参属植物中发现了40多种人参皂苷。 人参皂苷的分类人参皂苷的分类: 人参皂苷属四环三萜类化合物，按其苷元部分的结构不同可分为三种类型，既原人参二醇型皂苷（简称PPD），如人参皂苷Ra1、Ra、Rb1、Rb2、Re和Rd；原人参三醇型皂苷，（简称PPT），如人参皂苷Rf、Rg2和Rh1等；齐墩果酸，如人参皂苷Ro。实验方法及步骤：实验方法及步骤：一、总皂苷的提取一、总皂苷的提取：1 1、取西洋参、取西洋参60C60C烘干粉碎，称取烘干粉碎，称取100g100g，用，用1212倍量的倍量的70%70%的乙醇水浴加热回流提取的乙醇水浴加热

5、回流提取3 3次（次（400 mL400 mL3 3），每次），每次2 2小时。小时。2 2、三次提取液混合，减压浓缩至、三次提取液混合，减压浓缩至50 mL50 mL，得西洋参粗提，得西洋参粗提液。液。3 3、D101D101大孔吸附树脂的预处理（具体见相关参考文献）大孔吸附树脂的预处理（具体见相关参考文献）4 4、西洋参粗提液用、西洋参粗提液用1515倍量的水溶解，过滤后上预处理好倍量的水溶解，过滤后上预处理好的的D101D101大孔吸咐树脂柱。先用水洗柱以除去大部分杂质，大孔吸咐树脂柱。先用水洗柱以除去大部分杂质，再用再用2%2%的的NaOHNaOH溶液洗柱除去色素，后用溶液洗柱除去色素

6、，后用2%2%的的HClHCl溶液洗柱，溶液洗柱，再用水洗柱至流出液为中性。最后用再用水洗柱至流出液为中性。最后用90%90%（浓度根据文献（浓度根据文献及具体情况）的乙醇淋洗，收集流出液。及具体情况）的乙醇淋洗，收集流出液。5 5、流出液回收，、流出液回收，60C60C减压干燥，得干燥黄白色粉末为西减压干燥，得干燥黄白色粉末为西洋参总皂苷，称重并用洋参总皂苷，称重并用HPLCHPLC检测人参皂苷检测人参皂苷RbRb1 1和和ReRe的质量的质量分数。分数。二、人参皂苷二、人参皂苷Rb1和和Re的分离的分离 :取西洋参总皂苷6.0g，用30 mL70%的乙醇溶解，加入300 mL丙酮搅拌（丙酮

7、的加入必丙酮的加入必须在搅拌下缓缓进行，以免须在搅拌下缓缓进行，以免二醇组皂苷析出过快将大量二醇组皂苷析出过快将大量的三醇组皂苷包裹在沉淀中，的三醇组皂苷包裹在沉淀中，而达不到预期的分离效果而达不到预期的分离效果），析出沉淀，静止放置。 过滤沉淀并干燥，得棕黄色干燥粉末为A部分（Rb1），称重。将母液回收，减压蒸干，得棕黄色粉末为B部分（Re），称重。HPLC分别测定A、B中Rb1和Re的质量分数。三、人参皂苷三、人参皂苷Rb1和和Re的纯化：的纯化： A部分用20 mL水溶解，加200 mL丙酮搅拌，析出大量沉淀，静置，过滤，沉淀再用20 mL水溶解，加200 mL丙酮同法处理，静置，过滤，

8、60C减压干燥，得黄白色干燥疏松粉末，为人参皂苷Rb1。称重并用HPLC检测，人参皂苷Rb1的质量分数。 A部分丙酮沉淀的母液回收溶剂至干，得到的粉末与B部分合并，用30 mL 95的乙醇溶解，加300 mL丙酮搅拌，析出沉淀，静置，过滤，母液回收至干，再用20 mL 95乙醇溶解，加200 mL丙酮同法处理，过滤，溶液回收至干，再用丙酮同法处理一次，过滤，回收溶液至于，60减压干燥，得黄白色干燥疏松粉末，为人参皂苷Re。称重并用HPLC检测人参皂苷Re的质量分数。 1、Rb1的纯化：的纯化： 2、Re的纯化：的纯化： 本项试验的创新之处：本项试验的创新之处：首先建立了首先建立了西洋参皂苷西洋参皂苷的实验室反的实验室反应体系，利应体系，利用该方法研用该方法研究了人参皂究了人参皂苷的生物活苷的生物活性。性。 本实验采用萃本实验采用萃取、大孔树脂取、大孔树脂进行分离纯化进行分离纯化 ，得到总皂苷和得到总皂苷和单体皂苷；采单体皂苷；采用高效液相对用高效液相对单体成分进行单体成分进行定量测定，结定量测定，结果稳定、可靠