检测项目技术操作标准程序规范文件,淀粉酶(α-AMY)测定

1、茶心医院检验科检测项目技术操作标准 程序规范文件淀粉酶（a -AMY）测定文件编号：页码：第1页共5页1目的为操作者提供标准操作规程2 适用范围只适用于此项目的操作3 定义无4 测定原理和临床意义4.1 测定原理a-淀粉酶检测 中使用一种新的底物2氯4硝基苯麦芽 丙糖田（CNPG3该底物直接与淀粉酶反应而不需辅酶，从底物中释放出2氯4 硝基苯（CNP405nm波长下监测吸光度的变化。吸光度变化速率与样本中淀粉酶活性成正比。4.2 临床意义血清淀粉酶测定主要用于诊断急性胰腺炎，在急性发作期，AMY活性明显升高。尿淀粉酶在发病后12 - 24小时也会升高。其他急性疾病，如溃疡病穿孔、急性腹膜炎、肠

2、梗性胰腺炎、胰腺月中瘤以及流行腮腺炎、唾液腺化脓或腺管堵塞时，血清淀粉酶也会有所升高。而对 于各种肝脏疾病、肝炎、肝硬化、肝脓月中、肝癌及胆囊炎等，则淀粉酶活性下降。5 实验室条件5.1 实验室：生物工程有限公司生化实验室5.2 温湿度：温度：15-32 C,湿度：20-85%6 标本要求6.1 标本种类6.1.1 检体种类：血清6.1.2 检体量： 最适量3 ml 最小量2 ml6.1.3 分析量： 最适量5001 最小量200（! l6.1.4 容器：普通隔离胶管（黄色）6.1.5 采集条件：检查对象生活饮食处于正常状态，避免剧烈运动，避免精神紧张，一般采 用空腹，紧急状态可不空腹。6.2

3、 使用条件6.2.1 保存条件：血清：。4-25 C放置可稳定5天。试剂：自生产日期起，2-8 C避光保存，可稳定至瓶标日期（16个月）； 开瓶试剂，避光保存在2-8 C可放置12周，15-25 C中可放置4周。6.2.2 特殊容器：无6.2.3 预防措施：因为检体有感染的危险性，使用时必须戴手套，防止检体飞散污染环境和 器具，应尽快处理。6.3 拒收标准：采血量不足、严重溶血、严重乳糜血等。7 试齐1J7 、1购入试齐I:试剂名称品牌等 级保存条 件肩效期限产品批 号R1; 2-（N-吗啡咻）乙磺 酸缓冲液，CNPG3醋 酸钙，氯化钠HOMA2-8 C见试剂盒 标签见试剂 盒标签7.2试剂配

4、制：无需配制，开瓶即用，稳定至瓶标日期（无污染条件下）茶心医院检验科检测项目技术操作标准 程序规范文件淀粉酶（a -AMY）测定文件编号：页码：第2页共5页8仪器HITACHI 7180自动生化分析仪8 校准8.1 校准品准备8.1.1 校准品：豪迈多项复合校准物；货号 13160; 1>5mL8.1.2 校准品配制：1）器具要求：5mL干净的吸管/移液管1支，洗耳球一个2）配制方法：将冻干的校准品取出，用吸管（校准专用）或移液管吸纯水（要求水质>15M Q） 5mL溶解，注意余下的水不得吹入瓶内，应在瓶壁停留15秒。将盖盖紧，轻轻颠倒5次，放置10分钟，再轻轻颠倒即可使用。将溶好

5、的校准品进行分装，用 双层封口膜封好，放入-20C冰箱保存备用。3）保存条件容器：复溶后可分装到仪器样品杯中。温度：冻干品2-8 C 复溶品<-20 C效期：未开瓶冻干品2-8C,可在有效期内保持稳定；复溶品 G20C可稳定1个月。4）标签：复溶后瓶上应标明溶解日期、品名、效期、配制人。8.2 校准8.2.1 1校准频度：一般每周一次，如下列情况发生时，应进行一次校准：1）改变试剂的批号。2）仪器进行过一次大的维护或更换灯泡比色杯等重要部件。3）质控出现异常的趋势或偏移，或超出了实验规定的接受限，采取一般性纠正措施后， 不能识别出纠正问题时。8.2.2 校准方法线性校准1）将分装好的校准

6、品取出，放在室温自然溶解（约 20分钟），待其完全溶解后轻轻颠 傕J 6次即可。2）将校准品放在校准位上进行校准。（详见仪器操作规程）8.2.3 校准判定：校准通过后应进行质控验证，若质控在规定的范围内，即可判定校准成功，若如果质控结果仍不在允许范围内，说明校准可能失败。8.2.4 异常处理：若校准失败，应对校准品、试剂、仪器等进行排查；若校准通过但质控失控， 应对质控品、试剂、仪器进行排查。9 精度管理9.1 1质控物质9.1.1 1名称：正常复合质控血清，货号 13951、13511; 1>5mL 异常复合质控血清，货号 13151、13512; 1>5mL9.1.2 2品牌：

7、豪迈9.2 2质控物质的使用和配制：9.2.1 1器具要求：5mL干净的吸管/移液管1支，洗耳球一个9.2.2 2配制方法：1）将冻干的质控品取出，用吸管（校准专用）或移液管吸纯水（水质>15M0） 5mL溶解，注意余下的水不得吹入瓶内，应在瓶壁停留15秒。2）将盖盖紧，轻轻颠倒5次，放置10分钟，再进行颠倒5次，并颠倒放置10分钟，再 颠倒5次，放置10分钟，轻轻颠倒即可使用。3）将溶好的质控品放入4-8 C备用（可保存3天）。如果进行分装，用双层封口膜封好，淀粉酶（a -AMY）测定文件编号：页码：第3页共5页茶心医院检验科检测项目技术操作标准 程序规范文件放入-20 C冰箱保存备用

8、（可保存1个月）。4）标签：复溶后瓶上应标明溶解日期、品名、效期、配制人。10.3 测定周期：每日早开机后测定质控一次，午后测定一次质控。10.4 保存方法：未开瓶的质控品于2-8C保存，可在有效期内保持稳定；复溶的质控品可放置在4-8C保存3天；在&-20C可稳定1个月。10.5 质控操作方法：10.5.1 将分装好的质控品取出，放在室温自然溶解（约 20分钟），待完全溶解后，将 其上下轻轻颠倒6次即可。10.5.2 把质控品放在质控位上做质控。（详见仪器操作规程）10.6 质控规则：根据设定的靶值和标准差绘制LeveyJenningS空制图，一般采用 Westgard规 则质控方法

9、1 2S测定值超出1及S,这是警告规则，要求操作人员检查是否还符合以下其中任一规则。1 3S质控值超出XS,是失控规则，为随机误差。2 2S连续2次结果超出了同方向的X +2S或X -2S,是失控规则，为系统误差。R 4S 一个质控值超出X+2S,另外一个超出了 X-2S,是失控规则，为随机误差。10 X连续10次质控值在X一侧，是失控规则，为系统误差。10.7 失控处理：1）核查所用检测试剂的质量，是否过期或失效；检查校准品是否失效；检查质控品是否失效； 有无仪器维护不良；检查工作人员的操作是否正确；检查当日实验室内温度，湿度等环境因 素是否异常；有无特殊影响试验结果的情况。2）针对查找出的

10、原因采取相应的纠正措施，并重新测定质控，如果质控结果仍不在允许范围内，应对检测仪器进行重新校准，必要时与仪器或试剂厂家联系，以得到技术支持。3）记录在案：将检查和修正过程详细记录在案；，操作者，组长签字。10.8 数据记录及保存形式：x质控图（电子版），原始仪器打印记录应由审核者签字。10操作程序11.1 标本准备11.1.1 容器：普通隔离胶管（黄色）11.1.2 标本核收：按项目分类，按规定进行标本审核。审核申请单与标本管的项目、姓名、 标 本种类。如果标本不合格，应填写不合格标本登记。11.1.3 标本前处理：1）将标本编号，离心（血清一定要离好），离心3000转/分钟10分钟，两遍。2

11、）将离心的标本进行检查，如血清不好，应重新离心，按号依次放入盘内，对号入座。标本 要放正，以免碰针。11.2 操作程序详见仪器操作规程11.2.1 开机前准备。11.2.2 清理数据。11.2.3 校准（必要时）11.2.4 做质控。11.2.5 输机。11.2.6 放标本。11.2.7 开始分析。11.2.8 数据传送茶心医院检验科检测项目技术操作标准 程序规范文件淀粉酶（a -AMY）测定文件编号：页码：第4页共5页11.2.9 试验完毕后维护工作。11.2.10 关机。11.2.11 保存标本11.2.12 登记并记录当日仪器的状况，并签字。11.3 仪器分析条件分析方法：速率法样品+

12、R137；吸光度A I37C吸光度A n（3P l） （300WT）2min3min根据A=A2-A1 计算浓度。11.4 危险品管理：11.5.1 标本可能有感染性，因此检验需戴手套，轻拿轻放，避免标本溅洒污染。11.5.2 对废弃的标本及废液处理，必须遵守废弃物管理办法进行处理。11.5.3 保护和安全的提示：标本均视为有潜在传染性。11计算：方程式： AMY（U/L尸zXA/minXK 理论K值9018 （比色杯光径为1.0cm）TvX 1000K=£ X SvX L A/min:每分钟平均吸光度的变化e :毫摩尔消光系数=11.2 mM-1 cm-1Tv：总反应体积（林l）S

13、v：标本体积（小l）L:比色杯光径（cnj）12结果报告13.1 参考范围的种类：13.1.1 参考范围：1）血清血浆 <220U/L ,尿液 <1000U/L, 24h 尿：0900 U/24h。*建议各实验室建立自己的参考范围。2）年龄性别基准范围：3）设定依据：a-淀粉酶测定试剂盒说明书，北京豪迈生物工程有限公司.YZB/京0293-2009 根据临床试验正常人的结果，经过统计学计算得来。4）影响因素（生理变动）：5）不确定因素：严重乳糜血（乳糜血中的微脂肪颗粒能够导致大量的光反射和散射，严重的可导致整个光路被遮断，从而引起极大的测试误差）；严重溶血（溶血会导致测试血清的透

14、光性差，影响测试。而且导致血球内的成分进入到血清中从而引起较大的测试误差）；13.2 异常结果处理1）复查范围：>8000 U/L超出此范围必须复查，用生理盐水稀释血清重测，结果乘以稀释倍 数。2）危急值：*建议实验室建立自己的危机值。3）异常结果的处理和联系方式：按危急结果处理程序、报告单审核制度进行处理。13.3 报告形式报告样式：AMY * U/L13性能检测1） 线性 10-8000 U/L2）特异性3）精密度 批内CV<5%高值）或CV<10%（低值）茶心医院检验科十件编口乂什淅节:检测项目技术操作标准淀粉酶（-AMY）测定 页码:第5页共5页程序规范文件4）批问相对极差：CV<10%5）准确度检测结果与其他方法基本一致。14影响因素15干扰物质：唾液和皮肤含a -淀粉酶，因此溅入唾液、接触皮肤可影响检测结果。16药物：不详17 注意事项1）用尿液作样本，样本体积减半或稀释一倍。2 ）唾液和皮肤含淀粉酶，勿用嘴吸吸管，勿使皮肤接触试剂。3 ）试剂中含有0.095%1氮钠，请注意防护。18参考文献1 .WS/T124-1999临床化学体外诊断试剂盒质量检验总则.2 . GB/T 26124-2011临床化学体外诊断试剂（