第三章+药物的杂质检查

1、第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查药药物分析物分析一般杂质的检查3药物杂质与限量1杂质检查方法2特殊杂质的检查特殊杂质的检查4一、药物的杂质与纯度一、药物的杂质与纯度1.纯度（纯度（Purities） 药物的纯净程度药物的纯净程度2.杂质杂质 (Impurities) 药物中存在的药物中存在的无治疗作用无治疗作用或或影响影响药物的药物的稳定性稳定性和和疗疗效效，甚至对人体健康甚至对人体健康有害有害的物质。的物质。 简言之简言之: :任何影响药品纯度的物质。任何影响药品纯度的物质。3.3.药物纯度与试剂纯度药物纯度与试剂纯度共同点均规定所含杂质均规定所含杂质的的种类种类和和限量限量. .

2、不同点药物纯度从用药药物纯度从用药安全安全、有效有效和对药物和对药物稳定性稳定性等方面考虑等方面考虑, ,只有合只有合格品和不合格品格品和不合格品. . 试剂纯度是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂试剂纯度是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂的使用范围和使用目的加以规定的使用范围和使用目的加以规定, ,它不考虑杂质对生物体的它不考虑杂质对生物体的生理作生理作用用及及毒副作用毒副作用. .化学试剂一般分为4个等级基准试剂、优级纯或特种试剂(光谱纯、色谱纯、农药残留检测级)、分析纯和化学纯化学试剂不化学试剂不能代替药品！能代替药品！二、杂质的来源二、杂质的来源杂质的来源生产过程

3、储藏过程合成过程中，原料不纯或反应不完全，中间体、合成过程中，原料不纯或反应不完全，中间体、 副产物在精制中未除尽副产物在精制中未除尽制剂过程制剂过程 试剂、溶剂、还原剂残留试剂、溶剂、还原剂残留 异构体、多晶体异构体、多晶体使用的金属器皿、装置、工具引入的金属杂质使用的金属器皿、装置、工具引入的金属杂质在温度、湿度、日光、空气等外界条件影响下，或在温度、湿度、日光、空气等外界条件影响下，或因微生物的作用，引起药物发生水解、氧化、分解、因微生物的作用，引起药物发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化n生产过程中引入杂质例子生产过程中

4、引入杂质例子: 双氯非那胺双氯非那胺ClClClClSO2ClSO2NH2ClClSO2ClSO2ClClClSO2NH2SO2NH2氯磺化ClSO3H胺化NH4OH胺化NH4OH（反应不完全引入邻二氯苯）（分解产生氯化铵）（未洗净引入氯化物） 主要用于治疗各型青光眼（开角型、闭角型及继发性青光眼），尤其适用于对乙酰唑胺有耐药性的患者。 7例：例： 阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得OHCOOH(CH3CO)2O+COOHOCOCH3CH3COOHH2S O47 0 7 5 C+乙酰化不完全乙酰化不完全 水杨酸水杨酸(杂质杂质)+8n贮藏过程中引入的杂质例子贮藏过程中引入的杂

5、质例子麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下, 易氧化易氧化分解为分解为醛醛及有毒的及有毒的过氧化物过氧化物。CH3CH2OCH2CH3 CH3CHO + CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3 （二羟乙基过氧化物二羟乙基过氧化物）药典规定药典规定:起封后起封后24小时内小时内使用使用n生产、贮藏过程中都引入的杂质例子生产、贮藏过程中都引入的杂质例子:n抗甲状腺药卡比马唑抗甲状腺药卡比马唑CHOC2H5ClCH2OC2H5CHOC2H5CH2OC2H5H3CHNNNCH3SHNNCH3SCOOC2H5NNSCOOC2H5CH3胺化CH3NH2，CH3OH环合K

6、SCN缩合ClCOOC2H5,C5H5N重排（甲巯咪唑）按毒性分类杂质的种类毒性杂质和信号杂质按来源分类按理化性质分类工艺杂质、降解杂质、反应物和试剂中混入的杂质有机杂质、无机杂质、残留溶剂一般杂质和特殊杂质自然界分布广泛，在多自然界分布广泛，在多种药物的生产和贮藏过种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质，程中容易引入的杂质，它们含量的高低与生产它们含量的高低与生产工艺水平密切相关。所工艺水平密切相关。所以也常称为信号杂质。以也常称为信号杂质。是指在特定的药物生产和是指在特定的药物生产和贮藏过程中引入的杂质，贮藏过程中引入的杂质，也称有关物质。这类杂质也称有关物质。这类杂质随药物不同则不同。随

7、药物不同则不同。三、杂质的种类三、杂质的种类如重金属、如重金属、砷盐砷盐一般无毒，一般无毒，但其含量的但其含量的多少可反映多少可反映出药物的纯出药物的纯度情况。度情况。四、杂质的限量四、杂质的限量( (Limit Test) )药物中所含杂质的最大允许量。通常用百分之几（%）或百万分之几 (ppm )三种检查方法三种检查方法比较法灵敏度法标准对照法限量检查法限量检查法操作操作: :平行试验平行试验比较两比较两比色管的颜色或浊比色管的颜色或浊度度, ,判断杂质限量是判断杂质限量是否符合规定。否符合规定。管管2（对照管）（对照管）管管1（样品管）（样品管） 取限度量被检杂质的对照溶液取限度量被检杂

8、质的对照溶液,与一与一定量供试品溶液在相同条件下处理定量供试品溶液在相同条件下处理, 比较反比较反应结果应结果, 判断供试液中所含杂质限度是否符判断供试液中所含杂质限度是否符合规定。合规定。对对照照法法供试品量杂质最大允许量杂质限量100(%)供试品量标准溶液的体积标准溶液的浓度100%100SVC(%)L注意单位统一！限量计算公式限量计算公式610SCV)ppm(L 若用若用ppm表示杂质限量则：表示杂质限量则：注意注意: 单位是否统一单位是否统一 供试品是否有稀释供试品是否有稀释 表示方法表示方法%或或ppm 在供试品溶液中加入试剂在供试品溶液中加入试剂, ,在试验在试验条件下反应条件下反

9、应, ,不得出现正反应不得出现正反应. . 灵灵敏敏度度法法比比较较法法 取一定量供试品取一定量供试品,在规定条件下在规定条件下测定待检杂质的参数测定待检杂质的参数, 与规定限量比较与规定限量比较, 判断供试品中杂质限量判断供试品中杂质限量.示例一 茶苯海明中氯化物检查取本品取本品0.30g 置置200 ml量瓶中，加水量瓶中，加水50ml、氨试液、氨试液3ml和和10%硝酸硝酸铵溶液铵溶液6ml，置水浴上加热，置水浴上加热5min，加硝酸银试液，加硝酸银试液25ml，摇匀，再置，摇匀，再置水浴上加热水浴上加热15min，并时时振摇，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，并时时振摇，放冷，加水稀释至刻度

10、，摇匀，放置放置15min，滤过，取续滤液，滤过，取续滤液25ml置置50ml50ml纳氏比色管中，加稀硝酸纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水稀释至，加水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置，摇匀，在暗处放置5min，与标准氯化钠，与标准氯化钠溶液溶液( (10g Cl-/ml)1.5 ml制成的对照液比较，求氯化物的限量制成的对照液比较，求氯化物的限量。C=10 g/mlV=1.5 mlS=?L=CVS100% =10 1.510-60.3025200 100% = 0.04%（标准溶液浓度）（标准溶液体积）（供试品量）示例二 肾上腺素中酮体的检查取本品取本品0.2g, ,置置100ml量瓶中

11、，加盐酸溶液量瓶中，加盐酸溶液(9-2000)溶解并稀释溶解并稀释至刻度，摇匀，在至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度不得超过处测定吸光度不得超过0.05，酮体的，酮体的百分吸收系数为百分吸收系数为435，求酮体的限量，求酮体的限量V样品=100 mlC酮体=?S样品=0.2 gA= bcE1%1cm= bc= 11100= 100 E1%1cm1%： g/ml,b=1cm（）C酮体 =A=A100 E1%1cm=0.05435=1.15 10-6100C样品=0.2100=2.010-3g/mlL=C酮体C样品 100%=1.15 10-610-32.0=0.06%g/ml示例三 对乙酰氨

12、基酚中氯化物的检查n取对乙酰氨基酚取对乙酰氨基酚2.0g，加水，加水100mL加热溶解后冷却，加热溶解后冷却，滤过，取滤液滤过，取滤液25mL，依法检查氯化物，发生的浑浊，依法检查氯化物，发生的浑浊与标准氯化钠溶液与标准氯化钠溶液5.0mL（每（每1mL相当于相当于10 g的的Cl）制成的对照液比较，不得更浓。求氯化物的限量是多制成的对照液比较，不得更浓。求氯化物的限量是多少？少？0.01%1001000000100252510%100(%)SVCL示例四 谷氨酸钠中重金属的检查n 取本品取本品1.0g，加水，加水23mL溶解后，加醋酸盐缓冲溶解后，加醋酸盐缓冲液（液（pH3.5)2mL，依法

13、检查，与标准铅溶液（，依法检查，与标准铅溶液（10 gPb/1mL）所呈颜色比较，不得更深，重金属限）所呈颜色比较，不得更深，重金属限量为百万分之十，求所取标准铅溶液多少量为百万分之十，求所取标准铅溶液多少mL？)(0 . 11000000/1100 . 11000000/10,mLCSLVSVCL习题一 磷酸可待因中吗啡的检查取本品取本品0.10 g, ,加盐酸溶液加盐酸溶液(9-1000)使溶解成使溶解成5ml，加亚硝酸钠试，加亚硝酸钠试液液2ml，放置，放置15min，加氨试液，加氨试液3ml，所显颜色与吗啡试液，所显颜色与吗啡试液 取无取无水吗啡水吗啡2.0mg，加盐酸溶液，加盐酸溶液

14、(9-1000)使溶解成使溶解成100ml 5.0ml用同用同一方法制成的对照液比较，不得更深。问限量是多少？一方法制成的对照液比较，不得更深。问限量是多少？%1 . 0%10010. 00 . 5100102SVCL3习题二 苯巴比妥钠中重金属的检查取本品取本品2.0g, ,加水加水32ml，溶解后缓缓加入，溶解后缓缓加入1mol/L盐酸溶液盐酸溶液8ml，充分振摇，静置数分钟，滤过，取滤液充分振摇，静置数分钟，滤过，取滤液20ml，加酚酞指示液，加酚酞指示液1 1滴滴与氨试液恰显粉红色，加醋酸盐缓冲液与氨试液恰显粉红色，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量成与水适量成25ml，依法检

15、查，含重金属不得超过，依法检查，含重金属不得超过10ppm。试计算应取得标。试计算应取得标准铅溶液准铅溶液( (每每1ml相当于相当于10g Pb) )的体积。的体积。ml0 . 11010101040202CLSV66 一、杂质的研究规范一、杂质的研究规范（一）有机杂质在质量标准中的项目名称（一）有机杂质在质量标准中的项目名称 1.1.以杂质的名称作为项目名称以杂质的名称作为项目名称25 中国药典（中国药典（2010）收载硝苯地平有关物质）收载硝苯地平有关物质中杂质中杂质、杂质、杂质262.以某类杂质的总称作为项目名称以某类杂质的总称作为项目名称杂质结构不明确，如硝酸毛果芸香碱中的杂质结构不

16、明确，如硝酸毛果芸香碱中的“其他生物碱其他生物碱”3.以检测方法作为项目名称以检测方法作为项目名称杂质结构未知，也没有具体类别；如杂质吸光度、杂质结构未知，也没有具体类别；如杂质吸光度、溶液透光率溶液透光率27(二）杂质检查项目的确定二）杂质检查项目的确定 由质量研究和稳定性研究中检出的，并在由质量研究和稳定性研究中检出的，并在批量生产中出现的杂质和降解产物。批量生产中出现的杂质和降解产物。 根据其起始原料、生产工艺及稳定性情况根据其起始原料、生产工艺及稳定性情况确定。确定。 28（三）杂质限度的确定293031二、杂质的常用检查法二、杂质的常用检查法（二）色谱方法（二）色谱方法（一）化学方法

17、（一）化学方法（三）光谱方法（三）光谱方法（四）其他方法（四）其他方法ClOHCONO2NHCl杂质：5-氯水杨酸杂质：2-氯-4-硝基苯胺药物：氯硝柳胺ClOHOHOClOOOFe/3+FeCl3紫色配合物杂质：5-氯水杨酸1.1.显色反应：显色反应：杂质与一定试剂反应产生颜色杂质与一定试剂反应产生颜色生产原料杀鳗剂、灭螺剂杀鳗剂、灭螺剂 O2NNH2ClO2NN2ClClO2NNClNNHCH2CH2NH2+NaNO2+2HCl+NaCl2H2ONHCH2CH2NH2+杂质：2-氯-4-硝基苯胺重氮化-偶合反应芳伯氨基2.2.沉淀反应：沉淀反应：杂质与一定试剂反应产生沉淀杂质与一定试剂反应

18、产生沉淀 n盐酸肼屈嗪中游离肼的检查盐酸肼屈嗪中游离肼的检查: :生成沉淀生成沉淀H2NNH2+CHOOHHCOHNNH2+ H2O杂质：游离肼NNNHNH2HClCHOCNH2NNH2H2OHCl盐酸肼屈嗪治疗高血压、心力衰竭。治疗高血压、心力衰竭。 水杨醛腙3. 3. 生成气体或者滴定法生成气体或者滴定法n生成气体生成气体:NH:NH3 3n滴定法滴定法: :如硫酸亚铁中的如硫酸亚铁中的高铁盐高铁盐检查检查2Fe3+2KI2Fe2+I22K+I22Na2S2O32NaINa2S4O6碘的显色碘的显色36 1.1.薄层色谱法薄层色谱法(TLC)(TLC) 2. 2.高效液相色谱法高效液相色谱

19、法(HPLC)(HPLC) 3. 3.气相色谱法气相色谱法(GC)(GC)色谱法色谱法是杂质检查的首选方法是杂质检查的首选方法37 根据药物与杂质对吸附剂的吸附或对展根据药物与杂质对吸附剂的吸附或对展开剂的解析能力不同开剂的解析能力不同(R(Rf f值的差异值的差异), ), 加以分加以分离和检查。离和检查。1.1.薄层色谱法薄层色谱法(TLC)(TLC)38我国药典我国药典20052005年版增加了年版增加了TLCTLC系统适用性试验。系统适用性试验。1.1.检测灵敏度：对照品溶液稀释若干倍，应显检测灵敏度：对照品溶液稀释若干倍，应显示清晰的斑点。示清晰的斑点。2.2.比移值：供试品主斑点与

20、对照品溶液主斑点。比移值：供试品主斑点与对照品溶液主斑点。3.3.分离效能分离效能39薄层色谱法应用薄层色谱法应用(1)杂质对照法杂质对照法:取供试品溶液和一定浓度杂质对照品溶取供试品溶液和一定浓度杂质对照品溶液，分别点样于同一薄层板上展开，进行斑点定位。液，分别点样于同一薄层板上展开，进行斑点定位。将杂质斑点进行对应比较判断。将杂质斑点进行对应比较判断。(2)供试品溶液自身稀释法供试品溶液自身稀释法:将一定浓度供试品溶液进行将一定浓度供试品溶液进行稀释并作为对照溶液，然后与供试品溶液在同一板上稀释并作为对照溶液，然后与供试品溶液在同一板上展开比较。展开比较。(3)杂质对照品与供试品溶液自身稀

21、释对照并用法杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法。(4)对照药物法对照药物法:采用与供试品相同药物作为对照，比较采用与供试品相同药物作为对照，比较斑点、颜色。并进行对比控制。斑点、颜色。并进行对比控制。40 根据供试品与杂质的对照品保留时间根据供试品与杂质的对照品保留时间相同测定各杂质峰面积相同测定各杂质峰面积. .2.2.高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)(HPLC)411.1.外标法外标法（有对照品杂质）（有对照品杂质）2.2.加校正因子的主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法3.3.不加校正因子的主成分自身对照法不加校正因子的主成分自身对照法（无杂（无杂质对照品）质对照品

22、）4.4.峰面积归一化法峰面积归一化法（粗略测量杂质的含量）（粗略测量杂质的含量）423.3.气相色谱法气相色谱法(GC)(GC)检查方法检查方法: :同高效液相色谱法同高效液相色谱法. .用于药物中挥发性杂质的检查用于药物中挥发性杂质的检查, , 如如药物中残留溶剂、农药残留量等药物中残留溶剂、农药残留量等. .标准溶液加入法（标准溶液加入法（P110P110）434.4.毛细管电泳法毛细管电泳法检查方法检查方法: :同高效液相色谱法同高效液相色谱法. .用于酶类药物中酶类杂质的检查。用于酶类药物中酶类杂质的检查。44 1. 1.可见可见- -紫外分光光度法紫外分光光度法 2.2.红外分光光

23、度法红外分光光度法 3.3.原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法45紫外分光光度法紫外分光光度法利用药物和待检杂质对光选择吸收性质利用药物和待检杂质对光选择吸收性质的差异进行的差异进行. .46 例：肾上腺素中肾上腺酮的检查例：肾上腺素中肾上腺酮的检查 310nmA2.0mg/mlHCl 0.05mol/L测的溶液溶液样品规定：规定：A A310nm310nm0.050.0547红外分光光度法红外分光光度法 主要用于药物中无效或低效晶型的检查。某些多晶型药物由于其晶型结构不同，一些化学键的键长、键角等发生不同程度的变化，从而导致红外吸收光谱中某些特征峰的频率、峰形和强度出现显著差异。48 在程

24、序控制温度的情况下在程序控制温度的情况下, ,测定物质的物测定物质的物理、化学变化与温度关系的一类仪器分析方理、化学变化与温度关系的一类仪器分析方法法. . 1.1 1.1 热重分析法热重分析法 1.2 1.2 差示热分析法差示热分析法 1.3 1.3 差示扫描量热法差示扫描量热法1.热分析法热分析法1.1.热重分析法热重分析法 ( (TGA) )T TW W供试品TGA热重曲线WT TW WW结晶水失重台阶 应用热天平在程序控温的条件下测量物质的质应用热天平在程序控温的条件下测量物质的质量随温度变化的热分析技术量随温度变化的热分析技术, ,可计算出样品在相应可计算出样品在相应温度范围内减失质

25、量的百分率。温度范围内减失质量的百分率。 特 点分析样品用量少, 适用于贵重药材或在空气中容易氧化药物干燥失重测定.灵敏度高,可达1 g以下 测定速度快 可用于判断结晶水或吸附水,并推断结晶水含量。2.2.差热分析法差热分析法 ( (DTA) )在程序控制温度下，在程序控制温度下，测量供试品和惰性测量供试品和惰性参比物参比物( (常用石英常用石英砂、煅制砂、煅制MgO)MgO)之间之间的的温度差温度差与与温度温度( (或时间或时间) ) 关系的关系的热分析技术热分析技术T TT供试品发生吸热反应温度低于参比物质从而产生吸热峰参比物质参比物质供试品发生放热反应温度高于参比物质从而产生放热峰DTA

26、用途用途(1) 熔点测定熔点测定熔程熔程T T=0(2) 定性和纯度检定定性和纯度检定根据峰的数目、形状、位置对根据峰的数目、形状、位置对供试品进行纯度判别供试品进行纯度判别T供试品对照品G1G2G310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T()草酸钙(CaC2O4H2O)的热重曲线在温度在温度T1时时 CaC2O4H2O CaC2O4+H2O在温度在温度T2时时 CaC2O4 CaCO3+CO在温度在温度T3时时 CaCO3 CaO+CO2三个失重峰，相应产生两个吸热峰和一个放热峰。三个失重峰，相应产生两个吸热峰和一个放热峰。3.3.差示扫描量热法

27、差示扫描量热法 ( (DSC) ) 测量保持供试品和惰性参比物的温度相同, 系统所需输给供试品或参比物的能量差随温度(或时间)变化的热分析技术.样品样品参比参比加热炉至信号放大器加热器导线炉温控制器 用于待测物质的用于待测物质的鉴别鉴别、晶型鉴别晶型鉴别、纯度纯度检查检查以及以及熔点熔点和和水分水分等的测定，更适合于测等的测定，更适合于测量物质在物理变化或化学变化中量物质在物理变化或化学变化中焓焓的变化。的变化。应用热分析法检查药物纯度的条件样品纯度在98.0%以上杂质不与主成分反应杂质不与主成分形成共晶或固熔体杂质与熔融试样有化学相似性药物在熔融过程中化学性质稳定药物如存在多晶现象则必须全部

28、转变成某一晶型58药品检验操作标准药品检验操作标准规定规定1. 1. 遵循遵循平行操作平行操作原则原则（1 1）仪器的配对性）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过超过2mm2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致（2 2）对照品与供试品的同步操作）对照品与供试品的同步操作2. 2. 正确的取样及供试品的正确的取样及供试品的称量范围称量范围 1g1g不超过不超过2%2%，1g1g不不超过超过1% 1% 3. 3. 正确的正确的比色比色、比浊比浊方法方法 4. 4. 检查结果检查结果不符合规定不符合规定

29、或在或在限度边缘限度边缘时应对供试管和对照管各时应对供试管和对照管各复查复查二份二份 591. 1. 原理原理 利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应, , 生成氯化银白色浑浊液生成氯化银白色浑浊液, , 与一定量与一定量标准氯化钠溶液标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较, , 判定供判定供试品中氯化物是否符合限量规定。试品中氯化物是否符合限量规定。一、氯化物检查法一、氯化物检查法白色浑浊药物：AgClAgNOCl3HNO3白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl3HNO3Vc供试品稀稀HNO310ml

30、H2OAgNO31ml标准溶液稀稀HNO310mlH2OAgNO31ml 暗处放置5min(避免AgCl分解)条件：硝酸酸性条件（稀硝酸条件：硝酸酸性条件（稀硝酸10ml10ml）反应试剂：硝酸银试液反应试剂：硝酸银试液 1.0ml1.0ml杂质对照：杂质对照：NaCl (10 NaCl (10 g/ml)g/ml)灵敏度范围：灵敏度范围： 50-80 50-80 g/50ml g/50ml 可避免弱酸银盐，如碳酸可避免弱酸银盐，如碳酸银、磷酸银及氧化银沉淀银、磷酸银及氧化银沉淀的干扰，且可加速氯化银的干扰，且可加速氯化银沉淀的生成并产生较好的沉淀的生成并产生较好的乳浊乳浊。讨论：选择稀硝酸反

31、应条件的意义。讨论：选择稀硝酸反应条件的意义。比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。平行操作原则。3. 若供试品有色，需经处理后方可检查。 注注 意：意：干扰及排除 （1）外消色法（2）内消色法：倍量法供试品有色处理方法供试品有色处理方法 供试品溶液如带颜色，可按中国药典附录所规定的方法处理。即取两份供试品溶液，于其中一份中先加入硝酸银试液，摇匀，放置10min，如显浑浊，可反复滤过，至滤液澄清，即得无氯化物杂质又具有相同颜色的澄清溶液，再在其中加入规定量的标准氯化钠溶液与水适量使成50ml，作为对照溶液；另一份中加入硝酸银试液与水适量使成50ml，作为供试溶液，将两液在暗处放置5min后

32、比较，即可消除颜色的干扰。此法又称为内消色法。 外消色法：加入一定的有色物，如稀焦糖等，或经处理降低色度，不干扰测定。如高锰酸钾中氯化物的检测，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。65 依法检查挥去2I2O4322ClIPOH,OHClI依法检查挥散（除)Br2O3222 ClBrHNO,OHClBr碘化物、溴化物中氯化物的检查碘化物、溴化物中氯化物的检查 66 a a 溶于水的有机药物溶于水的有机药物直接检查直接检查. . c c 溶于稀乙醇或丙酮的有机药物溶于稀乙醇或丙酮的有机药物 用该溶剂溶解后依法检查用该溶剂溶解后依法检查. .例：三氯叔丁醇例：三氯叔丁醇CClCCl3 3C(C

33、HC(CH3 3 ) ) 2 2 OH OH 取滤液依法检查过滤水，水药物除去不溶物使所含氯化物溶解or b b 不溶于水的有机药物不溶于水的有机药物d d 杂质中卤素原子连接于苯环上杂质中卤素原子连接于苯环上 先进行有机破坏先进行有机破坏, ,使分解后再检查使分解后再检查. .后依法检查无机适当的有机破坏方法药物机氯转变为将有机分子破坏，使有Cl 有机药物中氯化物的检查有机药物中氯化物的检查二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法)(BaSOBaClSO4HCl224白色 2ml40mLd.HCl25%BaCl25mlH2O50mlH2O 样样品品标准溶液标准溶液浓度范围浓度范围 0.1mg0.5m

34、gSO42-/50ml硫酸钾溶液硫酸钾溶液0.1mg/ml681. 反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50mL供试溶液中含稀盐酸2mL为宜。 (盐酸酸性条件防止BaCO3，BaPO4沉淀生成，pH约=1)2. 供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀。 3. 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。4. 供试液带色应先处理。测定条件测定条件三、铁盐检查法三、铁盐检查法1.硫氰酸铁法 (Ch.P 和USP采用) 36HCl3SCNFeSCN6Fe红色 原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配离子,与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色进行比较。供试

35、品显色，立即与同法制成的对照溶液比较加水溶解25ml稀HCl 4ml过硫酸铵 50mg加水稀释35ml30%硫氰酸铵溶液3ml加水定容既可氧化供试品Fe2+变成Fe3+,同时可防止由于光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。最佳比色浓度最佳比色浓度a. 仪器分析线性范围仪器分析线性范围5 90 g Fe3+ /50mlb. 目视比色浓度范围目视比色浓度范围1050 g Fe3+ /50ml2.巯基醋酸法 (BP采用)OH2COOSCHFeCOOHSCHFeHCOOHSCHFeCOOHHSCH2FeH2COOHSCHFe2

36、COOHHSCH2Fe22222OH222222222223红色红色药物：巯基醋酸巯基醋酸枸橼酸OHNH22%20FeFe2332Feml枸橼酸的作用：使枸橼酸与铁离子形成配位离子，以免枸橼酸的作用：使枸橼酸与铁离子形成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉淀。在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉淀。巯基醋酸：还原剂巯基醋酸：还原剂本法灵敏度较高，但试剂较贵本法灵敏度较高，但试剂较贵 74 重金属重金属是指在实验条件下能与硫代乙是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色的金属，重金属存酰胺或硫化钠作用呈色的金属，重金属存在影响药物的稳定性及安全性在影响药物的稳定性及安全性. . 铅易在体内积蓄

37、中毒铅易在体内积蓄中毒, ,以以PbPb为代表为代表. . 四、重金属检查法四、重金属检查法第一法第四法重金属含量低的药物(25g)第三法使用范围微孔滤膜法硫化钠法溶于碱性水溶液而难于溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物方法硫代乙酰胺法溶于水、稀酸、乙醇的药物炽灼后的硫代乙酰胺法含芳环、杂环以及难溶于水、稀酸、乙醇的药物第二法重金属检查法重金属检查法1. 1.第一法第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法SHCONHCH5 . 3pHOHCSNHCH223223 H2PbSHSHPb22黄色至棕黑色混悬液 硫代乙酰胺在弱酸性 (pH3.5 醋酸盐缓冲液)条件下水解,产生H2S,与微量重金属离子(以Pb2+

38、为代表)生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液, 与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较, 不得更深。77操作方法操作方法比色放置硫代乙酰胺水22ml TS25ml2ml )buff(pH3.5水、醋酸盐样品样品管同上标准液（一定量） 对照管78 标准铅溶液浓度？标准铅溶液浓度？ 硫代乙酰胺试液？硫代乙酰胺试液？ 溶液的溶液的pH？ 供试品溶液有颜色时的处理？供试品溶液有颜色时的处理？ 干扰物的排除方法？干扰物的排除方法？讨论：讨论：79 标准铅溶液浓度标准铅溶液浓度适宜目视比色的浓度范围适宜目视比色的浓度范围 Pb2+标准溶液标准溶液10 g/ml 12ml80 硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 H

39、 H2 2S S试液：恶臭和毒性试液：恶臭和毒性；不稳定；不稳定；易被空气氧化而析出硫；浓度难以控制易被空气氧化而析出硫；浓度难以控制. . 改用硫代乙酰胺为显色剂，硫代改用硫代乙酰胺为显色剂，硫代乙酰胺在实验条件下水解产生乙酰胺在实验条件下水解产生H H2 2S,S,与与重金属离子反应重金属离子反应. .81pHpH在在3.0-3.53.0-3.5时时, , 呈色较完全呈色较完全. .酸度增大酸度增大, , 呈色变浅甚至不呈色呈色变浅甚至不呈色. . 溶液的溶液的pHpH对于金属离子与硫化氢对于金属离子与硫化氢呈色影响较大呈色影响较大. . 溶液的溶液的pHpH82 供试品溶液有颜色时的处理

40、供试品溶液有颜色时的处理a.外消色法外消色法 b.内消色法内消色法稀焦糖溶液调节稀焦糖溶液调节指示剂调节指示剂调节 与氯化物检查时的处理方法类似与氯化物检查时的处理方法类似83 干扰物的排除方法干扰物的排除方法干扰：干扰：弱酸性溶液中弱酸性溶液中FeFe3+3+氧化氧化H H2 2S S析出析出S S, ,产产生混浊影响检查。生混浊影响检查。a.a.供试品中微量高价供试品中微量高价FeFe3+3+存在存在如：如：葡萄糖酸亚铁中重金属的检查葡萄糖酸亚铁中重金属的检查. .排除：排除：加入加入抗坏血酸抗坏血酸或或盐酸羟胺盐酸羟胺使使FeFe3+3+还原为还原为FeFe2+2+。84b.b.药物本身

41、能生成不溶性硫化物药物本身能生成不溶性硫化物加入掩蔽剂消除干扰加入掩蔽剂消除干扰加掩蔽剂加掩蔽剂KCN,KCN,使使锑锑、锌锌形成稳定的形成稳定的配配合物合物后后, , 用第三法检查用第三法检查. .如：葡萄酸锑钠中重金属的检查如：葡萄酸锑钠中重金属的检查1.1.原理原理 供试品先炽灼破坏后供试品先炽灼破坏后, ,使有机结合的重金属使有机结合的重金属游离游离, , 再按再按第一法第一法检查检查. .2.2.第二法第二法 炽灼后的炽灼后的硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法86 2. 2. 操作操作 缓缓炽灼缓缓炽灼 放冷放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供试品供试品 炭化炭化 加热加热 HNO3 500

42、-600H2SO4 除尽除尽 放冷放冷 完全灰化完全灰化 蒸干蒸干HCl 2ml 水水15ml 中性中性 按第一法检查按第一法检查 蒸干蒸干 氨试液氨试液a. HNO3处理后，必须蒸干除尽NO.b. 炽灼温度严格控制：炽灼温度严格控制：500-600注意：注意：做空白试验做空白试验3.3.第三法第三法 硫化钠法硫化钠法PbSSNaPbNaOH22原理：在碱性介质中,以Na2S为显色剂, 使Pb2+与S2-作用生成PbS 的混悬液, 与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较, 不得更深。88 适用于难溶于稀酸但能溶解于碱性溶液的药物中重金属的检查。 如：磺胺类与巴比妥类药物。注意： Na2S 对

43、玻璃有腐蚀性,久置产生絮状物,应临用新配。4.4.第四法第四法 微孔滤膜法微孔滤膜法 当重金属含量低(2-5g) 时, 在比色管中难于目视观察,采用本法。原理原理：同第一法 使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上(铅斑)提高检查的灵敏度。 90 2.白田道夫法白田道夫法 1.古蔡氏法古蔡氏法 3.Ag-DDC法法 4.次磷酸法次磷酸法五、砷盐检查法五、砷盐检查法 ( (一一) )古蔡氏法古蔡氏法 ( (Gutzeit) ) OH3Zn3AsHH9Zn3AsO22333323AsHZn3H3Zn3As棕色（量大）323As(HgBr)3HBr3HgBrAsH黄色（量少）223)HgBr(AsHHB

44、r2HgBr2AsH32333)(HgAsHBrAsHHgBrAs黄色棕色黑色溴化汞试纸溴化汞试纸1. 1. 原原 理理新生态氢H 2ZnH2Zn2233HH 2 AsHAs进而促进进而促进AsH3不断不断生成生成 古古蔡蔡氏氏法法检检砷砷器器8cm有孔玻有孔玻璃旋塞璃旋塞导气管导气管AsH3发生瓶发生瓶溴化汞试纸醋酸铅棉花(60mg)HCl Zn 粒碘化钾试液酸性氯化亚锡试液生成砷斑吸收硫化氢气体a. KI的作用的作用还原剂：还原剂：As5+As3+b. 酸性酸性SnCl2的作用的作用 还原剂还原剂( (表现在表现在3 3方面方面) ). . 将五价砷还原为三价砷将五价砷还原为三价砷(As(

45、As5+5+AsAs3+3+) )OHSnAsOH2SnAsO243323494SnIISn4222. . 将将KIKI被氧化生成的被氧化生成的I I2 2再还原为再还原为I I- -. SnCl. SnCl2 2与与ZnZn粒表面形成粒表面形成Zn-SnZn-Sn齐齐 起去极化作用起去极化作用, ,使氢气均匀而连使氢气均匀而连续地发生续地发生. .H2阻碍酸与锌粒反应阻碍酸与锌粒反应SnCl295c. PbAc2棉花的作用棉花的作用 排除硫化物的干扰排除硫化物的干扰(1mgS(1mgS2- 2- ) ) （黑色，干扰）HgSHgBrSHHS2222果留在棉花上，不干扰结 2HAcPbSSHP

46、bAc22注意事项 砷斑不稳定，应干燥、避光、砷斑不稳定，应干燥、避光、立即比较立即比较。 有机结合态的砷应有机结合态的砷应破坏破坏后检查（加酸或碱），但温度应低于后检查（加酸或碱），但温度应低于600600 C C。 供试品若为铁盐，能消耗碘化钾和氯化亚锡，可加供试品若为铁盐，能消耗碘化钾和氯化亚锡，可加酸性氯化酸性氯化亚锡亚锡，使高铁离子还原后检查。，使高铁离子还原后检查。供试品（硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐）若在酸性条件下生供试品（硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐）若在酸性条件下生成硫化氢或二氧化硫，与溴化汞试纸作用生成黑色硫化汞和金成硫化氢或二氧化硫，与溴化汞试纸作用生成黑色硫化汞和金属汞

47、，可先用硝酸处理，使其氧化为硫酸盐。属汞，可先用硝酸处理，使其氧化为硫酸盐。锑盐锑盐含量较多时，可改用含量较多时，可改用白田道夫白田道夫（Bettendorff）法检查砷）法检查砷( (二二) ) 白田道夫法白田道夫法 对含锑药物中砷盐的检查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法。2As3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As + 3SnCl4 + 6H+棕褐色 原理：原理： SnCl2在HCl中能将砷盐还原为棕褐色的胶态砷, 与一定量的标准砷溶液按同法处理后进行比较, 判断供试品中砷盐的限量。特点：特点：优点：优点：不受不受SbSb干扰干扰缺点：缺点：灵敏度低灵敏度低 2020 gAsgAs2

48、2O O3 3/10ml/10ml 加入少量加入少量HgClHgCl2 2, ,灵敏度提高至灵敏度提高至2 2 gAsgAs2 2O O3 3（1.5 1.5 gAsgAs）/10ml./10ml.99 ( (三三) ) 二乙基二硫代氨基甲酸银法二乙基二硫代氨基甲酸银法 (Ag-DDC(Ag-DDC法法) USP) USP silver diethyldithiocarbamateAgSSCNC2H5C2H5 本法不仅用于砷盐的限量检查, 而且可用作微量砷盐的含量测定。100原原 理理 第一步第一步：同：同古蔡氏法古蔡氏法生成砷生成砷化氢；化氢； 第二步第二步：砷化氢还原砷化氢还原Ag-DDC

49、Ag-DDC溶液溶液, ,产生产生红色红色的的胶态银。胶态银。 目视比色法目视比色法 仪器分析仪器分析 510nm510nm处测吸处测吸收度。收度。101AsH3+6Ag(DDC)As(DDC)3+6Ag(红色)+3HDDC3332AsHAsOHHClZn用有机碱吸收反应产生的用有机碱吸收反应产生的HDDCHDDC有利于反应的进行有利于反应的进行。USPUSP用吡啶，灵敏但试剂恶臭。用吡啶，灵敏但试剂恶臭。ChPChP用三乙胺，灵敏度低。用三乙胺，灵敏度低。本法适用于含本法适用于含SbSb量小于量小于500g500g的供试品。的供试品。102Ag-DDC法的特点法的特点 a 灵敏度高灵敏度高

50、0.5 gAs/30ml b 可仪器测定，还可定量。可仪器测定，还可定量。 c Sb干扰小（干扰小（ 500g ）103( (四四) ) 次磷酸法次磷酸法 BPBP 原理原理 在盐酸酸性溶液中在盐酸酸性溶液中, , 次磷酸还原砷次磷酸还原砷盐为棕色的游离砷盐为棕色的游离砷, ,与标准砷溶液同法处理后与标准砷溶液同法处理后比较颜色。比较颜色。 NaH NaH2 2POPO2 2+HCl+HClHH3 3POPO2 2+NaCl+NaCl 3H 3H3 3POPO2 2+H+H3 3AsOAsO3 33H3H3 3POPO3 3+2+2AsAs棕色棕色104特点特点不受不受S S2-2-,SO,S

51、O3 32-2-,Sb,Sb干扰干扰灵敏度较灵敏度较古蔡氏法古蔡氏法低低六、干燥失重六、干燥失重干燥失重：药品在规定的条件下，经干燥后所减失的量。 用于检查药物中的水分及其他挥发性物质。恒重：供试品连续两次干燥或炽灼后称重的差异在0.3mg以下。（干燥至恒重的第二次及以后每次称重都应在规定的条件下继续干燥1h后进行）温度105C105C热分析法热分析法适用范围分类受热分解或易升华受热分解或易升华的供试品的供试品干燥剂干燥法干燥剂干燥法60C60C常温常温减压干燥法与恒减压干燥法与恒温减压干燥法温减压干燥法常压恒温干燥法常压恒温干燥法受热稳定的药物受热稳定的药物熔点低或受热分解熔点低或受热分解的供试品的供试品七、水分测定法七、水分测定法3222SOHI2OHSOI%100WA(%)FB?A供