萱草_Hemerocallishybrida_再生植株过程中根的诱导

1、 第41卷第1期2002年2月复旦学报(自然科学版Journal of Fudan University (Natural Science Vol. 41No. 1Feb. 2002文章编号:042727104(2002 0120089203萱草(Hemerocallis hybrida 再生植株过程中根的诱导王晓娟1, 金1, 沈延松2, 蒋如敏1, 陈家宽1(1. 复旦大学生命科学学院生物多样性与生态工程教育部重点实验室, 上海200433;2. 上海四季花木生态、科技发展有限公司, 上海200051摘要:利用1/2MS 培养基作为基本培养基, 附加不同浓度的NAA 作为外源激素, 分别对

2、萱草愈伤组织块和无根再生苗进行根的发生诱导试验, 结果愈伤组织上均不易生根; 而无根再生苗根的诱导效果较好, 特别是在含有0. 075mg/L NAA 的培养基上, 生根数量和生根率均最佳. 为工厂化生产提供了相关的技术资料. 关键词:萱草; 愈伤组织; 组织培养; 根中图分类号:Q 813. 1文献标识码:A萱草(Hemerocallis hybri da 是一种重要的花境植物, . . 45株, . , 是一项目前被广泛应用. , 仅见有少量简短的报道13, 而未见到有关观赏型萱. 本研究拟从萱草快繁生产商品化优良种苗的目的出发, 在已成功地获得了愈伤组织的基础上, 研究在大规模组织培养情

3、况下, 萱草无根再生苗根的发生诱导, 获取相关的技术参数, 为大规模组织培养提供技术参数.1材料与方法供试材料:本研究选用从荷兰引进的优良萱草品种(Hemerocallis hy 2bri da Stella D Oro 通过组织培养成功获得的愈伤组织块和无根再生苗作为材料.培养基的设置:根据前人的经验15,1/2MS 基本培养基是诱导生根的优良培养基, 附加适量的生长素将促进生根的速度和增加根的数量6,7. 因而本试验选用1/2MS 培养基作为基本培养基, 分别附加0, 0. 025,0. 05,0. 075,0. 1mg/L 的NAA 共5个浓度梯度进行较细致对比研图1萱草愈伤组织块、无根

4、再生苗和生根苗究. 采用125mL 的三角瓶分装, 每瓶50mL 培养基, 每瓶内分别接种4棵Fig. 1Callus , re 2grown shoot无根再生苗和愈伤组织块(图1 . without root and shoot with re 2培养条件:接种后置于组织培养室内22恒温培养, 每天光照10h , grown root of 光照强度为25. 125. 3mol m -2. s -1Hemerocallis hybrida收稿日期:2001205217基金项目:上海市科技兴农重点攻关项目(20005212, 女, 博士后; 通讯联系人陈家宽教授. 作者简介:王晓娟(1972

5、 90复旦学报(自然科学版 第41卷2结果与讨论2. 1萱草愈伤组织生根试验中根发生的情况本研究结果发现, 愈伤组织块在5种生根培养基中均不生根; 无根再生苗上如形成愈伤组织, 也不易生根; 只有不发生愈伤组织的无根再生苗较易生根, 表明本试验萱草组织培养过程中再生植株的生根情况可能受再生苗中积累的内含激素有关. 根的发生主要集中在再生苗的根基部, 大部分根发自切口处, 新生根一般白色或浅黄色, 根长23cm (图1 , 沿三角瓶作平行生长. 2. 2萱草无根再生苗诱导生根试验中生长素浓度的调控无根再生苗在经过18d 的培养后, 生根率达到80. 9%96. 3%.作为外源生长素添加的较低浓度

6、的NAA , 对萱草无根再生苗的生根效果具有显著的促进作用, 但在不同的浓度下效果有所差异. 由表1结果可知, 以1/2MS +0. 075mg/L NAA 培养基上诱导生根率效果最好:从接种后的第8天以后, 生根率以大约每2天20%的速度递增, 到第16天时达到平台区, 到第18天可达到96. 3%的生根率, 因而易于批量化生产. 建议在工业化生产中收获培养到1618d 的再生苗进入下一步的移栽.表1不同NAA 质量浓度下生根诱导率的试验结果Tab. 1Results of the root inductivity in different concentration of NAA%t /d

7、00250. 72. 22. 211. 011. 025. 746. 361. 880. 99. 411. 522. 348. 971. 286. 387. 810. 013. 340. 057. 876. 784. 495. 64. 46. 67. 427. 259. 675. 792. 696. 31. 46. 89. 634. 264. 482. 283. 695. 90750. 16810121416182. 3萱草无根再生苗诱导生根试验中根的数量变化由表2可知, 不同的培养基上萱草无根再生苗的发根率不同, 而且每一无根再生苗上的生根数量也存在着显著差异. 从实验结果看, 在第18天的

8、发根植株中, 以1/2MS +0. 075mg/L NAA 诱导生根的效果最好, 生根数5株-1的植株达到58. 0%, 说明萱草无根再生苗根的诱导以1/2MS +0. 075mg/L NAA 为最佳的配方. 一般而言, 生根数量越高的植株其苗的素质好, 移栽成活率也高. 至于萱草再生植株中以每株几条根为好, 我们将在移栽实验中作进一步的研究. 2. 4萱草商品化快繁过程中相关参数的确定陈宗礼等8的研究认为, 采用组织培养技术进行商品化快繁, 其商品苗总产量与再生小苗诱导生根之间存在重要联系:(1 再生植株诱导生根的周期; (2 再生植株诱导生根率; (3 有效生根苗在总生根苗中所占比率; (

9、4 一年内再生植株诱导生根苗的代数. 由我们的实验结果可确定萱草采用体外培养技术进行商品化生产中部分技术参数范围如下:(1 萱草再生植株诱导生根的周期为1618d ; (2 萱草再生植株的诱导生根率达90%以上; (3 生根数以平均3株-1等条件为有效生根苗, 则萱草的有效生根苗占总生根苗的80%左右. (4 一年内无根再生苗诱导生根的代数大约为2022代/年(1618d/代 , 这是萱草在本培养条件下的最低繁殖代数. 以上参数表明, 在本条件下萱草的生根试验完全符合工厂化生产的要求. 第1期王晓娟等:萱草(Hemerocallis hybrida 再生植株过程中根的诱导表2不同NAA 质量浓

10、度下生根株数和生根数量的变化Tab. 2Number of the induced shoots and roots in different concentration of NAA培养基每株生根数2121/2MS344638132108431218106114231812641311213322723024103181831181511167212211156110562118178524149610781111342024111021171471817183410118724162526187826212120322315216132058691110251822302315202119

11、1925381322207191511766712639731369013913691不同天数的生根株数总诱导株数/%N 1820. 027. 320. 913. 618. 217. 215. 615. 620. 531. 115. 125. 623. 38. 127. 957. 611. 58. 458. 08. 610. 017. 18. 655. 7511/2MS +0. 025mg/L NAA234511/2MS +0. 05mg/L NAA234511/2MS +0. 075511/2MS +0. 1mg/L NAA2345表示第18天各种生根数不同的株数占第18天生根的总株数的比例

12、. N 18参考文献:1黄济明. 几种花卉的组织培养J.植物生理学通讯, 1983, (3 :44248.2倪新, 马毓. 多倍体萱草的组织培养及其繁殖J.园艺学报, 1984, 11(3 :2022205. 3杨乃博. 杂种大花萱草的试管繁殖J.植物生理学通讯, 1985, (5 :39.4黄纯真. 应用组织培养方法获得四种花木试管植物的初步试验J.植物生理学通讯, 1980, (6 :37240. 5卢天玲, 黄寿先. 黄花菜组织培养简报J.植物生理学通讯, 1981, (6 :49250.6陈小兰, 胡琼华, 王红霞. 金百合的离体快速繁殖J.植物生理学通讯,2000, 36(4 :33

13、4.7王红霞, 胡琼华, 陈小兰. 通江百合的离体快速繁殖J.植物生理学通讯, 2000, 36(2 :132.8陈宗礼, 刘建玲, 延志莲, 等. 植物快繁中有效快繁速度与商品苗总产量的计算与控制J.西北植物学报, 1999, 19(3 :4222427.(下转第96页 96复旦学报(自然科学版 第41卷G enetic Mode of N asal ShapesCHE N Li , LI Hui , XI A Y uan 2min , J I N Li , LU Da 2ru(Modern Center f or A nthropologic , School of L if e Scie

14、nces , Fudan U niversity , S hanghai , China , 200433Abstract :Among all human characteristics , facial features were found to be one of the most genetic 2related features. Nasal shapes are classified in pedigrees and random populations. It is found that 4characters (nasal root height , hard nasal b

15、ridge shape , soft nasal bridge shape , nasal tip trend are all monogene controlled. Partial correlation analysis and principle component analysis show that there is correlation among these 4characters.K eyw ords:nasal shapes ; genetic mode ; gene frequencies ; pedigree analysis ; Jinhui , Shanghai

16、; partial correlation analysis ; principle component analysis(上接第91页hybridaWANG X iao 2juan 1, J I N Liang 1, SHE N Y an 2song 2, J I ANG Ru 2min 1, CHE N Jia 2kuan 1(1. Minist ry of Education Key L aboratory f or Biodiversity Science and Ecological Engineering , School of L if e Sciences , Fudan U

17、niversity , S hanghai 200433, China ; 2. S hanghai Four Seasons Horticultural&Environmental Technology Co. , L td. S hanghai 200051, China Abstract :1/2MS culture media containing different concentration of NAA were used to regenerate roots from Hemerocallis hybrida calli and re 2grown shoots without roots. The results showed that no roots were regenerated fromcalli while a large number of roots were induced from re 2grown shoots