微球蛋白均相免疫发光检测试剂盒作品申报书

1、微球蛋白均相免疫发光检测试剂盒作品申报书1 丁作品编码：（此处由参赛校填写）第三届“挑战杯”天 津市大学生课外学术科技作品竞赛作品申报书作品名称：0 2-微 球蛋白均相免疫发光检测试剂盒学校全称：天津医科大学申报 者姓名（集体名称）：邵晨怡王子晴肖俊 宋缘缘王爽吴饪 类别：自然科学类学术论文口哲学社会科学类社会调查报告 和学术论文口科技发明制作A类口科技发明制作B类2说 明1. 申报者应在认真阅读此说明各项内容后按要求详细填写。2. 申报者在填写申报作品情况时只需根据个人项目或集体项 目填写A1或A2表，根据作品类别（自然科学类学术论文.哲学 社会科学类社会调查报告和学术论文科技发明制作）选择

2、填写B1. B2或B3表。所有申报者可根据情况填写C表，推荐者 填写D表。3. 表内项目填写时一律用钢笔.签字笔或打印，字迹要端正. 清楚，此申报书可复制。4. 序号.编码按照关于第三届“挑战杯”天津市大学生课外 学术科技作品竞赛申报作品编码的说明要求填写。5. 学术论文.社会调查报告及所附的有关材料必须是中文（若 是外文，请附屮文翻译），请以4号楷体打印在A4纸上，与申报书一同装订，学术论文及有关材料在8000字以内，社会 调查报告在15000字以内。6. 作品申报书须按要求由各校竞赛组织机构统一报送。7. 其他参赛事宜请向本校竞赛组织机构咨询。8. 报送地址：天津师范大学研修屮心203 （

3、天津市西青区宾水 西道393号）联系电话：（022） 23766112 3 A2. 申报者情况（集体项目）说明：1. 必须由申报者本人按要求填写；2. 申报者代表必须是所有作者中学历最高者，其余作者填写 按学历由高到低排列；3. 本表屮的学籍管理部门签章视为对申报者情况的确认。姓 名邵晨怡性别女出生年月1994. 11. 1713级学历本科学制四年入学时间XX. 9作品名称0 2-微球蛋白均相免疫发光检测试剂盒毕业论 文题目无邮政编码300202通讯地址 天津市河西区广东路1号 固定电话60357712邮政编码300130申报者代表情况 常住地通讯 地址天津市红桥区丁字沽零号路桃花南里153门

4、102手机 姓名性别年龄学历所在单位王子晴女21本科 天津医科大学肖俊男19本科天津医科大学宋缘缘女19本科 天津医科大学王爽女本科天津医科大学其他作者情况吴饪男 本科 天津医科大学学校学籍管理部门意见以上作者是否为xx年9月1日前正式注册在校的全日制非成人教育.非在职的各类高等 学校中国籍专科生本科生硕士研究生或博士研究生。是否（部门盖章）年 月 日资格认定院系负责人或导师意见本作品是 否为课外学术科技或社会实践活动成果是否负责人签名：年 月 FI V >/ 4 B3. 申报作品情况（科技发明制作）说明：1. 必须由申报者本人填写；2. 本部分中的科研管理部门签章视为对申报者所填内容的

5、确 认；3.4. 作品分类请按照作品发明点或创新点所在类别填报。作品 全称B 2-微球蛋白均相免疫发光检测试剂盒作品分类从下列项中 选择（D ） A.B.C.D.E.（LOCI）检测血清屮B 2-微球蛋白 的检测方法，获得建立标准曲线的最佳标准品浓度，绘制标准曲 线并建立数学模型，评估试剂盒的灵敏度和精确度，为临床提供 一个高效的检测方法。基本思路以抗人0 2-微球蛋白抗体包被的 受体球和生物素化抗人B 2-微球蛋白抗体组成检测体系，将待检 标本加入体系温育，待检抗原于液相屮分别与两种抗体结合，于 受体微球表面形成捕获抗体-待检抗原-生物素标记抗体复合物； 再加入链霉亲和素包被供体微球（通用试

6、剂）并温育，链霉亲和 素与生物素结合，促进供体微球和受体微球相互靠拢；当用激发 光照射，诱导单线态氧的产生和传递，产生荧光信号，荧光信号 的强度与待检抗原含量呈正向函数关系。标准品建立计量-反应曲 线并建立数学模型，未知标本抗原含量通过数序模型计算后获 得。计量-反应曲线及数学模型的建立：配制不同浓度标准品并检 测，所得结果绘制计量-反应曲线图，分析数据，考虑钩状效应的 影响，扩大或缩小蛋白质标5准品浓度范围并加一支范围内质控 品，建立并校正标准曲线，获得建立标准曲线的最佳标准品浓 度。创新点本实验采用LOCI技术定量测定血清0 2“免洗”，省去了洗涤误差，提高了分析的精密度。背景低：错 螯合

7、物产生长寿命荧光信号（持续1S），自然界非特异荧光寿命 较短（持续100 nS）,利用时间分辨容易测量到特异性光信号。 其次，680 nm的激发光不能激活天然荧光素，几乎不产生非特异 性荧光。6再次，因微球浓度较低，供体-受体距离远超过200 nm,无生物分子作用，单线态氧不能传递。较低背景信号，赋予 较高分析敏感度。检测速度快：LOCI分析系统赋予抗原抗体间相 互碰撞及作用的几率，从而缩短平衡所达到的时间，缩短了测定 时间，相比传统检测的免疫比浊法（两天完成测定），本实验只 需半小时。多级放大效应：其整个发光过程是三个相互偶联的光 激发过程，各级均有放大效应且其背景信号低，几乎不产生特异 性

8、荧光，所以其有较高的分析敏感度，检测的线性范围可达到3、5 个数量级，而酶标只能达到2、3个数量级。技术关键以抗人0 2- 微球蛋白抗体包被的受体球和生物素化抗人0 2-微球蛋白抗体组 成的检测体系检测血清屮B 2-微球蛋白含量的诊断试剂研制主要 涉及：1. 受体球包被抗人B 2-微球蛋白抗体。2. 生物素化抗人0 2-微球蛋白抗体。3. 配制B 2-微球蛋白不同浓度的标准品，倍比稀释成多组不 同浓度。4. 均相免疫发光法(双抗体夹心法)测B 2-微球蛋白标准 品，反复细分浓度，寻找最适标准品浓度。5. 绘制标准曲线并校正。6. LOCI技术定量测定血清 3 2-微球蛋白含量，抗体标记受体微球

9、和生物素标记抗体与待测 样本形成抗体-抗原-生物素标记抗体体系，通过不断细分标准品 浓度，建立计量-反应曲线并建立数学模型，y二(A1. 17056, C=0. 02096, D=441. 46787, r2=0. 99983)检测待测样 品得到所测吸光度即可求出待测样品浓度。7作品的科学性先进 性(必须说明与现有技术相比.该作品是否具有突出的实质性技术 特点和显著进步。请提供技术性分析说明和参考文献资料)0 2微 球蛋白因其在免疫应答屮扮演着重要的角色，使其在基础医学及 临床诊断上的应用成为近年来的研究热点，针对其检测方法的研 究与改进尚有很大的发展空间。传统检测B2微球蛋白的方法主 要有免

10、疫比浊法.放射免疫法等，免疫比浊法具有耗时长.反应不 灵敏.检测误差大等缺点，放射免疫法对实验室.放射处理及防护 条件要求高，成本高，其他的检测方法又各有其弊端。B2-微球 蛋白均相免疫发光检测试剂盒利用单线态氧传递均相发光免疫分 析法(LOCI)检测B 2-微球蛋白的含量，该反应无需洗涤，形成 了一个均相系统，采用三级放大发光系统，检测结果误差小且灵 敏度高，检测反应时间短，能够精确检测岀所测样本0 2-微球蛋 白的含量，是检测B 2-微球蛋白含量理想的非放射性免疫分析技 术方法。同时该试剂盒标准化了实验操作，使实验室检测更加简 便快捷，提高实验室人员的工作效率。在检测技术和手段不断创 新发

11、展且检测要求日益提高的大时代背景Z下，该试剂盒具有良 好的应用和推广前景。参考文献:1梁毅珊.32微球蛋白在 肾脏疾病诊治中的临床应用价值J.求医问药(下半月),xx, (10) :565-566. 2赵利霞，李振甲，魏彦林，等.化学发 光免疫分析J.世界科技研究与发展,2004, (4):24-33. 3李 玉芹血清肌钙蛋白- I均相化学发光免疫检测体系的初步建立 D.天津医科大学，xx. 4 Kappel A, Stephan S, Christ G, et al.Coagulation Assays Based on the Luminescent Oxygen Channeling I

12、mmunoassay TechnologyJ. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine : Cclm / Fescc,xx, 49(5) :60-855.8作品所处阶段(A ) A实验室阶段B中试阶段C生产阶段D(自填)技术转让方式实验室自主创新的实验项目，专利归实验 室所有。作品可展示的形式实物.产品模型图纸磁盘 现场演示图片录像样品使用说明及该作品的技术特点 和优势，提供该作品的适应范围及推广前景的技术性说明及市场 分析和经济效益预测使用说明：预期用途：用于人体血清.尿液内 的B 2-微球蛋白体外定量测定；试剂组成：试剂A:抗人B2-微 球蛋白

13、抗体包被的受体球试剂B:生物素化抗人0 2-微球蛋白抗 体试剂D:链酶亲和素标记的供体球。检验方法：加入试剂A.试 剂B液.样本各25U1,充分混匀，机器37°C震荡温育15mino避 光加入125 U1试剂D液，充分混匀，机器37°C震荡混匀 lOmino直接机器读数。结果解释：利用标准曲线和所测吸光度值 计算样本浓度，并将其与临床症状相联系。备注：详细操作过程 请见附B 2-微球蛋白(B2-MG)免疫均相发光检测试剂盒说明 书。技术特点及优势：0 2-微球蛋白均相免疫发光检测试剂盒 利用单线态氧传递均相发光免疫分析法(LOCI)检测3 2-微球蛋 白的含量，该反应无需洗涤，形成了均相反应环境，采用三级放 大发光系统。检测结果误差小且灵敏度高，反应时间V V 9短， 能够精确检测出所测样本0 2-微球蛋白含量，是检测B2-微球 蛋白含量理想的非放射性免疫分析技术方法。适用范围及推广前 景：适用于人体血清或尿液内的B 2B2微球蛋白在基础 医学及临床诊断上的应用己成为研究热点。其在血清或尿液屮的 含量变化，是某些疾病发生.发展和预后的重要指标。特别是作为一项肿瘤标志物在临床检测屮占有重要地位。本作品介绍的3 2- 微球蛋白均相免疫发光检测试剂盒相对于临床检