微球蛋白实验报告

1、微球蛋白实验报告均相免疫发光法检测0 2-微球蛋白的含量实验一：xx. 1. 4一. 实验目的：通过均相免疫发光方法检测02-微球蛋白标 准品（双抗体夹心法），建立血清屮0 2-微球蛋白的检测方 法。二. 实验材料：1. A液：包被抗人B 2-微球蛋白抗体的受体球（lmg/ml）2. B液：生物素化抗人0 2-微球蛋白抗体3. C液:0 2-微球蛋白标准品4. D液：供体球工作液5. E液：B 2-微球蛋白标准品稀释液：PH7.8 Tris-HCL 缓冲液。三. 实验方法：1. 试剂准备：1. 1 A液做1:100稀释：在EP管中加入450ul PH7.4 0. 01M PBS 液，加入4.

2、5ul受体球，混匀。1.2 B液用原液做1:1000稀释：在EP管屮加入lml生物 素稀释液，加入2ul生物素标记的抗体制备成1:500的抗体，另 取一个EP管，加入220ul生物素稀释液，再加入220ul 1:500 的抗体，混匀。2. 实验步骤：2. 1加入A液.B液.C液各25 U1,充分混匀，上机器37°C 震荡温育15mino2.2避光加入125 U1 D液，充分混匀，上机器37°C震荡混匀 lOmino2. 3直接机器读数。四. 标准品的配制：配制 c0:0mg/l cl:0. 5mg/l c2:lmg/l c3:2. 5mg/l c4:5mg/l c5:10m

3、g/18mg/l B 2-微球蛋白12mg/l P 2-微球蛋白等体积混合，得到10mg/l B 2-微球蛋白倍比 稀释后，得到5mg/l B 2-微球蛋白倍比稀释后，得到2. 5mg/l 2-微球蛋白1:5稀释，得到lmg/1 P 2-微球蛋白倍比稀释，得到O.5mg/1B2-微球蛋白标准品稀释步骤：1. 8mg/l :600ul +12mg/l :600ul,等体积混合后，得到 c5： 10mg/l2. 取c5600ul,倍比稀释：600ul+600ul E液，得到 c4:5mg/l3. 取 c4300ul,倍比稀释:300ul+300ul E 液,得到 c3:2. 5mg/l4. 另取

4、c4300ul, 1:5 倍稀释：300ul+1200ul E 液，得到c2：lmg/15. 取c2300ul,倍比稀释：300ul+300ul E液,得到 cl: 0. 5mg/l四.实验结果：标准品浓度(mg/1)信号值0670. 59381191632. 5680854706104022 五.结果讨论:1. 随标准品浓度越高，信号值越低，说明反应存在钩状效 应。应进一步稀释标准品浓度，作出标准曲线。2. 不排除有人为因素，所以需要进行重复实验。实验二：xx. 1. 5一. 实验目的：由于实验一存在钩状效应，所以进行标准品浓 度稀释，看能否做岀标准曲线。二. 试剂配制：取标准品c2 :lm

5、g/l,稀释其至1:10. 1:100. 1:1000. 1:10000.1:100000.1. 取 C2:lmg/110ul+90ul E 液，得到 1:10 稀释度。2. 取1:10稀释度液10ul+90ulE液，得到1:100稀释度3. 取1:100稀释度液10ul+90ulE液，得到1:1000稀释度4. 取1:1000稀释度液10ul+90ulE液,得到1:10000稀释 度5. 取 1:10000 稀释度液 10ul+90ulE 液,得到 1:100000 稀 释度三. 实验步骤：3. 1加入A液.B液.C液各25 U1,充分混匀，上机器37°C 震荡温育15mino3.2避光加入125 Hl D液，充分混匀，上机器37°C震荡混 匀 lOmino3. 3直接机器读数。四. 实验结果：标准品浓度信号值515 选取0,0. 0001,0.001,0.01,0. 1,绘制出标准曲线。五. 实验讨论：1