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文档简介

1、FACSAri a流式细胞仪上样准备（一）上样时需要准备的物品漂白水 3-5L75%酒精 5L无菌 PBS或生理盐水 5-10L（二） FACSAri a 分选时需自备的质控品Accudrop beads （分选时液滴延迟校准） ：货号 345249，货期需 4 周，如需分选要提前订购。注：做分选时需自备，如无自备亦可上样，但不保证分选效果。（三）上样时，样品的准备保证细胞活性：需4冰上保存保证样品为单个细胞，不黏连：反复吹打，用尼龙膜过滤分选时，需再次培养的，收集管内需装至少1/2 培养基。建立实验模板1.在软件界面左侧 Browser 面板下，依次点击 New Folder、Experim

2、ent、Specimen（均可重命名），单击 Specimen左侧“ +”符号，显示下方的 Tube，点击左侧灰色指示箭头，使之变成绿色。2. 在软件 Cytometer 面板上，点击 Parameters选项卡，选择实验所需荧光通道（按 Ctrl 键可多选），并删除多余通道。选择荧光素名称、信号放大类型（ log/lin ）、信号脉冲类型（ H/A/W ），3. 在右侧 worksheet 页面中，画出实验所需模板：选择点图（双参数）或直方图（单参数），在图中选择参数，并建立所需“门” （多边形、矩形、十字象限形、 线形，根据实验情况而定） 。利用鼠标右键 Show Populations选

3、项建立图之间的联系。4.至此，一个简单的实验模板基本建成。 现在可以将样本管放在上样台上，点击上样面板的 load，此时 Acquire Data 自动被激活或手动点击采集控制面板上的 Acqire data 按钮，仪器开始获取样本数据。5.调整 Cytometer 面板中各通道电压， 使 FSC/SSC 中信号位于利于观察的位置。调整阈值（Threshold），去除碎片和噪音信号。 调整上样速度 （FlowRate）。6.在 FSC/SSC中调整门的位置、 大小和形状， 使之圈住感兴趣细胞群。 调节荧光通道的电压，使荧光信号位于合适的位置。7.在鼠标右键中打开数据显示，观察实验的实时结果。8.实验条件调整完毕后，在上样

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