兰盆花黄酮类抗氧化作用

1、兰盆花黄酮类抗氧化作用乌日娜张维兰孙福祥张昕原巴根那王志民李宝山 提要兰盆花黄酮类化合物在VB2MetNBT体系中对的IC50为2.7 g/ml，SC502.5 g/ml，在Vit.Ccoppercyt.c体系中.OHR50为14.6 g/ml在Fe2+/H2O2体系中能抑制MDA生成。其清热的功效很可能与其清除、.OH、MDA的抗氧化作用有关。 关键词兰盆花黄酮；阴离子氧自由基；羟自由基；丙二醛 Antioxidation of Flavonoids of Scabiosa Comosa Fisch Urina, Zhang Weilan, Sun Fuxiang, et al Inner

2、Mongolia College of Traditional Mongolian Medicine,Tongliao 028041 AbstractFlavonoids compounds of Scabiosa comosa Fisch had antioxidation to (IC50=2.7g/ml,SC50=2.5g/ml) in the system of VB2MetNBT, to.OH (SC50=14.6 g/ml)in the system of Vit.C-copper-cyt.c,could inhibited the produce of MDA in the sy

3、stem of Fe2+/H2O2.Their antipyretic effect would have relation to the effect of scavenging 、.OH、MDA. Key WordsFlavonoids of Scabiosa comosa Fisch;Oxygen free radical;Hydroxyl free radical;Malondialdehyde 蒙药材兰盆花又称蒙古山萝卜，为川续科植物窄叶兰盆花(Scabiosa Comosa Fisch,et Suait)。具有清热，清协日之功能，可用于肺热、肝热等证。现已证明，衰老、辐射损伤、肿瘤

4、、炎症、缺血再灌注损伤与自由基有关。作者在前期工作的基础上2，采用文献3方法提取，分离，纯化了兰盆花黄酮类物质，并进行了抗氧化实验。 1材料和方法 1.1试剂及仪器 维生素C(Vit.C)、蛋氨酸(Met)、四氮唑兰(NBT)，芦丁、皮素等均为国产分析纯。细胞色素C(cyt.c)、硫化巴比妥酸(TBA)、四乙基甲烷(TEP)、脱氧核糖(DR)，均分Sigma公司产品。所用仪器为日立557型分光光度升，UV754型分光光度升。 1.2兰盆花黄酮的提取 兰盆花经鉴定为正品。黄酮类提取，分离，纯化，按文献3进行，最后得到黄酮类物质(FSCF)用甲醇溶解定容为115 g/ml。 1.3自由基生成体系

5、生成体系采用VB2MetNBT法4，.OH生成体系采用Vit.CCoppercyt.c法5，MDA生成体系采用Fe2+H2O2DR法6。 2结果与讨论 2.1兰盆花经75%乙醇水浴回流提取2次，合并滤液，减压蒸干，石油醚脱色，正丁醇萃取，所得到物质经波长扫描基本上和标准品芦丁、皮素有相同的吸收峰(图1)。黄酮类化合物是泛指两个芳环通过三碳键相互联结而成的一系列化合物。天然黄酮类系上述母体的衍生物。紫外光谱多数黄酮类有两个吸收峰，即带在300400 nm，带在240285 nm范围内。本文分离到FSCF的吸收峰基本上与芦丁、皮素相同，说明作者分离到物质属于黄酮类化合物。 A.皮素 B.芦丁 C.

6、兰盆花黄酮 图1兰盆花黄酮类波长扫描 2.2FSCF对、.OH自由基的抑制和清除作用 在VB2MetNBT体系中加入不同量的FSCF后，随着加入量的增加其抑制和清除作用增强。当加入量为5.45 g/ml时，对的抑制率(I%)为82.9%，清除率(S%)为76.5%。抑制率达到50%时的药物浓度(SC50)为2.5 g/ml。在Vit.CCoppercyt.c体系中加入35.9 g/ml时S%为87.0，SC50为14.6 g/ml(表1)。上述结果提示FSCF对的清除和抑制作用大于对.OH的作用。 表1兰盆花黄酮对O(-)/(*)2、.OH的抑制和清除作用 VB2MetNBT体系 Vit.Cc

7、oppercyt.c体系 C(g/ml) I% s% C(g/ml) S% O - - 3.6 25.9 0.15 1.4 13.4 7.2 29.6 0.91 32.8 41.3 14.4 48.1 1.82 41.4 49.7 21.6 61.1 3.63 65.7 65.4 28.7 75.9 5.45 82.9 76.5 35.9 87.0 IC50=2.7 g/ml；SC50=2.5 g/ml；SC50=14.6 g/ml 2.3FSCF对MDA生成的抑制作用 根据Fenton reaction原理，采用Fe2+H2O2DR体系产生的MDA，用TBA显色，TEP做标准6，当加入FSC

8、F后，随着加入量增加，MDA生成量减少，当加入量达5 mg时其S%可达89.1%，说明FSCF有很强的抑制MDA生成作用。 生物体内的自由基产生和清除失衡必然造成自由基堆积。超生理量的自由基均可诱导生物膜的损伤，导致代谢紊乱，产生疾病。因此寻找有效的自由基清除剂就成为当前医药界研究的热点。.OH是生物体内产生途径多，攻击性强两种自由基，是抗菌氧化的主要对象。已知许多蒙药材含有黄酮类化合物，而黄酮类化合物具有抗氧化作用。因此提取、分离蒙药材中黄酮类物质，对蒙药抗氧化剂研究很有意义。兰盆花清热、清协日的作用很可能与其清除和抑制、.OH、MDA有关，有待深入研究。 作者单位:内蒙古蒙医学院中心实验室，通辽028041 参考文献 1中国医学百科全书编辑委员会.中国医学百科全书*蒙医学.上海：上海科技出版社，1992120 2李宝山.乌日娜，张昕原，等.5种蒙药材清除自由基作用.时珍国药研究，1997，8(4)308 3中国医学科学院药用植物资源研究开发所.中国医学科学院药物研究所.中药志().北京：人民卫生出版社，198835 4陈奇主编.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993953 5王成莲，刘莉.比色法测定抗坏血酸体系产生.OH自由基.生物化学与生物物理学进展，1989，16(6)473 6Ahmad A,et